175190. lajstromszámú szabadalom • Eljárás inozin előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS Nemzetközi osztályozás. C 12 D 13/00 C 07 H 19/16 Bejelentés napja: 1977.VI.22. (VE—843) Elsőbbsége: Szovjetunió: 1976. VI.29. (2 378 374) ORSZÁGOS Közzététel napja: 1979. X.27. TALÁLMÁNYI í HIVATAL Megjelent: 1982. III.31. | Feltalálóik): Erokhina Ljudmila Ivanovna, mikrobiológus, Kazarinova Ljudmila Anatolievna, fiziológus, Moszkva, Szovjetunió Szabadalmas: Vsesojuzny Nauchno-Issledovatelsky Institut Genetiki i Selektsii Promyshlennykh Mikroorganizmov (Vniigenetika), Moszkva, Szovjetunió Eljárás inozin előállítására 1 A találmány tárgya új eljárás inozin mikrobiológiai úton történő előállítására. Miként ismert, az inozin értékes gyógyhatású anyag, és a gyógyászatban elsősorban a szív- és érrendszeri megbetegedések és májműködési zavarok kezelésére, továbbá a leukopénia megelőzésére és kezelésére alkalmazható. Az inozint ezen túlmenően a vegyiparban elteijedten alkalmazzák inozinsav és egyéb purin-származékok kémiai vagy mikrobiológiai úton végzett előállításának kiindulási anyagaként. A 382 676 sz. szovjet szerzői tanúsítvány eljárást ismertet inozin mikrobiológiai úton történő előállítására Bacillus subtilis GEN-265 termelő törzs felhasználásával. Az ott közölt módszer szerint a termelő törzset szén- és nitrogénforrást, továbbá ásványi sókat tartalmazó táptalajon keverés és levegőztetés közben tenyésztik, majd a biomasszát elválasztják, és az inozint elkülönítik a folyékony közegből. A Bacillus subtilis GEN-265 törzs Gram-pozitív spóraképző pálcikákkal rendelkezik. A törzs hús-pepton-agar táptalajon 24 órán át 37 C°-on tenyésztve sárgásszürke, köralakú, 2-2,5 mm átmérőjű bolyhos telepeket képez; a telepek pereme bőrszerű. Hús-pepton-agar táptalajra karcolással oltva és 24 órán át 37 C°-on tenyésztve sárgásszürke, köralakú, 2-2,5 mm átmérőjű bolyhos telepeket képez; a telepek pereme bőrszerű. Hús-pepton agar táptalajra karcolással oltva és 24 órán át 37 C°-on tenyésztve bőséges növekedés észlelhető; Az oltás körzete kiszélesedik és perem veszi körül; a növekmény matt bolyhos, bőrszerű felületű. A törzs hús-pepton-húsleves táptalajon tenyésztve redős, száraz filmet képez. A törzs bur-2 gonyaszeleteken tenyésztve nem képez pigmentet, a növekmény matt, száraz, redős felületű, a zselatint elfolyósítja, a keményítőt elhidrolizálja és a tejet peptonizalja. A törzs szintetikus táptalajokon adenin-, 5 tirozin- és hisztidin-adalék jelenlétében növekedik. Ha a Bacillus subtilis GEN-265 törzset főkomponensként répamelaszt, hidrolt, kukoricalekvárt, szójalisztet, továbbá fehérje-vitamin koncentrátumot tartalmazó táptalajon 144 órán át tenyésztik,a fermentáló ciós közegben 7-10 g/1 inozin képződik. A Bacillus subtilis GEN-265 törzs a 20 súly % melaszt, 3,0 súly % kukoricalekvárt, 2,0 súly% ammóniumszulfátot, 0,2 súly% kálium-dihidrogénfoszfátot, 0 ,2 súly% dikálium-hidrogénfoszfátot, 0,4 súly% magnéziumszulfát- 1 5 heptahidrátot, 2,0 súly% kalciumkarbonátot és a 100 súly% eléréséhez szükséges mennyiségű vizet tartalmazó, sterilizálás előtt nátriumhidroxid-oldattal pH 7,0-7,2 értékre semlegesített táptalajon például jól növekszik, és jó hozammal termel inozint. 20 A fermentációt 144 órán át 28-30 C°-on végzik, és közben az elegyet 35 mg 02/liter/perc sebességgel levegőztettik. A 144 órás fermentáció lezajlása után a rendszer 7 g/1 inozint tartalmaz. Ezután a biomasszát centrifugálással eltávolítják, és a folyékony közegből 25 elkülönitik a végterméket. A fent ismertetett eljárás hátránya, hogy a törzs inozintermelő aktivitása csekély, és a fermentáció hosszú időt igényel. Az ismert eljárás szerint az inozin-szintézis átlagos napi sebessége 1,2-1,7 g/1. 30 További hátrányt jelent, hogy az inozin elkülönítését nagy mértékben megnehezíti a fermentlében jelenlévő melasz, amely jelentős mennyiségben tartalma? szer-175190
