175266. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dezacetil 890 A1 és dezacetil 890 A3 előállítására
175266 Lakmusz-tej: vegetatív növekmény — cserszínű — barna, légmicélium — nincs, szín — nincs oldható pigment, a lakmuszpapír kékessé válik, 5 koagulálás és/vagy peptonizálás - részleges peptonizálás, bázikussá válik. Fölözött-tej: vegetatív növekmény - cserszínű, 10 légmicélium — nincs, oldható pigment - nincs, koagulálás és/vagy peptonizálás — részleges peptonizálás, bázikussá válik. 15 Tirozin agar: vegetatív növekmény - cserszínű, légmicélium — orchidea-szín (10 gc) és fehér keveréke, oldható pigment - nincs, 20 tirozinlebomlás — pozitív. Az összes fenti adatot — hacsak másképpen nem jelöltük - 28 °C-on végzett háromhetes inkubáció után regisztráltuk. A közeg pH-ja e vizsgáia- 25 toknál közelítőleg semleges volt, azaz 6,8-7,2 közötti. Az alkalmazott színjelzések megfelelnek a Color Harmony Manual (1958) 4. kiadás Container Corporation of America, Chicago, Illinnois definícióinak. 30 A Streptomyces cattleya-t abból a szempontból is megvizsgáltuk, hogy mennyire képes felhasználni vagy asszimilálni a különböző szénhidrátokat. E célból a mikroorganizmust alap szintetikus közegben (Pridham and Gottlieb) tenyésztettük, amely 35 1% szénhidrátot tartalmazott, a tenyész ist 28 °C-on három hétig végeztük. A vizsgált ’,Özeg pH-ja közelítőleg semleges (6,8-7,2) volt. Az I. táblázat bemutatja a Strep' myces cattleya szénhidrát-forrásait, a + jel a jó növekedést 40 jelenti, a ± a gyenge növekedést és a - jel azt mutatja, hogy kedés. ezen a szénhidráton nem volt növe-I. Táblázat 45 glükóz + maltóz + arabinóz — mannit ± cellulózmannóz 50 + fruktóz + raffinózinozitramnóz 55 lak tózszacharóz + xilóz ± A mikroorganizmus növekedésének mértéke a következőképpen változik a hőmérséklet-, az oxigénszükséglet és a nitrát hatásának a változásával: Hőmérséklethatárok (élesztő-extraktum-glükóz+sók agar): 65 28 UC - jó 37 °C — közepes 50 °C — nincs növekedés. Oxigénszükséglet („Stab”-tenyészet élesztő extraktum-glükóz+sók agarban): aerob nitrát-redukció — pozitív. Megjegyezzük, hogy a tienamicin előállítása nem csupán a Streptomyces cattleya organizmushoz kapcsolódik, vagy olyan organizmusokhoz, amelyek a fent megadott mikroszkopikus és növekedési jellemzőket mutatják, mert ezek csak illusztratív jellegűek. A találmány tárgyát képezi a fentiekben leírt mikroorganizmus különböző módokon képezett mutánsainak, például röntgensugárzással, ultraibolya-sugárzással, nitrogén-mustárral, bakteriofág-behatással és hasonlókkal kapott mutánsoknak az alkalmazása is. A tienamicint, valamely szokásos vizes tápközegben, szabályozott reakciókörülmények között végzett aerob fermentációval, a Streptomyces cattleya mikroorganizmussal történt beoltás útján állítjuk elő. Vizes tápközegként alkalmazhatunk bármely olyan tápközeget, amelyet más antibiotikum tenyésztésénél használnak. Ez a tápközeg szén-, nitrogén- és szervetlen só-forrásokat tartalmaz, amelyeket a mikroorganizmus asszimilálni képes. A találmány tárgya továbbá a 890Ai és a 890 A3 antibiotikumok új dezacetilezése is. A 890Ai és a 890Aj előállítása Sterptomyces flavogriseus NRRL 8139 mikroorganizmus fermentálásával történik. A 890Ai előállítható Streptomyces flavogriseus NRRL 8140 fermentálásával is. Kiteijedt taxonómiai vizsgálatok alapján úgy találtuk, hogy a Streptomyces flavogriseus specieshez tartoznak a mikroorganizmus törzsek, és a Merck and Co., Inc. Rahway, N. J. tenyészet gyűjteményében az MA—4434a és az MA—4600a számot kapták. A fenti törzsekből egy-egy tenyészetet deponáltunk a Northern Regional Laboratories, Northern Utilization Research and Development Division, Agricultural Research Service, U. S. Department of Agriculture, Peoria, 111., törzsgyűjteményében és deponálási számuk NRRL 8139 és 8140. A Streptomyces flavogriseus NRRL 8139 termeli a 890Ai és 890A3 antibiotikumokat, melyeket gyakorlatilag tiszta formában izolálunk a fermentléből. A Streptomyces flavogriseus NRRL 8140 890Ai antibiotikumot termel anélkül, hogy a 890Aj antibiotikum nyomait ki tudnánk mutatni benne. A Streptomyces flavogriseus NRRL 8139 morfológiai és tenyésztési jellemzőit az alábbiakban részletezzük: Morfológia: A sporofórák elágazó, egyenes-hajlékony bojtokat képező spóraláncok. A láncok több mint 10 spóra hosszúságúak. A spórák gömb alakútól az oválisig terjedő alakúak 0,9/rx 1,2/r (970x) 4
