176180. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antigénkészítmények előállítására
n 176180 12 C) Az inaktivált diftéria toxint tartalmazó liposzómák hatása tengerimalacok immun-reakciójára 5 Porcellus hím tengerimalacból álló csoportokat szubkután injekciózunk a 0. napon 0,4 pg inaktivált diftéria toxinnal vagy maktivált diftéria toxint tartalmazó liposzómákkal, 1 térfogat/súly% lipoid-koncentrációnál. Az állatoktól 21 nap múlva vért veszünk. Mindkét csoport állatait a 28. napon injekciózzuk 0,4 pg csak inaktivált diftéria toxint tartalmazó oldattal és 7 nap múlva vért veszünk. A szérumokat a 6.b) példa szerint hemagglutinációs vizsgálatoknak vetjük alá és a kapott eredményeket mindegyik csoportnál az összes állat hemagglutinációs titere reciprokának az átlagában fejezzük ki. A tengerimalacok első injekciója előtti vérszéruma szolgál negatív kontrollként és nem mutat inaktivált diftéria toxin-reakciót. Az eredményeket az V. táblázatban foglaltuk össze. V. Táblázat 5 tengerimalacból álló csoport szérumának hemagglutinációs vizsgálata 1. az első inaktivált diftéria toxin- vagy inaktivált diftéria toxint tartalmazó liposzóma-injekciót követő 21 nap múlva. 2. a csak inaktivált diftéria toxint tartalmazó oldatos injekciót követő 7 nap múlva Inaktivált Hemagglutinációs diftéria titer reciproka toxin koncent-Inaktivált rációja Inaktivált diftéria Mg-ban diftéria toxint toxin tartalmazó liposzómák Primer hatás 0,4 <2 <2 Szekunder hatás 0,4 16 150 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás antigén készítmény előállítására, amely számos mikrohólyagból áll, és mindegyik mikrohólyag legalább egy lipoid kettős rétege a külső felületen helyezkedik el, amelyhez valamely patogén mikroorganizmusból származó antigén protein kapcsolódik, azzal jellemezve, hogy a) valamely lipoidot, előnyösen természetes vagy szintetikus lecitint, adott esetben szerves oldószerben történő oldás és adott esetben történő bepárlás után, vizes közegben erélyesen keverünk, a kapott mikrohólyagokat valamely antigén protein jelenlétében további erélyes keverésnek vetjük alá, vagy b) valamely lipoid, előnyösen természetes vagy szintetikus leticin, a vizes közeg és az antigén protein keverékét erélyes keverésnek vetjük alá. 2. Az 1. igénypont a) eljárásváltozata szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a kiindulási lipoid anyagot feloldjuk valamely szerves oldószerben, az oldószert elpárologtatjuk, a kapott lipoid-fázist vizes oldatban diszpergáljuk és erélyesen keverjük, majd hozzáadjuk az antigén proteint és az erélyes keverést folytatjuk. 3. Az 1. igénypont a) eljárásváltozata szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a kiindulási lipoid anyagot vizes oldathoz adjuk és keverés közben felmelegítjük, azután adagoljuk az antigén proteint és a kapott keveréket ismét erélyes keverésnek vetjük alá. 4. Az 1. igénypont a) eljárásváltozata szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a kiindulási lipoid anyag alkanolos oldatát valamely vizes oldatba gyorsan befecskendezzük, a kapott liposzórha-készítményt ultraszűréssel töményítjük, majd hozzáadjuk az antigén proteint és a kapott keveréket erélyes keverésnek vetjük alá. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a lipoid keverése során képződött egylamellás szerkezetű mikrohólyagokat antigén proteinekkel kever|ük össze. 6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a lecitin keverése során képződött mikrohólyagokat antigén proteinnel keverjük össze. 7. Az 1—4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a patogén mikroorganizmusokból származó antigén proteint alkalmazunk. 8. Az 1 -4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy vírusból származó antigén proteint alkalmazunk. 9. A 8. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy influenza-vírusból származó vírust alkalmazunk. 10. Az 1—9. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a lipoid keverése során kapott 20-200 nm mérettartományú mikrohólyagokat antigén proteinnel keverjük össze. 11. Az 1—4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az erélyes keverést szónikálással végezzük. 12. Az 1 -4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 €
