175264. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tienamicin elkülönítésére és tisztítására
29 175264 30 az anyag 130-140 °C-on lágyul, majd zsugorodik, 170-174 °C-on megsárgul, 180-200 °C-on zsugorodik és fokozatosan vörösesbarnára színeződik, végül a szilárd anyag maradéka 205 °C-on elszenesedik. A termék ultraibolya abszorpciós spektrumában 296,5 nm hullámhossznál észlelhető abszorpciós maximum (Ej = 268,2). A termék elemzési adatai a következők: Ha a terméket szobahőmérsékleten 4 órán át vákuumban szárítjuk, 5,67%-os súlyveszteség lép fel. Elemi analízis a Cj tHj6N204S képlet alapján: számított: C =47,68%, H =6,13%, N= 11,52%, S =11,57%, O =23,1%, talált: C =47,68%, H =6,22%, N =11,48%. Fajlagos optikai forgatóképesség: [a]^7 = +80° (c=lmg/ml, 10 m mólos káliumfoszfát-pufferoldatban). Infravörös spektrum jellegzetes sávjai (a termék nujolban felvett infravörös abszorpciós spektrumát az 1. ábrán mutatjuk be): 1765, 1650—1550, 2800-2500 és 3500-3100 cm-1. NMR-spektrum jellemző sávjai (D20, 100 MHz): ő = 1,275 (d), 3,39 (dd), 3,15 (m) és 4,20 (m). Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás tienamicin elkülönítésére a Streptomyces cattleya NRRL 8057 törzs által termelt, tienamicint tartalmazó fermen de vekből vagy oldatokból, és a kapott tienamicin tisztítására, azzal jellemezve, hogy a tienamicint tartalmazó fermentlevet vagy oldatot szulfonsav-csoportokat hordozó kationcseréíő gyantával töltött oszlopon bocsátjuk át, a gyantaoszlopot bázissal eluáljuk, az elurtumfrakciókat összegyűjtjük, az aktív frakciókat egyesítjük, majd az egyesített aktív frakciókat legföljebb 1800-as molekulasúlyú poliakrilamid-géllel vagy legföljebb 700-as molekulasúlyú dextrángéllel töltött oszlopon bocsátjuk át, a gélt vízzel vagy egy rövidszénláncú alkohol vizes oldatával eluáljuk, az eluátumot frakciókba gyűjtjük, és az aktív frakciókat egyesítjük. (Elsőbbsége: 1974. december 19.) 2. Eljárás tienamicin elkülönítésére a Streptomyces cattleya NRRL 8057 törzs által termelt, tienamicint tartalmazó fermentlevekből vagy oldatokból, és a kapott tienamicin tisztítására, azzal jellemezve, hogy a) a tienamicint tartalmazó fermentlevet vagy oldatot szulfonsav-csoportokat hordozó kationcserélő gyantával töltött oszlopon bocsátjuk át, a gyantaoszlopot bázissal eluáljuk, az eluátumot frakciókba gyűjtjük, az aktív frakciókat egyesítjük, az egyesített aktív frakciókat polisztirol-kvaterner ammóniumsó típusú anioncserélő gyantával töltött oszlopon bocsátjuk át, az effluenst összegyűjtjük, majd az egyesített frakciókat legföljebb 1800-as molekulasúlyú poliakrilamid-géllel vagy legföljebb 700-as molekulasúlyú dextrángéllel töltött oszlopon bocsátjuk át, a gélt vízzel vagy egy rövidszénláncú alkohol vizes oldatával eluáljuk, az eluátumot frakciókba gyűjtjük, és az aktív frakciókat egyesítjük, vagy b) a tienamicint tartalmazó fermentlevet vagy oldatot szulfonsav-csoportokat hordozó’ kationcserélő gyantával töltött oszlopon bocsátjuk át, a gyantaoszlopot bázissal eluáljuk, az eluátumot frakciókba gyűjtjük, az aktív frakciókat egyesítjük, az egyesített aktív frakciókat polisztirol-kvaterner ammóniumsó típusú anioncserélő gyantával töltött oszlopon bocsátjuk át, az effluenst összegyűjtjük, az effluenst szulfonsav-csoportokat aromás gyűrűhöz kötött állapotban tartalmazó kationcserélő gyantával töltött oszlopon bocsátjuk át, a gyantaoszlopot pufferoldattal vagy vízzel eluáljuk, az aktív frakciókat egyesítjük, az egyesített aktív frakciókat legföljebb 1800-as molekulasúlyú poliakrilamid-géllel vagy legföljebb 700-as molekulasúlyú dextrángéllel töltött oszlopon bocsátjuk át, a gélt vízzel vagy egy rövidszénláncú alkohol vizes oldatával eluáljuk, az eluátumot frakciókba gyűjtjük, az aktív frakciókat egyesítjük, az egyesített aktív frakciókat betöményítjük, majd a koncentrátumot polisztirol, hidrofób térhálós divinilbenzol-polimerrel töltött oszlopon bocsátjuk át, a polimert vízzel eluáljuk, az eluátumot frakciókba gyűjtjük, és az aktív frakciókat egyesítjük, vagy c) a tienamicint tartalmazó fermentlevet vagy oldatot szulfonsav-csoportokat hordozó kationcserélő gyantával töltött oszlopon bocsátjuk át, a gyantaoszlopot bázissal eluáljuk, az eluátumot frakciókba gyűjtjük, az aktív frakciókat egyesítjük, az egyesített aktív frakciókat polisztirol-kvaterner ammóniumsó típusú anioncserélő gyantával töltött oszlopon bocsátjuk át, az effluenst betöményítjük, a koncentrátumot polisztirol, hidrofób térhálós divinilbenzol-polimerrel töltött oszlopon bocsátjuk át, a polimert vízzel eluáljuk, az eluátumot frakciókba gyűjtjük, és az aktív frakciókat egyesítjük, és kívánt esetben egy, tienamicint és szervetlen ionokat tartalmazó oldatot XAD—2 polisztirol-gyantával töltött oszlopon bocsátunk át, a polimert vízzel eluáljuk, az eluátumot frakciókba gyűjtjük, és az aktív frakciókat egyesítjük. (Elsőbbsége: 1975. szeptember 18.) 3. A 2. igénypont szerinti c) élj árás változat foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a polisztirol, hidrofób térhálós divinilbenzol-polimert foszfátpufferrel eluáljuk, az eluátumot frakciókba gyűjtjük, az aktív frakciókat egyesítjük, majd az egyesített aktív frakciókat polisztirol, hidrofób térhálós divinilbenzol-polimerrel töltött oszlopon bocsátjuk át, a polimert vízzel eluáljuk, az eluátumot frakciókba gyűjtjük, és az aktív frakciókat egyesítjük. (Elsőbbsége: 1975. szeptember 18.) 4. A 2. igénypont szerinti b) eljárásváltozat foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az utolsóelőtti műveleti lépésben kapott, egyesített aktív frakciókat legalább egyszer egy polisztirol, hidrofób térhálós divinilbenzol-polimerrel töltött oszlopon bocsátjuk át, az oszlopot foszfátpufferoldattal vagy vízzel eluáljuk, az eluátumot frak-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 15
