174743. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új tripeptid-p-nitranilidek előállítására

174743

8

4. példa

Benziloxikarbonil-L-lizil-L-prolil-L-arginin-p-nitranilid-diklórhidrát előállítása

1. lépés:

benziloxikarbonil-e-terc-butiloxikarbonil-L-lizil-L-prolin

Elemzési eredmény C31H4507N9C12 (726,65) képletre vonatkoztatva:

számított:

talált:

C =51,2%, N =17,35%, C =51,1%, N =17,25%,

H = 6,25%, Cl = 9,75%, H = 6,3%, Cl = 9,8%.

11,2 g (20 mmól) benziloxikarbonil-e-terc-butil- 10 5. példa oxikarbonil-L-lizin-2,4,5-triklórfenilésztert [Z-Lys(Boc)-OTCP-t] feloldunk 20 ml vízmentes piridinben, és hozzáadunk 2,53 g (22 mmól) prolint, valamint 2,94 ml (21 mmól) trietilamint. A reakcióelegyet 4-6 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd bepároljuk, és a maradékot víz-éter 1 :1 elegyében oldjuk. Az éteres fázist 5%-os nátrium-hidrogén-karbonátoldattal mossuk, majd a vizes oldatokat egyesítés után vízzel mossuk és tömény kálium-hidrogén-szulfát-oldattal savanyítjuk. A vizes részt — mely olaj formájában tartalmazza a dipeptidet — etilacetáttal mossuk, az etilacetátos oldatot szárítjuk és bepároljuk. Ilyen módon 9,6 g olajat nyerünk.

15

20

Benziloxikarbonil-L-lizil-L-norleucil-L-arginin-p-nitranilid-dihidrogénklorid

előállítása

1. lépés:

L-norleucil-L-arginin-p-nitranilid-dihidrogén-bromid

25

2. lépés:

benziloxikarbonil-e-terc-butiloxikarbonil-L-lizil-L-prolin-pentaklórfenil-észter

Az 1. lépésben kapott olajat feloldjuk 20 ml 30 dimetilformamidban, hozzáadunk 5,9 g (22 mmól) pentaklór-fenolt és 4,15 g (20 mmól) diciklohexil-karbodümidet, majd éjszakán át állni hagyjuk. Szűrés után az oldatot bepároljuk, a maradékot feloldjuk 2—300 ml benzol-ciklohexán 1 :1 elegyé- 35 ben, háromszor 5—6 ml 1 n nátrium-hidroxiddal, majd vízzel mossuk, végül vízmentes kálium-karbonáton szárítjuk és bepároljuk. A párlási maradékot diizopropil-éterrel kristályosítjuk, szűrjük, diizopropil-éterrel mossuk és szárítjuk. így 10,2 g (70%) 40 védett dipeptid-aktivésztert kapunk. Op.: í 03—

—105°. [a]p =-56,1° (c=l, metanolban).

Elemzési eredmény CjoH^Ot^CIs (725,78) képletre vonatkoztatva:

számított: C =49,6%, H = 6,7%, 45

N = 5,8%, Cl = 24,4%,

talált: C =49,5%, H = 4,7%,

N = 5,8%, Cl = 23,7%.

3. lépés: 50

benziloxikarbonil-L-lizil-L-prolil-L-arginin-p-nitranilid-diklórhidrát

3,63 g (5 mmól) védett dipeptid-aktív-észtert (4. példa, 2. lépés) feloldunk 7 ml dimetilformamid- 55 ban, hozzáadunk 2,25 g (6 mmól) Arg-NPN*HBr-t, az elegyet 2-3 órán át keverjük, majd éjszakán át állni hagyjuk. Ezután a reakcíóelegyet 50 ml etílacetáttal hígítjuk, vízzel mossuk és bepároljuk. A párlási maradékot feloldjuk 10 ml etil-acetátban, és 60 hozzáadunk 10 ml 2-2,5 n etilacetátos sósavat. A kivált anyagot kiszűrjük és etilacetáttal mossuk, majd szárítjuk. így 3,3 g (90%) végterméket kapunk.

0,2-0,3. [a]p° =-81° (c=l, metanolban). 65

7,1 g (20 mmól) benziloxikarbonil-L-norleucin-p-nitrofenilésztert (Z-Nle-ONP-t) feloldunk 20 ml dimetilformamidban, és 8,25 g (22 mmól) H—Arg-NPN'HBr hozzáadása után szobahőmérsékleten keverjük 4-5 órán át. A reakcíóelegyet bepároljuk, a maradékot feloldjuk etilacetátban és mossuk 0,ln hidrogén-bromiddal, majd vízzel, és szárítás után bepároljuk. A maradékot feloldjuk 50 ml 3—4 n jégecetes hidrogén-bromidban. Az oldatot állni hagyjuk egy órán át szobahőmérsékleten, majd 200—300 ml éterrel hígítjuk. A kivált anyagról az oldószert leöntjük, és a maradékot éterrel eldörzsöljük, szűrjük, éterrel mossuk és szárítjuk. Ilyen módon 9,6 g (84%) terméket kapunk. Rj 0,7-0,8.

2. lépés:

benzüoxikarbonil-L-lizil-L-norleucil-L-arginin-p-nitranilid-diklórhidrát

2,5 g (4,4 mmól) dipeptid-származékot (5. példa, 1. lépés) és 2,25 g (4 mmól) benziloxikarbonil-e-terc-butoxikarbonil-L-lizin-2,4,5-triklórfenilésztert [Z-Lys(Boc)-OTCP-t] feloldunk 8 ml piridinben, majd hozzáadunk 0,7 ml (5 mmól) trietilamint, és szobahőmérsékleten 4-5 órán át keverjük, majd éjszakán át állni hagyjuk. Ezután a reakcíóelegyet bepároljuk, feloldjuk 0,1 n sósav-metilén-klorid 1 :1 elegyében. A metilén-kloridos oldatot mossuk 0,1 n sósavval és vízzel a szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A párlási maradékot feloldjuk 10 ml etilacetátban, és hozzáadunk 10 ml 2-2,5 n etilacetátos hidrogén-kloridot. Fél óra után a kivált csapadékot kiszűrjük, etilacetáttal mossuk és szárítjuk. így 3,5 g (90%) végterméket kapunk.

Rf 0,3-0,4 [a]p° = -43° (c=l, metanolban).

Élemzési eredmény CS2 H49O7N9 Cl2 (742,70) képletre vonatkoztatva:

számított:

talált:

C =51,7%, N = 16,95%, C =51,4%

N = 16,8%

H =6,65%, a =9,55%, H =6,7%, a = 9,5%.

4