175922. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás gamma-karboxi-glutaminsav és védett származékai előállítására

7

175922

8

zsöljük, szüljük, éterrel mossuk és szárítjuk. 1 g (60%) cím szerinti terméket kapunk.

Op.: 143-145°, R? 0,15-0,25.

Elemzési eredmény a Ci4H2S06N • H20 (M: 5 321,5) képletre vonatkoztatva:

számított: C = 52,30%, H = 8,46%,

N = 4,36%,

talált: C =52,67%, H =8,49%, 10

N = 4,20%.

4. példa

15

7-Karboxi-glutaminsav-a-etil-7,7-di-terc-butil-észter (Ic általános képlet, ahol R etil-csoportot,

R’ terc-butil-csoportot jelent) oxálsavas-só 20

előállítása

24 g (59,5 mmól) formamido-propán-tetrakarbonsav-triésztert (1. példa, 2. lépés) feloldunk 20 ml dioxánban, és egy órán át gőzfürdőn melegítjük, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradé- 25 kot 200 ml éterben feloldjuk, vízzel mossuk, és vízmentes nátrium-szulfáton való szárítás után bepároljuk. A kapott N-formil^y-karboxi-glutaminsav-triésztert (R* 0,86-0,96) feloldjuk 25 ml metanolban, és hozzáadjuk 42 ml metanol és 8 ml tömény 30 vizes sósav elegyét. A reakcióelegyet öt órán át szobahőmérsékleten keveijük, majd a metanolt csökkentett nyomáson kidesztilláljuk. A képződött emulziót háromszor 50 ml éterrel kivonatoljuk. Az éteres fázisból vízmentes nátrium-szulfáton való 35 szárítás és bepárlás után visszanyerünk 3,5 g (21%) N-formil-7-karboxi-glutaminsav-triésztert (R* 0,86—0,96). A vizes fázist szilárd nátriumhidrogén-karbonáttal semlegesítjük, majd háromszor 100 ml éterrel kivonatoljuk. Az éteres oldatokat vízmentes 40 nátrium-szulfáton szárítjuk, majd csökkentett nyomáson mintegy 50 ml-re töményítjük. Ezt követően

3,6 g vízmentes oxálsav éteres oldatát adjuk hozzá.

Az oldatot n-hexánnal hígítjuk zavarosodásig, majd állni hagyjuk. A kivált kristályokat kiszűrjük, éter- 45 rel mossuk és szárítjuk. 13 g (61%) dm szerinti terméket kapunk.

Op.: 131-132°, Rj 0,82-0,92.

Elemzési eredmény a CigHîiOjoN (M: 421,4)

képletre vonatkoztatva:

50

számított:

C =51,30%, N = 3,32%,

H =7,41%,

talált:

C =51,05%, N = 3,28%.

H =7,50%,

55

5. példa

7-Karboxi-glutaminsav előállítása

0,65 g (2 mmól) 7-karboxi-glutaminsav-7,7-diterc-butil-észtert (3. példa) feloldunk 4 ml trifluorecetsavban, és éjszakán át állni hagyjuk. A reakcióelegyet éterrel hígítjuk, a kivált csapadékot szűrjük és éterrel mossuk, majd szárítás után 20 ml vízben feloldjuk és az oldatot liofilizáljuk. Az oldást és a liofllizálást még kétszer megismételjük. A maradékot 2 ml vízben feloldjuk, és 3 ml etanolt adunk hozzá. A kivált kristályokat szüljük, 60%-os vizes etanollal mossuk és szárítjuk. 0,23 g (60%) cím szerinti terméket kapunk.

Op.: 156,5-157°.

Elemzési eredmény a C6H906N (M: 191,1) képletre vonatkoztatva:

számított: C =37,30%, H =4,75%,

O =50,22%, N =7,32%,

talált: C =37,67%, H =5,00%,

O =50,20%, N =7,23%.

Szabadalmi igénypontok:

1. Eljárás 7-karboxi-glutaminsav és la, Ib, Ic általános képletű védett származékai — ahol X jelentése a peptidszintézisekben használatos acilvagy uretán-típusú amino-védőcsoport, továbbá R és R’ jelentése a peptidszintézisekben használatos, egymástól függetlenül szelektíven eltávolítható karboxil-védőcsoport — előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely III általános képletű maion észtert- ahol R’ jelentése a fenti — és formaldehidet valamely IV általános képletű N-védett amino-malonészterrel — ahol X és R jelentése a fenti - kondenzálunk, majd a kapott II általános képletű 1 -amino-1,1,3,3-propántetrakarbonsav-származék

— ahol X, R és R’ jelentése a fenti — egyik R csoportját lehasítjuk, ezt követően a kapott vegyületet dekarboxilezzük és a kapott I általános képletű 7-karboxi-glutaminsav-származékról — ahol X, R és R’ jelentése a fenti — a védőcsoportokat teljesen vagy részlegesen eltávolítjuk.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy di-terc-butil-malonátot formamido-malonsav-dietilészterrel kondenzálunk.

3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy di-terc-butil-malonátot benziloxikarbonil-amino-malonsav-dietilészterrel kondenzálunk.

1 rajz

A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 814015 — Zrínyi Nyomda, Budapest

4