174743. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új tripeptid-p-nitranilidek előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTARSASAG SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY 74743 Bejelentés napja: 1976. VI. 24. Nemzetközi osztályozás: (GO—1345) C 07 C 103/52 ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1979. IX. 28. Megjelent: 1980. IX. 30. Feltalálók: Szabadalmas: Dr. Bajusz Sándor tanár, Dr. Tolnay Pál vegyészmérnök, Gyógyszerkutató Intézet, Budapest Dr. Barabás Éva vegyész, Dr. Bagdy Dániel orvos, Széli Györgyné vegyész,,Mohai Lászlóné vegyésztechnikus, Budapest Eljárás új tripeptid-p-nitranilidek előállítására 1 2 A találmány tárgya eljárás az I általa mos képletü - ahol A jelentése L-prolin- vagy L-norleucin-csoport, B jelentése rövid szénláncú cj-amino-alkil-, rövid szénláncú alkil- vagy benzil-oldalláncú L- vagy D-konfigurációjú a-aminosav-csoport, Arg jelentése a szakirodalomnak [pl. J.Biol.Chem., 247, 977 (1972)] megfelelően L-arginincsoport, Z jelentése benziloxikarbonil-csoport, és NPN jelentése p-nitro-fenil-amino-csoport - új tripeptid-p-nitranilidek és azok savaddíciós sóinak előállítására. Ismeretes, hogy az acil-arginin-p-nitranilidek, pél- 15 dául a benzoil-L-arginin-p-nitranilid (Bz-Arg-NPN) [N. Nishi és munkatársai: Bull. Chem. Soc. Japan 43, 2900 (1970)] és az arginin-peptidek p-nitranilidjei (798 916 és 798 917 sz. belga szabadalmi leírások) a bázikus szerin-proteázok (pl. tripszin) 20 szubsztrátjaiként viselkednek és ezen enzimek aktivitásának, valamint mennyiségének meghatározására alkalmasak. A fenti vegyületeket a megfelelő, karboxil-terminálisán szabad, másutt védett argininből, illetve arginin-peptidből állítják elő p-nitro-fenil-izo- 25 cianáttal, mely reakcióban az arginin csoport részlegesen racemizálódhat. A kereskedelmi forgalomban levő Bz-Arg-NPN és a Bz-Phe-Val-Arg—NPN (798 916 sz. belga szabadalmi leírás) tripszinen mért, a szubsztrátok érzékenységére jellemző 30 ún. proteolitikus állandója 0,135, illetve 75pmól_1 • perc'* 1. A találmány célja olyan új peptid-p-nitranilidek előállítása, melyek az ismert vegyületeknél jobb 5 szubsztrát tulajdonsággal rendelkeznek, s így az eddiginél kisebb enzim mennyiségek meghatározására is alkalmasak. Azt találtuk, hogy az arginin-peptid-p-nitranilideknek a bázikus szerin-proteázokhoz való kötődési 10 képessége, s így szubsztrát tulajdonsága nagymértékben függ az arginin előtt álló, az I általános képletben A-val jelölt aminosav-csoport minőségétől. Előnyösnek találtuk az olyan vegyületeket, ahol a képletben A jelentése L-prolin- (Pro) vagy L-norleucin- (NLe) csoport. Megállapítottuk továbbá, hogy e peptidek kötődési képessége még tovább fokozható, ha a prolil-arginin-p-nitranilidhez N-terminális aminosavcsoportként alkil-, aralkil-, illetve co-amino-alkil-oldalláncú aminosav-csoport kapcsolódik. A fentiek alapján a találmány eljárás az I általános képletű - ahol A, B, Arg, Z és NPN jelentése a fenti — új tripeptid-p-nitranilidek és azok savaddíciós sóinak előállítására, amely abban áll, hogy L-arginin-p-mtranilid-sót a peptidkémiában ismert módon a rendre következő, terminális aminocsoportján és kívánt esetben az oldallánc funkciós csoportján lehasítható védőcsoporttal ellátott aminosavakkal vagy dipeptiddel kondenzálunk, az oldallánc funkciós csoportján levő védőcsoportot eltávolítjuk, és 174743
