174894. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kinetikus szubsztrátmeghatározásra és reagens ennek kivitelezéséhez
15 174894 16 állandója szerinti — alkalmas megválasztásával, a Michaelis állandó mesterséges megváltoztatásával vagy a szubsztrát mesterséges megváltoztatásával úgy szabályozzuk, hogy sebességmeghatározó legyen, és pszeudo-első rend szerint menjen végbe. 5 5. A 4. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a Michaelis állandó mesterséges megváltoztatását az aktív centrumban levő fématom megváltoztatásával, az enzim részleges hasításával, az aktív centrum kémiai módosí- 10 tásával és/vagy konformációváltoztatással végezzük. 6. Az 5. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a szubsztrát megváltoztatását komplexképzéssel vagy micellaképzéssel végezzük. 15 7. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a második vagy további reakciópartnernek, amely eltérő a meghatározandó szubsztráttól vagy ennek átalakulási termékétől, feleslegben adagolásával pszeudo-első rend 20 szerinti reakciólefutást hozunk létre. 8. Az 1. vagy 7. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a sebességmeghatározó részreakció enzime Michaelis állandójának valódi vagy látszólagos megnövelésével 25 pszeudo-elsőrendű reakciólefutást hozunk létre. 9. A 8. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a Michaelis állandó látszólagos növelését egy reakciómelléktermék hozzáadásával vagy inhibitor hozzáadással végezzük. 30 10. Reagens enzimszubsztrátumok kapcsolt enzimatikus reakciók segítségével történő meghatározására, azzal jellemezve, hogy a reagens olyan enzimeket és reakció-résztvevőket tartalmaz, és ezeket olyan adagolásban tartalmazza, hogy a 35 szubsztrátnak a reagens vizes oldatához való hozzáadásakor végbemenő reakciólánc legspecifikusabb részreakciója sebességmeghatározó legyen, és az első vagy pszeudo-első rend szerint menjen végbe. 11. A 10. igénypont szerinti reagens kiviteli 40 alakja, azzal jellemezve, hogy a reangens a kevésbé specifikus részreakció vagy reakciók enzimét vagy enzimeit túladagolva tartalmazza. 12. A 11. igénypont szerinti reagens kiviteli alakja vércukor meghatározására, azzal jellemezve, hogy 80—120mmól 7,0pH-jú foszfátpuffert, 0. 8.E/ml vagy több peroxidázt, 12 E/ml vagy több glükózoxidázt, 0,60-1,80 mmól 4-amino-antipirint, 3,0—13,5 mmól fenolt tartalmaz. 13. A 11. igénypont szerinti reagens kiviteli alakja trigliceridek meghatározására, azzal jellemezve, hogy 45-55 mmól/liter 7,0 pH-jú foszfátpuffert, 4,6-3,1 mmól/liter magnéziumszulfátot, 300-400 pmól/liter nátrium-dodecil-szulfátot, 2.3- 3,5 mmól/liter adenozin-trifoszfátot, 280-420 pmól/liter foszfoenolpiruvátot, 120-230 pmól/liter redukált nikotinsavamid-adenindinukleotidot (NADH), 7,7 x 104 E/liter vagy több lipázt, 5,8 x 102 E/liter vagy több észterázt, 9,6 x 102 E/l vagy több piruvátkinázt, 5,3 x 103 E/liter vagy több laktát-dehidrogenázt tartalmazó 1. reagensből és 2,9 x 103 E/liter vagy több glicerokinázt tartalmazó 2. reagensből áll. 14. A 11. igénypont szerinti reagens kiviteli alakja glicerin meghatározására, azzal jellemezve, hogy 45-55 mmól/liter 7,0 pH-jú foszfátpuffert, 4,6-3,1 mmól/liter magnéziumszulfátot, 300-400- pmól/liter nátrium-dodecil-szulfátot, 2.3— 3,5 mmól/liter adenozin-trifoszfátot, 280— -420 /imól/liter foszfoenolpiruvátot, 120— —230 pmól/liter NADH-t, 9,6 x 102 E/liter vagy több piruvátkinázt, 5,3 x 103 E/liter vagy több laktát-dehidrogenázt tartalmazó 1. reagensből és 2,9 x 103 E/liter vagy több glicerokinázt tartalmazó 2. reagensből áll. 15. A 11. igénypont szerinti reagens kiviteli alakja összkoleszterin meghatározására, azzal jellemezve, hogy 0,45-0,75 mmól/liter 7,0 pH-jú ammónium-foszfát-puffert, 1,36—2,04 mól/liter metanolt, 1 6-24 mmól/liter acetil-acetont, 0,79—1,19 g/liter hidroxi-polietoxi-dodekánt, legalább 5 x 10s E/liter katalázt, legalább 20 E/liter koleszterinészterázt, legalább 20 E/liter koleszterinoxidázt tartalmaz. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 804638 - Zrínyi Nyomda, Budapest 8
