174655. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tireotropint felszabadító hormon előállítására
SZABADALMI 174655 MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG LEÍRÁS Nemzetközi osztályozás C 07 C 103/52 Ifrpf Bejelentés napja: 1976.HI.24. (WI-271) ** Elsőbbsége: Német Demokratikus Köztársaság: 1975. III .24. (WP C 07 d/184 969) ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1979.VII.28. Megjelent: 1981.11.15. Feltaláló: Szabadalmas: dr. Bienert Michael, vegyeszmemok, Akademie der Wissenschaften der DDR, Berlin dr. Koller Györgyi, vegyészmérnök, Német Demokratikus Köztársaság dr. Niederich Hartmut, vegyszmémök, Berlin, Német Demokratikus Köztársaság Eljárás tireotropint felszabadító hormon előállítására 1 A találmány tárgya új eljárás tireotropint felszabadító hormon (tireotropin releasing hormone, TRH) előállítására. A TRH hipotalamiás pepiid, amely a tiroid-stimuláló hormon hipofízisből való felszabadítását szabályozza és szerkezete az (I) képlet szerinti. A TRH-t többek között a pajzsmirigyes megbetegedéseknél, mint diagnosztikumot használhatjuk fel klinikailag. 1969-ben tárták fel a TRH szerkezetét és azóta előállítására több eljárást is kidogoztak, melyeknél a peptid szekvencia felépítése a C-terminális és az N-terminális végéről egyaránt történt. Az első esetben az ^-helyzetben terc-butil-karbonü- (Boc), benziloxi-karbonü-, (Z), o-nitrofonÜ-szulfonil-, (Nps) vagy amiloxi-karbonil- (Aoc) csoportokkal és az oldalláncban benziloxi-karbonil-, (Z), benzil“(SZL) vagy tozil-, (TOS) csoportokkal védett vagy védetlen hisztidint az azid, aktíváit észter- vagy a diciklohexil-karbodiimid (DCC) módszerrel, adott eseben 4,4’-dimetoxi-benzhidril-csoporttal • (Mbh) védett prolinamiddal reagáltatják, a keletkezett dipeptidről részben vagy egészen acidolitikusan vagy hidrogeno - btikusan a védőcsoportokat lehasítják és önmagában ismert módon összekapcsolják a piro-glutamü-csoporttal. A piro-glutamil-csoport bevezetése vagy úgy történik, hogy piro-glutaminsavat vagy Z-piro-glutaminsavat vagy megfelelően védett vagy védetlen piro-glutamin sav-ész tért alkalmaznak vagy egy glutamin-származékot kapcsolnak a kiindulási anyaghoz, majd ezt követőleg piro-glutamil-peptiddé ciklizálják. 2 Ha az N-terminális végéről kiindulva építik fel a TRH-t, akkor a hisztidinmetil-észtert az aktíváit észter diciklohexil-karbamid (DCC) vagy vegyes anhidrid módszerrel vagy piro-glutaminsawal,Z-piro-glu- 5 taminsawal, illetve az NaZ-csoporttal védett és az azidnitrogénen Mbh-csoporttal védett glutaminnal reagáltatják, a keletkezett dipeptidet lúgosán elszappanosítják, ily módon dipeptidsavat vagy hidrazinolizissel dipeptid-hidrazidot kapnak, majd a DCC vagy 10 azidmódszerrel prolinamiddal illetve Mbh-csoporttal védett prolinamiddal reagáltatják és adott esetben ciklizálják. Ismeretes olyan eljárás-is, amelynek során a TRH előállításához a közbenső termékeket nem kell izolál- 15 ni, védőcsoportokat sem kell használni, hanem piroglutaminsav-pentaklór-fenil-észtert és a hisztidin nátrium sóját használják, majd ezt követőleg adják hozzá a prolinamidot (2 139 310 számú NSZK-beli közrebocsátási irat). 2o Az ismert eljárásoknak néhány hátránya van. Az olyan eljárások, ahol sem a savfunkciós csoportok, sem pedig a hisztidin oldallánc nincsenek védve, csak mérsékelt termeléssel szolgáltatják a tripeptidet és ennél fogva nagyfokú tisztítás válik szükségessé. [2 25 139 310 számú NSZK-beli közrebocsátási irat, K. Inoyo, K. Namba, H. Otsuka, Bull. Chem. Soc. Japan 44.1689 (1971), 3 73 7 422 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás, J. K. Chang, H. Svertsson, C. Bogen toft, S. Currie, K. Folkers, G.D. 30 Daves, Jr.; J. Med. Chem. 14, 481, (1971)]. Más szintéziseknél az imidazol-gyűrűt benzil-csoporttal (3 174655
