174883. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antigén kinyerésére és az antigént tartalmazó reagenskészítmény előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 174883 Nemzetközi osztályozás: Bejelentés napja: 1977. I. 11. (AE-484) C 07 G 7/00, G 01 N 33/16 Amerikai Egyesült Államok-beli elsőbbségei: 1976. I. 29. (653 672, 653 673) ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1979. X. 27. Megjelent: 1980. X. 31. Feltalálók: Szabadalmas: Turnachik Michael Francis vegyész, Haverstrau. . Fisher Scientific Company, Pittsburgh, March Richard William vegyész, Suffern, New York, Amerikai Egyesült Államok Pennsylvania, Amerikai Egyesült Államok Eljárás antigén kinyerésére és az antigént tartalmazó reagenskészítmény előállítására 1 A találmány tárgya új eljárás antigén kinyerésére és az antigént tartalmazó termék, éspedig antigén-reagenskészítmény előállítására. Közelebbről a találmány olyan új eljárásra vonatkozik, amellyel egy antigén elkülöníthető Neisseria gonorrhoeae komp- 5 lett sejtjeiből, illetve abból a táptalajból, amelyen a sejtek növekedtek. A találmány tárgya továbbá az így elkülönített antigén reagenskészítménnyé való feldolgozására szolgáló eljárás. A találmány szerinti eljárással membránhoz kö- 10 tött és/vagy felületi antigének különíthetők el. A „membránhoz kötött” antigén alatt olyan, a sejtek külső membránjához kapcsolódó antigéneket értünk, amelyek nem fehérje jellegűek. A találmány szerinti eljárás végrehajtása, vagyis az antigén elkü- 15 lönítése során ügyelnünk kell arra, hogy az antigént hordozó sejtek ne sérüljenek meg, azaz megtartsák szerkezeti integritásukat és csak minimális mértékben szabaduljanak fel belőlük citoplazmikus komponensek. 20 A 3 855 197 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírásból ismeretes egy eljárás glükoproteinek mikroorganizmusokból való extrahálására és az extraktummal melegvérű állatok immunizálására bakteriológiai fertőzések ellen. A 25 3 949 065 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírásban szifilisz diagnosztizálására alkalmas szerológiai tesztet ismertetnek. Ennek lényege egy olyan agglutinációs teszt, amelyhez egy liofil oldószerrel oldatba vitt antigént használnak. 30 2 A 3 770 383 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírásból olyan teszt kártya vált ismertté, amelyre egy úgynevezett kísérleti folt formájában egyetlen szüárd száraz immunokémiai reagens van fel vive. Ez a reagens egy antigént vagy antitestet tartalmaz. Ha a folt a vizsgálandó folyadékmintával érintkezik, akkor - ha a teszt pozitív - egy vizuálisan látható agglutinációs reakció megy végbe. A kísérleti folt állhat egy antigén, például egy Neisseria-antigén hordozóval, például koleszterin-lecitin szemcsékkel készült szuszpenziójából is. Reising az Applied Microbiology, 21, 852-853 (1971) szakirodalmi helyen gonococcális antitestek kimutatására alkalmas mikroflokkulációs vizsgálatot ismertet. A gonococcusokat e módszer szerint desztillált vízben szuszpendálják, majd a szuszpenziót ultrahanggal kezelik. Az ezután elkülönített antigént koleszterin-lecitin szemcsékkel szuszpendálják. A Journal of Bacteriology, 47, 129-157 (1944) szakirodalmi helyről olyan módszer vált ismertté, amelynek lényege az, hogy nukleoproteinek és liponukleoproteinek különíthetők el Neisseria gonorrhoeae elölt sejtjeinek szuszpenziójából. Az említett szakirodalmi helyeken ismertetett módszerek egyike sem ad azonban kitanítást arra nézve, hogy a Neisseria gonorrhoeae komplett sejtjeiből olyan, nem-fehérje jellegű komponensek különíthetők el, amelyek antigénként gonorrhoea szerológiai kimutatására hasznosíthatók. 174883