175045. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és berendezés sejttenyészet előállítására
175045 12 hagyjuk, hogy a folyadék lecsepegjen a hordozóról, majd pedig elkülönítjük az interferont vagy a vírust tartalmazó közeget. Ezután meghatározhatjuk az oldat interferon- vagy vírustartalmát, és az interferont illetve a vírust önmagában ismert módon elkülönítjük. A találmány tárgya továbbá berendezés a találmány szerinti eljárás kivitelezéséhez. A találmány szerinti berendezés elvi felépítését a 2. ábra szemlélteti. A berendezés 3 szilárd, porózus hordozóval töltött, 2a bevezetéssel és 4 kivezetéssel ellátott 2 edényből áll, amelyhez 1 habfejlesztő készülék csatlakozik. Az 1 habfejlesztő készülék elhelyezése olyan, hogy legalább is a szilárd, porózus hordozó felületének egy részét ellátja a habbal. A találmány szerinti berendezés edénye kör vagy négyszög keresztmetszetű, vagyis üreges kúp alakú, fordított kúp alakú vagy gömb alakú torony vagy teknő lehet. Az edény bevezetéssel és kivezetéssel ellátott. A bevezetésen keresztül vihető be a hordozó, és a habfejlesztő készüléktől jövő kivezetésen keresztül adagoljuk a habot a hordozóhoz. Az edény egy további bevezetést is tartalmazhat a sejtszuszpenzió bevitelére. Ez az utóbbi bevezetés öntömítő gumi diafragma vagy hagyományos, gőzzel sterilizálható bevezető nyílás. Annak biztosítására, hogy a folyékony táptalaj jellemzői a kívánt tartományban maradjanak, az edényt pH-ra és/vagy p02-re érzékeny elektródokkal láthatjuk el. Az edény gázkivezetéssel is ellátható, kívánt esetben steril szűrőn keresztül, a habból felszabaduló gáz elvezetésére. Az edény egy további gázbevezetéssel is ellátható, amely célszerűen túl van azon a ponton, ahol a hab szétesik, úgy, hogy a beáramló gáz ne darabolja szét a habot. A táptalajt a tartályából a gravitáció felhasználásával vagy adott esetben szivattyúval vezetjük a habosító készülékbe. Az edényből kiáramló folyékony táptalajt elönthetjük, vagy kívánt esetben szivattyú segítségével visszavezethetjük a tartályába. A találmány szerinti herendezés egy példaképpeni kiviteli alakját az 1. ábrára történő hivatkozással ismertetjük. Az ábrán a találmány szerinti berendezés vázlatos rajza látható. Az 1. ábráról kitűnik, hogy a sejttenyészet előállítására szolgáló, találmány szerinti berendezés 1 habfejlesztő készüléket, 3 szilárd, porózus hordozót tartalmazó 2 hengeres torony alakú edényt tartalmaz, amely utóbbi 4 kivezetéssel van ellátva a folyadék eltávolítására. Az 1 habfejlesztő készülék az 5 henger alakú házból és az egyik végén a 6a áramlásmérőhöz kapcsolt 6 gázbevezető csőből áll, amelynek a másik vége áthalad az oldalfalon keresztül a házon, és a 7 zsugorított üvegkorongban végződik. Az 1 habfejlesztő készülék a ház egyik végén a 8 folyadékbevezetéssel, a másik végén pedig a 9 habkivezetéssel van ellátva. A 8 bevezetés a 11 elzáró szelepet tartalmazó 8a csővezetéken keresztül kapcsolódik a 10 folyadéktartályhoz. A 8a folyadékadagoló csővezeték tartalma a 12 szelep segítségével üríthető le, amely a 11 elzáró szelep és az 1 habfejlesztő készülék között helyezkedik el. A 9 11 6 habkivezetés a 9a habadagoló cső egyik végével van összekapcsolva. A 9a habadagoló cső vége a 2 edény belsejében a 3 szilárd, porózus hordozó 13 felső felülete felett helyezkedik el. A 2 torony kis műanyag hengerekből álló 3 hordozót tartalmaz. A 2 torony tetejét szorosan illeszkedő, furattal ellátott 14 dugó zárja le, amelyen keresztül a 9a habadagoló cső halad át. A 2 torony összeszűkül az alsó végén, és 4 kivezetést képez. Ezenkívül a 2 torony a 15 öntömítő gumi diafragma alakjában bevezetést tartalmaz a sejtszuszpenziók számára, továbbá a 17 baktériumszűrőben végződő 16 gázkivezető csővel van szerelve. A 4 kimenet a 18 visszavezető cső egyik végéhez kapcsolódik. A 18 visszavezető cső két részre oszlik: az egyik 18a rész a 19 szelepen keresztül a 10 folyadéktartályhoz vezet, a másik 18b rész pedig a 20 szelepen keresztül leürítő kivezetést képez. A 10 tartály, amelybe a táptalajt visszavezetjük, a 22 gázkivezető csővel és egy folyadékbevezetéssel van ellátva, amely tulajdonképpen 23 öntömítő gumi ' diafragma. A 22 gázkivezetés a 2 edény 16 gázkivezető csövével van összekapcsolva a 17 baktériumszűrő alatt. A találmány szerinti berendezés használatához a 2 tornyot megtöltjük megfelelő mennyiségű polikarbonát hengerekkel, a furattal ellátott 14 dugót a toronyba illesztjük, és a berendezést összeállítjuk. Ezután az egész berendezést sterilizáljuk, majd állandó hőmérsékletű (kb. 37 °C) környezetbe helyezzük, és hagyjuk, hogy felvegye ezt a hőmérsékletet. A hordozó elárasztásához elegendő mennyiségű közegben szuszpendált sejteket bevisszük a 2 toronyba a 15 öntömítő diafragmán keresztül, és 2-20 órán át hagyjuk, hogy a sejtek leülepedjenek a hordozóra. Táptalajt öntünk a 10 tartályba a 23 öntömítő diafragmán keresztül, és hagyjuk, hogy a 8a csővezetéken keresztül bejusson az 1 habfejlesztő készülékbe. Steril gázt vezetünk be az 1 habfejlesztő készülékbe a 6a áramlásmérővel mért sebességgel. A bevezetett gáz hatására a folyékony táptalaj habbá alakul. A hab gázáram hatására végighalad a 9 csövön, és eléri a hordozó tetejét. Amikor a hab eljut a hordozóhoz, szétesik, és a folyékony táptalaj szétfolyik a hordozó felületén. Egyidejűleg kinyitjuk a 20 szelepet, hogy lehetővé tegyük a sejtszuszpenzió közegének olyan ütemben történő elvezetését, ahogy a habból képződő folyékony táptalaj pótolja, nehogy a sejtréteg kiszáradjon. Amikor a sejtszuszpenzió közegének helyét a habból képződött folyékony táptalaj teljes egészében elfoglalta, lezárjuk a 20 leürítő szelepet, és kinyitjuk a 19 szelepet, úgy hogy a táptalaj visszajuthasson a 10 tartályba. A táptalaj cirkuláltatását addig folytatjuk, amíg a kívánt méretű sejttenyészet létre nem jön. Ekkor a gázbevezetést megszüntetjük, és a 19 szelepet lezárjuk. A 10 tartályból és az 1 habfejlesztő készülékből leürítjük a táptalajt és megtöltjük mosófolyadékkal. A gázbevezetést ismét megindítjuk, és a sejteket addig mossuk a mosófolyadékból előállított vékony filmmel, amíg táptalajt már nem tartalmaznak. A mosófolyadékot vagy elöntjük a 20 szelepen keresztül, vagy pedig 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
