174883. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antigén kinyerésére és az antigént tartalmazó reagenskészítmény előállítására
17 174883 18 C. Alkalmazott szerológiai tesztek 1. MHA = mikrohemagglutinációs vizsgálat. A vizsgálat Logan, L.C., Cox, P.M. és Norins, L.C. módszere szerint [Appl. Microbiol, 20, 907-909 5 (1970)] végezhető el. 2. CFT (kompletnent-fíxációs vizsgálat). Ez a vizsgálati módszer egy mikrotechnikás módszer, amelyhez a Burroughs Wellcome nagy-britanniai cég által szállított antigént használnak. Ez az antigén 10 számos gonococcus-törzs keveréke. 3. Dri Dot vizsgálat: ez az Organon holland cég által klinikai alkalmazásra kifejlesztett, úgynevezett kártyás vizsgálat. Az alkalmazott antigén nem más, mint olyan látex-szemcsék, amelyek be vannak is vonva a 9. számú gonococcus-törzs ultrahangos kezelésekor kapott anyaggal. Megjegyzendő, hogy e vizsgálatok egyharmadát lejárt (3-6 hónapos) kártyákkal végezték, az érzékenység és a specifikusság azonban azonos volt az olyan esetben kapott ered- 20 ményekkel, amikor a gyártó cég által még használhatónak tartott kártyákat alkalmaztak. 4. GST = Találmány szerinti vizsgálat, ahol a 3. példa szerint előállított reagenskészítménnyel bevont kártyákat használtak, a kísérlethez a vérszéru- 25 mot 62 °C-on tartották 30 percen át a vizsgálatot megelőzően. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás membránhoz asszociálódott és/vagy 30 felületi antigén kinyerésére Neisseria gonorrheae sejtekből vagy abból a táptalajból, amelyen ezek a sejtek növekedtek, azzal jellemezve, hogy Neisseria gonorrhoeae sejteket táptalajon való tenyésztésük után elölünk és konzerválunk, ezután a sejteket a táptalajból elválasztjuk, majd a sejteket vagy táptalajt olyan, lúgosra pufferolt vizes alkálifémsó-oldattal extraháljuk, amelynek pH-ja 6,0 és 11,0 közötti és amely a pufferre és a sóra nézve egyaránt legalább 0,01 mólos, ezután adott esetben a kapott extraktumot koncentráljuk, majd savas kicsapásnak vetjük alá olyan vizes savoldattal vagy savas pufferoldattal, amelynek pH-ja 1,0 és 6,0 közötti és amely a savra vagy pufferre nézve legalább 0,01 mólos, ezután a csapadékot olyan lúgos vizes pufferoldattal szolubilizáljuk, amelynek pH-ja 6,0 és 11,0 közötti és amely a pufferre nézve legalább 0,01 mólos, és a szolubilizátumot egy proteázzal kezeljük 0,25 óra és 4 óra közötti időn át 0 °C és 45 °C közötti hőmérsékleten, végül az enzimes lebontást önmagában ismert módon megszakítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy legfeljebb 72 órán át tartó tenyésztés után öljük el a sejteket. 3. Eljárás Neisseria gonorrhoeae fertőzések diagnosztizálására alkalmas antigén-reagenskészítmény előállítására azzal jellemezve, hogy valamely, az 1. igénypont szerint kinyert antigént oldat formájában koleszterin-lecidn részecskékre adszorbeáltatjuk, majd a kapott antigén-koleszterin-lecitin adszorbátumot egy zsíroldható festékkel megfestjük. A kiadásért felel: a Közgazdasági és logi Könyvkiadó igazgatója 804637 - Zrínyi Nyomda, Budapest 9
