175151. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fenilglicint tartalmazó, gasztrin hatású peptidek előállítására

17

175151

18

R£ = 0,70, = 0,65. [a]D =0° (c = 1,0, dimetilformamidban).

Elemzési eredmények a C30H4o07N4 összegképlet (molekulasúly: 568,67) alapján:

számított: C = 63,36%, H = 7,09%,

N = 9,85%,

talált: C = 63,79%, H =7,30%,

N = 9,59%.

2. lépés

GLeucil-L-aszparagil-0-(terc-butil-észter)--L-fenil-glicin-amid-hidroklorid

2,75 g (4,84 mmól) Z-Leu—Asp(OtBu)-L-Phg—NH2-ot (6. példa, 1. lépés) 50 ml DMF-ban 0,45- ml (5,2 mmól) tömény sósav jelenlétében 0,5 g 10%-os csontszenes Pd-katalizátorral keverés közben hidrogén-gáz átbuborékoltatásával redukálunk. 2 óra elteltével a katalizátort kiszűrjük, és a szűrletet vákuumban bepároljuk. A maradékot vízmentes éterrel izoláljuk. így 2,25 g (98,5%) H-Leu-Asp(OtBu)-L—Phg-NH2 ' HCl-ot kapunk, olvadáspont: 182-183 °C, R* =0,15.

3. lépés

L-Leucil-L-aszparagil-L-fenil-glicin-amid-hidroklorid

2,25 g (4,80 mmól) H—Leu—Asp(0*Bu)-L—Phg—NH2 1 HCl-ot (6. példa, 2. lépés) 20 ml sósavas ecetsavval reagáltatunk. 40 perc elteltével a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, és a maradékot éterrel eldörzsöljük. így 2,0 g (99%) H-Leu—Asp—L—Phg—NH2 • HCl-ot kapunk, olvadáspont 210 °C (bomlik), Rf =0,20.

4. lépés

N-(terc-Butil-oxi-karbonil)-L-triptofil-L-metionil-L-aszparagil-L-fenil-glicin-amid

2,2 g (5,3 mmól) H—Leu—Asp—L—Phg—NH2 •

• HCl-ot (6. példa, 3. lépés) 50 ml DMF-ban 1,48 ml (10,6 mmól) trietilamin jelenlétében 2,32 g (5,8 mmól) BOC—Trp—OSu-rel reagáltatunk. Másnap a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, és a maradékot vízzel izoláljuk. A 3,30 g súlyú nyersterméket 70 ml 80%-os etanolból derítéssel kristályosítjuk. így 2,30 g (65%) BOC-Trp-Leu-Asp—L—Phg—NH2-ot kapunk, olvadáspont: 205- -207 °C (bomlik), Rf = 0,40, [a]D = -7,3° (c = 1,0, dimetilformamidban).

5. lépés

L-Triptofil-L-leucil-L-aszparagil-L--fenü-glicin-amid

2,23 g (3,35 mmól) BOC—Trp—Leu—Asp—L-Phg-NH2-ot (6. példa, 4. lépés) 0,47 ml (6,7 mmól) merkapto-etanol jelenlétében 25 ml sósavas dioxánnal reagáltatunk. A reakcióelegyet 10 ■perc eltelte után vízmentes éterrel felhígítjuk. Az izolált hidrobromidot vízben szuszpendáljuk, a szuszpenzió pH-ját trietilaminnal 7-re állítjuk, majd a csapadékot kiszűrjük, és vízzel mossuk. így 1,16 g (61%) H-Trp-Leu-Asp-L-Phg-NH2-ot kapunk, olvadáspont: 214—215 °C (bomlik),

Rf = 0,40.

6. lépés

2-(terc-Butil-oxi-karbonil-amino-oxi)--acetil-L-triptofrl-L-leucil-L--aszparagil-L-fenil-glicin-amid

0,57 g (1,0 mmól) H-Trp-Leu-Asp-L-Phg—NH2-ot (6. példa, 5. lépés) és 0,48 g (1,1 mmól) BOC-OGly-OPCP-t (1. példa, 9. lépés) feloldunk 15 ml DMF-ban, és az oldathoz hozzáadunk 0,14 ml (1,0 mmól) trietilamint. Másnap a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, a maradékot éterrel izoláljuk. A 0,81 g súlyú nyersterméket a D-diasztereomerhez hasonlóan tisztítjuk. így 0,30 g (40,5%) BOC-OGly-Trp-Leu-Asp-L-Phg-NH2 - -ot kapunk, olvadáspont: 196—198 °C (bomlik), Rf = 0,35, [a]D=0° (c=l,0, dimetilformamidban).

Elemzési eredmények a C3iH47OioN7 összegképlet (molekulasúly: 737,82) alapján:

számított: C =58,60%, H =6,42%,

N = 13,29%,

talált: C = 58,35%, H =6,20%,

N = 13,07%.

7. példa

D-2-(terc-Butil-oxi-karbonil-amino-oxi)-propionil-L-triptofrl-L-leucil-L--aszparagil-D-fenil-glicin-amid

1,15 g (2,03 mmól) H—Trp—Leu—Asp—D—Phg—NH2-ot (5. példa, 4. lépés) és 1,0 g (2,2 mmól) BOC—D—OAla—OPCP-t (3. példa, 1. lépés) 10 ml DMF-ban oldva reagáltatunk 0,29 ml (2,03 mmól) trietilamin jelenlétében. Másnap a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, és a maradékot éterrel izoláljuk. Az 1,56 g súlyú nyersterméket 50 ml, 0,3 ml ecetsavat tartalmazó 80%-os etanolból derítéssel átkristályosítjuk, így 0,86 g (56%) BOC—D—0 A la—Trp—Leu-Asp-D—Phg—NH2 -ot kapunk, olvadáspont 213—214 °C (bomlik), Rf=0,2,

Rf = 0,4, [a]D = —28,7°, (c = l,0, dimetilformamidban).

Elemzési eredmények a C37H490i 0N7összegképlet (molekulasúly: 751,85) alapján:

számított: C =59,11%, H =6,57%,

N = 13,04%,

talált: C =59,10%, H =6,52%,

N = 13,20%.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

9