175177. lajstromszámú szabadalom • Eljárás polién-tipusú 67-121 antibiotikum-komplex és komponensei előállítására
175177 ■ Kívánt esetben a fenti kromatográfiái elválasztás előtt részleges elválasztást végezhetünk, olyan módon, hogy a 67-121 antibiotikum-komplexet kloroform, metanol és viz 2:2:1 térfogatarányú keverékének alsó fázisában oldjuk, majd metanol hozzáadásával az dLdott anyagot részlegesen kicsapjuk. ' A 67-121 antibiotikum-komplex oszlopkromatográfiai elválasztásával kimutatható, hogy a komplex 4 antibiotikumból áll, ezeket az oszlopból való kilépés sorrendjének megfelelően 67- -121A-nak, 67-121B-nek, 67-121C-nek, illetve 67-121D-nek nevezzük. A fent megadott kovasavgéloszlopot és oldószerrendszert használva,, az egyes antibiotikum-komponensek Bf értékeit a következőknek találtuk: 67-121A: Bf = 0,17ï 67-121B: Bf * 0,14; 67-121C: Bf » 0,11; és 67-121D: Bf = 0,07- Az antibiotikum-komponensek eluálását az oszlopból kovasavgél-vékonyréteglemezeken az oszlopkromatográfiai elválasztásra használt oldószerkeverék alkalmazásával könnyen ellenőrizhetjük, és az antibiotikum jelenlétét a lemezen bármely alkalmas módon, például bioautografálással meghatározhatjuk, vagy a lemezre kensav és metanol elegyét porlasztjuk, majd az antibiotikum jelenlétének kimutatására a lemezt melegítjük. Az egyes fermentálások folyamán az alkotó antibiotikumok viszonylagos mennyisége eléggé változó lehet, de általában azt monthatjuk, hogy rendszerint a 67-121C antibiotikum van legnagyobb mennyiségben jelen, és a 67-121D komponens nyomokban fordul elő. Példaképpen megemlítjük, hogy egy bizonyos példában a komponensek viszonylagos súlyaránya a következő volt: 67-121A: 12 %, 67-121B: 12 %, 67-1210: 76 % és 67-121D: nyomokban. Az antibiotikum-termékek Amint az előzőkben megállapítottuk, a 67-121 antibiotikum-komplex a 67-121A, 67-121B, 67-121C es 67-121D antibiotikumokból áll, és ezeket polién makrolid antibiotikumokként osztályoztuk. Jellemző ultraibolya abszorpoióspektrumaik és infravörös abszorpcióspektrumaik alapján heptaén makrolid antibiotikumokként sorolhatók be. A 67-121 antibiotikum-komplex és az azt alkotó antibiotikumok kémiai és fizikai tulajdonságait a következőkben ismertetjük* A 67-121 antibiotikum-komplex kémiai és fizikai tulajdonságai A 7» táblázatban közöljük a 67-121 antibiotikum-komplex ultraibolya abszorpcióspektrumának adatait, és összehasonlitásul néhány más heptaén-antibiotikumnak az irodalomból vett adatait. A 8. táblázatban ezt folytatjuk az elemanalizis, optikai forgatóképesség, olvadáspont és Bf értékek felsorolásával. E- zeket az Bf értékeket 6 rész n-butanol, 2 rész ecetsav, 2 rész víz éa 1 rész dloxán összetételű oldószerrendszerrel kaptuk, és a kimutatást Candida alblcansszal végzett bioautográfia segítségével végeztük, vagy a kromatográfiai lemezre kensav és metanol elegyet permetezve, a foltokat előhívtuk. A 9« táblázatban a 67-121 antibiotikum-komplex stabilitási adatait foglaltuk össze. Az antibiotikumot a megfelelő 0,1 mólos pufferoldattal. meghatározott időtartamig forrásban levő vízfürdőn melegítettük. A 9|0-10,0 pH tartományban borátpuffert 14
