175221. lajstromszámú szabadalom • Magas kamazulén és biszabolol tartalmú kamillafajta
5 175221 6 oxidáció útján való azulénveszteség megakadályozására a desztilláció folyamán kis mennyiségű aszkorbinsavat adagoltunk a kezelt anyaghoz. Az átfutott desztillátumból petroléterrel vagy pentánnal csapattuk ki az illóolajokat. Az oldószer lepárlása után az összes olajtartalmat gravimetrikusan határoztuk meg. A nyert olajban levő kamazulént spektrálfotometrikus úton, a biszabololt pedig gázkromatografikusan határoztuk meg. A meghatározást olyan desztillációs berendezésben végeztük, amely lényegében egy kb. 1 literes gömblombikból, kb. 30 cm hosszú desztillációs feltétből és egy kb. 50 cm hosszú leszálló golyós hűtőből áll. Felfogó edényként egy 1 literes rázótölcsér szolgált, amelynél a 400 ml-es értéket egy jellel jelöltük. Az illóolajokat gravimetrikus úton határoztuk meg A kamillavirágból 10g-otaz 1 literes gomblombikban 600 ml vízzel és 0,5 g aszkorbinsawal vegyítettünk össze és ezeket összeráztuk. Forrkő és néhány csepp szilikonhabtalanító hozzáadása után kis lángon körülbelül 3 órás desztillációs idő alatt 400 ml desztillálódott le. A desztilláció végeztével a desztillációs feltétet eltávolítottuk és — a hűtőhöz hasonlóan — kétszer 20-20 ml petroléterrel (30-50 C°, az üledék kisebb mint 60 mg/liter) vagy pentánnal átöblítettük. A petrolétert a desztillátummal a rázótölcsérben egyesítettük és körülbelül 80 g konyhasó (65-70 ml) hozzáadása után egy percig erőteljesen ráztuk. Ezután a desztillátumot még háromszor 20-20 ml petroléterrel kiráztuk. A teljes petroléter extraktumot 200 ml-es csiszolt Erlenmeyer lombikba gyűjtöttük és körülbelül 4g-vízmentes nátriumszulfáton egy óra hosszat szárítottuk. A megszárított petroléter extraktumot egy Schleicher és Schüll 5892 szűrőn 150 ml-es ldtárázott csiszolt állólombikba szűrtük, a szárítószert pedig lehetőleg nem engedtük a szűrőre. A nátriumszulfát maradékot Erlenmeyer lombikban még háromszor 10-10 ml petroléterrel kimostuk és az ekkor keletkezett extraktumot is szintén átengedtük a fenti szűrőn. Ezután a szűrőt még kétszer 5-5 ml petroléterrel utánmostuk. Ezután az oldószert forgó elpárologtató készüléken elpárologtattuk. A hevítést 50-52 C -os vízfürdőben végeztük. A petroléter utolsó nyomait gumilabda fúvó segítségével óvatosan eltávolítottuk. A lombikot kék géllel töltött exszikátorba állítottuk és két óra múlva visszamértük. A talált illóolaj tartalom mg/100 g-ban=10 volt. Végül a nyert csapadékban a következőképpen meghatároztuk a kamazulén és biszabolol tartalmat. A kamazulén spektrálfotometrikus meghatározása: Mérőoldat : Az illóolajok gravimetrikus úton való, fenti meghatározása során nyert csapadékot 25 ml n-hexánban vagy dklohexánban feloldottuk. Mérőeszköz: Spektrofotométer (pl. PMQ II vagy PMQ III „ZEISS”). Hullámhossz : 605 nm. Küvetta: 1 cm. A kamazulén specifikus extinktiója (lg/100 ml, 1 24,5. Kompenzációs folyadék: n-hexán vagy ciklohexán. Talált kamazulén tartalom mg/100 g-ban: 102.E6Os Ha a méréshez nem áll rendelkezésre spektrofotométer, úgy a meghatározást filterfotométerrel is el lehet végezni. Mérőeszköz: Filterfotométer (pl.,.EPPENDORF”); Hullámhossz: 578 nm. Küvetta: 1 cm A kamazulén specifikus extinktióia (1 g/100 ml, 1 20,8. Kompenzációs folyadék: n-hexán vagy ciklohexán. Talált kamazulén tartalom mg/100 g-ban: 120.ES 7g. A mérőoldatban a biszabololt gázkromatografikus úton a következő módon határoztuk meg: Gázkromatográf : HEWLETT PACKARD modeU 5750 vagy hasonló készülék. Detektor: FID578 Hordozó gáz: Hélium. Oszlop : 3,2 mm; 200 cm, acél. Oszloptöltés : XE 60; 3% kromoszorb WAW HP-re 100-120 mesh. Hőmérséklet Detektor: 320 C°. Befecskendező bolkk: 220 C°. Oszlop: 85-220 C°. Hőmérsékletprogramozás: 4°/perc. Próbaoldat: A kamazulénhez használt oldatot alkalmazzuk, összehasonlító oldat : Körülbelül 15 mg standard biszabololt 25 ml dklohexánban oldunk. Befecskendezési mennyiség: Mind a próbaoldatból, mind az összehasonlító oldatból 5 fű. Kiértékelés: A kiértékelést csúcsfelület-összehasonlítás révén végzetük. 100 g gyógyáru nyersanyagonként a biszabolol tartalom mg-ban : 10. bemérés (összehasonlítás) (mg) felület (próba) felület(összehasonlítás) A találmány szerinti H-29 Degumill kamilla előnyös tulajdonsága, hogy kamazulén és biszabolol tartalma jelentősen nagyobb, mint az eddig ismert kamilláknál, ez a tulajdonság állandó, egységesen átörökíthető, és e tulajdonságokat ökológiai tényezők gyakorlatilag nem befolyásolják. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
