174576. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-(brómmetil)-7-acilamido-3-cefém-4-karbonsav-1-oxidok előállítására
9 174576 10 A magmágneses rezonanciaspektrum adatai: (CDCI3—DMSO—D6): 1,57 (s, 9H,) 3,44, 3,74, 3,79, 4,09 (ABq, 2H, J = 18 Hz), 4,26, 4,42, 4,51, 4,67 (ABq, 2H, J-10,5 Hz), 4,90 (d, 1H, J = 4,8 Hz), 6,20 (dd, 1H, J = 4,8 és 9,5 Hz), 7,35-7,96 (m, 5H), 7,85 (d, 1H, J = 9,5 Hz). Az infravörös spektrum adatai: 3330, 1795, 1715, 1645, 1520, 1030 cm'1. Az így kapott vegyületet használjuk referencia-anyagként az alább leírt nagynyomású folyadékkromatográfiás analízisnél. (e) 248,1 mg l.c) példa szerint kapott terméket (amely kvantitatív magmágneses rezonancia analízis szerint 78%-os tisztaságú) 10 ml acetonban oldunk. Az oldathoz 0,05 ml ecetsavat adunk, és jeges fürdőben történt lehűtés után 0,2 ml trimetil-foszfitot. Az elegyet további 10 percig jeges fürdőben tartjuk, majd acetont adunk hozzá, amíg az elegy térfogata pontosan 25 ml lesz. Az oldatból 5 ml-t mégegyszer felhígítunk acetonnal 25 ml-re, és 5 ml így kapott oldatot használunk a nagynyomású folyadékkromatográfiás analízishez. Azt találtuk, hogy az oldat milliliterenként 1,17 mg terc-butil-7-be nzamido-3-(bróm-metil)-3 -cefém-4-karboxilát-1 - -oxidot tartalmaz, ebből arra következtethetünk, hogy a debrómozás hozama 89%. A maradék oldatokat egyesítjük, és szárazra pároljuk. Egy éjszakán át szobahőmérsékleten vákuumban szárítjuk, így 242,2 mg maradékot kapunk. Ha a debrómozási művelet kvantitatíve végbemegy, akkor a maradéknak 66% terc-butil-7-be nzamido-3-(bróm-metil)-3-cefém-4-karboxiIát-1 - oxidot kellene tartalmaznia, a kvantitatív magmágneses rezonancia analízis 68% tartalmat jelez. így arra következtethetünk, hogy a debrómozási eljárás valóban kvantitatíve végbemegy. 2. példa (a) 2,02 g (5 mmól) terc-butil-7-(fenil-acetamido)-3-metíl-3-cefém-4-karboxilát-l-oxid 50 ml vízmentes diklór-metánnal készült oldatához nitrogénatmoszférában és jeges hűtés közben 1 óra alatt részletekben 1,71 g (9,6 mmól) N-bróm-szukcinimidet adunk, közben a reakcióelegyet egy 150W-OS volfrámlámpával megvilágítjuk. A megvilágítást további 1,5 órán át folytatjuk, és utána az oldószert eldesztilláljpk. A maradékot kevés acetonban feloldjuk, majd a terméket petroléter (60-80 °C közötti frakció) hozzáadásával kicsapjuk. Így 2,36 g szilárd terméket kapunk. (b) Az előbbi pontban kapott szüárd anyagból 625 mg-ot feloldunk 40 ml 1,2-diklór-etánban, és szűrés után az oldatot acetonnal 100 ml-re hígítjuk, az oldat 5 ml-ét acetonnal újra 25 ml-re hígítjuk. Nagynyomású folyadékkrmnatográfiás (HPLC) analízis szerint az oldat az alábbi vegyületeket tartalmazza ml-énként: 1,0 x 10'3 mmól terc-butil-3-(bróm-metil)-7-(fenil-acetamido)- 3-cefém-4-karboxilát-l-oxid (II típusú vegyület), 0,17 x 10-3 mmól terc-butil-2-bróm-3-metil-7-(fenil-acetamido)- 3-cefém-4-karboxilát-l-oxid (III típusú vegyület), 0,66 x 10'3 mmól terc-butil-2-bróm-3-(bróm-metil)-7 -(fenil-acetamido)- 3-cefém-4-karboxilát-1 -oxid (IV típusú vegyület). A brómozási eljárás kündulási anyaga, azaz terc-butil- 7-(fenü-acetamido)-3-metil-3-cefém-4-karboxilát-l-oxid (I típusú vegyület), nem mutatható ki a reakcióelegyben. Az eredeti oldat más 5 ml-es részleteihez szobahőmérsékleten valamilyen alább felsorolt foszfitot adunk, ezeket az oldatokat is 25 ml-re hígítjuk acetonnal. Az oldatok HPLC-analízisének eredményeit az alábbi táblázatban összegezzük. Foszfor vegyület HPLC analízis (10"3 mmól/ml) I II trimetil-foszfit 0,18 1,7 triizooktü-foszfit 0,18 1,8 triizodecil-foszfit 0,18 1,7 trifenil-foszfít 0,17 1,8 Arra következtethetünk, hogy a III típusú vegyület (2-bróm) és a IV típusú vegyület [2-bróm-3-(bróm-metil)] a foszfitok hatására teljesen átalakul a megfelelő debrómozott termékké. (c) A fenti HPLC analízisnél alkalmazott referenciavegyületeket a következőképp állítjuk elő: 4,6 g (9,5 mmól) terc-butil-2-bróm-7-(fenil-acetamido)-3-metil-3-cefém- 4-karboxilát-l-oxid 350 ml diklór-metánnal készült oldatát jeges hűtés közben egy 150 W-os volfrámlámpával megvüágítjuk, és 105 perc alatt apránként hozzáadunk 3,05 g (17,1 mmól) N-bróm-szukcinimidet. Az adagolás befejezése után a megvilágítást még egy órán át folytatjuk. A narancssárgára színeződött oldatot alacsony hőmérsékleten szárazra pároljuk. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk (eluálás diklór-metán : aceton először 72:1, majd 49:1 térfogatarányú elegyével). így 1,4 g (26%) terc-butil-2- -bróm-3-(bróm-metil)-7-(feniI-acetamido)- 3-cefém-4- -karboxilát-1-oxidot (IV típusú vegyület) kapunk. A magmágneses rezonanciaspektrum adatai (CDCI3): 1,55 (s, 9H), 3,58 (s, 2H), 4,16, 4,61 (ABq, 2H, J = 11 Hz), 5,10 (d, 1 H), J = 5 Hz), 5,52 (s, 1H), 6,07 (dd, 1H, J = 5 és 10 Hz), 6,76 (d, 1H, J = 10 Hz), 7,26 (s, 5H). Az infravörös spektrum adatai: 3350, 3260, 1790, 1705, 1670, 1500, 1060 cm'1. 3. példa (a) (2-Bróm-etil)-7-(fenü-acetamido)-3-metil-3-cefém-4-karbonsav-l -oxid oldatát brómozzuk a 2.a) példában leírt eljárás szerint, a kísérletet megismételjük. S 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
