174539. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új BU-2183 antibiotikumok előállítására
29 174539 30 Táblázat folytatása Kémiai eltolódás Kapcsolási Relatív (6, ppm) állandó intenzitás (J, Hz) 3,5—4,3 m 12H 5,17 d 3,0 1H s: szingulett, d: dublett, t: triplett, q: kvartett, m: multiple«. 4. példa (Bu—2183 B előállítása) Vízben feloldjuk a Bu—2183 B-nek a 2. példában leírt módon nyert mintáját (3,3 g) és egy Amberlite CG-50 ioncserélő gyantával (NH4+-fázis, 130 ml) töltött oszlopra visszük fel az oldatot. 3,05 normál ammónium-hidroxid-oldattal eluáljuk íz oszlopot, frakciószedővel 15 ml-es frakciókat szedünk. Vékonyrétegkromatográfiával (ninhidrines előhívás) és biológiai értékméréssel vizsgáljuk a frakciókat, egyesítjük, és csökkentett nyomáson betöményítjük a megfelelő frakciókat, majd liofilizáljuk a maradékokat, ily modor, a következő szilárd halmazállapotú anyagokat nyeljük. Frakciószám A szilárd anyag súlya Vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat 1-59. 86 mg B + szennyezés 60-151. 2792 mg B 152-160. 356 mg B + (kevés) szennyezés A Bu—2183 B tiszta mintájának analízise a Ci 4 H2 9 N3 09 • 1 /2H2 C03 képletre: számított: talált: C =42,02%, N =10,14%, C =41,92%, N = 9,93%. H = 7,30%, H = 7,43%, Infravörös és NMR-spektrumát az 5. és 6. ábrán mutatjuk be. Az NMR-spektrum adatait az alábbiakban foglaljuk össze: Kémiai eltolódás (8, ppm) Kapcsolási állandó (J, Hz) Relatív intenzitás 2,02 s 3H 3,1—3,2 m 2H Táblázat folytatása Kémiai Kapcsolási Relatív eltolódás állandó intenzitás (8, ppm) (J » Hz) 3,6—4,3 m 12H 5,17 d 3,0 1H s: szingulett, d: dublett, m: multiple«. 5. példa (Bu—2183 C és Bu—2183 D előállítása) A 2. példában használt oszlopot további 1,4 liter 0,05 normál ammónium-hidroxid-oldattal mossuk, ezzel nem nyerünk további, biológiai aktív anyagot. Ezután 0,1 normál ammónium-hidroxid-oldattal eluáljuk az oszlopot, és vékonyrétegkromatográfiás úton (ninhidrines előhívás) vizsgáljuk az egyes frakciókat. Egyesítjük és csökkentett nyomáson betöményítjük a megfelelő frakciókat, majd liofilizáljuk a maradékokat, ily módon a következő, szilárd halmazállapotú anyagokat nyerjük: 0,1 normál A szilárd ammonium- anyag Azonosítás-hidroxid-oldat súlya 0-300 ml 301-1200 ml 1638 n« Bu-2183 C 1201-1900 ml 1901-2400 ml 526 n* Bu-2183 D 6. példa (Bu-2183 A2 előállítása) Az A komponensnek a 3. példában leírt tisztítási eljárása során az előfrakciókból egy új aktív komponens izolálható, amelyet Bu-2183 A2 komponensnek neveztünk el. Az S-117 és S-122 jelzésű futtatóelegyek vékonyrétegkromatográfiás segítségével az alábbiak szerint különböztethető meg az A komponenstől: Bu-2183 A Bu-2183 A2 S-117 Rf = 0,49 Rf = 0,57 S-122 Rf = 0,39 Rf = 0,48 15 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
