174887. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gonococcus szálak előállítására
31 174887 32 15. példa Agglutinációs teszt GC szál kristályokat 7,0 pH-értékű, trisz puffert tartalmazó fiziológiás sóoldatban szuszpendálunk, ügy, hogy a koncentráció 30-60 Mg/ml között legyen. Az alkalmazott teszt szérum ne legyen zavaros. Ha a szérum zavaros lenne, 30 percig centrifugáljuk 30 KG intenzitással, és a folyadék tisztáját használjuk fel. Elkészítjük a szérum sorozathígítását, és a kapott mintákból 0,025 ml-t mérünk be az egyes mikrolemezekre, amelyek bemélyedéseket tartalmaznak, és mindegyikhez 0,025 ml szál kristály szuszpenziót adunk, és az elegyet 30 percig keverjük szobahőmérsékleten. Ezután mikroszkóp alatt megfigyeljük a kristályok csomósodását. Az értékelés alapját az a leghígabb minta képezi, amely az összehasonlítónál észrevehetően nagyobb mértékű kristály-agglutinációt ad. Állatokkal végzett teszt 1,8-2,7 kg súlyú, fehér, nőstény nyulaknak 5 szubkután injekciókat adtunk be, amelyek a CDC M—2 (ATCC 31148), Pittsburgh 3-2 (ATCC 31149), CDC T-2 (ATCC 31150), CDC 005-2 (ATCC 31152) és a Pittsburgh 4-2 (ATCC 31151) törzsekből nyert, tisztított szál készítmények vol- 10 tak, 1 :1 arányban elegyítve Freund-féle adjuvánssal. Az elegyet az injekcióstűbe való felszívással emulgeáltuk. Körülbelül 100-200 Mg/kg dózist adtunk be a szálakból 3 injekcióban, közelítőleg kéthetenként, majd a harmadik injekció beadása 15 után 1—2 héttel vérmintát vettünk az állatoktól. Hagytuk, hogy a vér megalvadjon, és a szérumot a szokásos módon kinyertük. Áz első 3 vizsgálati szérumot ezután 21 különböző Neisseria gonorrhoeae törzs szálaival hoztunk össze. A kapott 20 eredményeket a II. táblázat tartalmazza. II. táblázat 21 különböző törzs szálainak agglutinációs titere három különböző törzs szálaival kapott szérumok vizsgálata során Agglutinációs teszthez használt törzs Szérum kezelésére alkalmazott törzs / Pittsburgh 3-2 Pittsburgh 1-2 Pittsburgh 4-2 Pittsburgh 6-2 UMUM O 1 O 1 ÜŒUU CDC M—2 CDC T-2 Atlanta 4-2 Atlanta 6-2 Atlanta 9-2 Seattle 1-2 Seattle 3-2 Atlanta 10-2 CDC (Kellog) F 62 CDCM-2 16 256 16 64 8 32 128 8 16 <8 8 16 32 32 8 Pittsburgh 3-2 256 16 8 64 512 <8 8 <8 16 64 8 16 16 32 8 CDC—T—2 4 16 <4 <4 8 32 16 512 32 8 32 64 16 8 128 CDC M—2 16 64 8 16 16 32 to 64 Pittsburgh 3-2 128 64 16 64 128 128 CDC T-2 16 32 8 8 16 64 A 005 disszeminált gonorreával fertőzött betegtől izolált CDC törzs 16
