175512. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hipfizis szövetekből származó protein hormonok izolására és kinyerésére
7 175512 1000 ml 500g polietilénglikol 3000-ből és 585 ml vízből álló oldatot adunk. Az oldatot egy óráig keverjük, majd centrifugáljuk. A csapadék FSH és LH hipofízis hormonokat tartalmaz. 5. példa 5 egység növekedési hormont tartalmazó előző hipofízis szövettenyészetből 100 ml táptalajt ultra- 10 szűréssel besűrítünk 1 ml-re. 0,5 ml 0,5 g polietilénglikol 6000/ml tartalmú vizes oldatot adunk hozzá. Az oldat pH-ját 4,8-ra állítjuk. A csapadékot elválasztjuk, 0,5 ml vízben oldjuk és 63 cm hosszú és 0,9 cm átmérőjű Sephadex G 100 tar- 15 talmú III pufferrel egyensúlyozott oszlopra visszük. A növekedési hormonokat tartalmazó frakciókat szedjük. A kapott frakciók 1,0 egység növekedési hormont tartalmaznak, a fajlagos aktivitás minden mg proteinre 2,0 egység. io Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás hipofízis szövetekből származó emberi növekedési hormon és kívánt esetben tüsző stimu- 25 láló hormon és luteinizáló hormon izolálására és kinyerésére protein hormonokat tartalmazó vizes extraktum kicsapó szerrel történő frakcionált kicsapásával, azzal jellemezve, hogy a vizes extraktumot 10— 17súly% koncentrációjú 3000—6000 molekulasúlyú polietilénglikollal keverjük össze, az oldat pH-ját a keverés előtt vagy után 4—6 értékre, előnyösen 4,5—5,0-re állítjuk, a kicsapódott emberi növekedési hormont izoláljuk és kívánt esetben ismert módon tovább tisztítjuk és kívánt esetben további 20—30 súly%-os polietilénglikolt adunk az anyalúghoz, és a kicsapódott tüsző-stimuláló hormont és luteinizáló hormont izoláljuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az extraktumban a polietilénglikol koncentrációját fokozatosan 0—30%-ra (súly/térfogat) növeljük. 3. Az 1-2. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, növekedési hormon izolálására, azzal jellemezve, hogy a kivonatból kicsapott frakciókat akkor izoláljuk, ha az extraktum 10—14% (súly/térfogat) polietilénglikolt tar talmaz. c A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 814742 - Zrínyi Nyomda, Budapest