174150. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nagytisztaságú aktinomicin D előállítására

MAGYAR

NÉPKÖZTARSASAG

SZABADALMI

LEÍRÁS

SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY

174150

Nemzetközi osztályozás:

Bejelentés napja: 1976. IX. 16.

(GO-1351)

C 12 D 9/14,

C 07 C 103/52, C 07 D 265/28

országos

találmányi

HIVATAL

Közzététel napja: 1979. IV. 28. Megjelent: 1980. IV. 30.

Feltalálók: Szabadalmas:

Dr. Bérdy János vegyész, 20%, Daróczi Iván vegyész, 20%, Dr. Gadó István Gyógyszerkutató Intézet, Budapest

mikrobiológus, 20%, Bittera Vilmos vegyésztechnikus, 6,5%, Gál Éva vegyészmérnök, 6,5%, Dr. Farkas Lajos vegyész, 5%, Dr. Hegyaljai Kiss Géza vegyész, 5%, Tölgyesi László vegyésztechnikus, 5%, Dr. Csányi Endre orvos, 4%,

Dr. Koczka Istvánné vegyész, 4%, Sz. Császár Erzsébet dr. gyógyszerész, 4%,

Budapest_____________________________________________________________________________________________________

Eljárás nagytisztaságú

1

A találmány tárgya eljárás nagy tisztaságú, kristályos aktinomicin D (aktinomicin IV) előállítására fermentációs úton.

Ismeretes, hogy az aktinomicinek jelentős rákellenes hatással rendelkező kromo-depszipeptid jellegű antibiotikumok. Kiterjedt kemoterápiás alkalmazásuk mellett széles körben alkalmazzák őket — elsősorban az aktinomicin D-t — a biokémiai kutatásban mint specifikus ribonukleinsav-szintézist gátló anyagokat.

Az aktinomicineket a különböző Streptomyces törzsek komplexek (keverékek) formájában szintetizálják, e komplexeket latin betűkkel jelölik. A komplexek egyes komponensei (leggyakrabban 7 komponens fordul elő), melyeket a Waksman-féle nomenklatúrában római számokkal (I—VII) jelölnek, peptidláncuk összetételében különböznek egymástól, és különböző arányokban több komplexben is előfordulhatnak. Mind gyógyászati, mind pedig biokémiai reagensként történő felhasználás tekintetében a IV-gyel jelzett aktinomicin D a legjelentősebb.

Több közlemény és szabadalom foglalkozik az aktinomicin D előállításával. így pl. Mateles és A. Ben-Basset [Agr. Biol. Chem. 37, 2215 (1973)] a Streptomyces antibioticus aktinomicin D termelését írják le. A termelt aktinomicin komplexükben az

aktinomicin D előállítására

2

aktinomicin D aránya 70—80% között van, a termelési szint 100 meg/ml körül van.

A 361 612 számú szovjet szabadalmi leírás alapján az Actinomyces olivobrunneus 40 liter erjesz- 5 téses oldatából 0,3 g 96,4% tisztaságú aktinomicin D-t állítanak elő alumíniumoxid oszlopon végzett kromatográfia után. Aktinomicin D termelését eddig a fenti két törzsön kívül csupán a Streptomyces parvulus esetében írták le (Antibiot. Ann. 10 1954—55. 853). Ezek a törzsek csak igen alacsony termelési szinten képesek az aktinomicin D termelésére, és igen sokszor a tiszta termék előállítására hosszadalmas, gyakran több kromatográfiás lépést igénylő tisztítási műveletekre van szükség.

15

Az aktinomicin-típusú antibiotikumok, így az aktinomicin D irodalmának igen jó és részletes összefoglalásai a következők: Adv. Appl. Microbiol. 17, 203—301 (1974), Chemical Reviews 74, (6) 20 625-652 (1974).

Vizsgálataink során talajmintából egy olyan Streptomyces törzset izoláltunk, mely minden eddig ismert Streptomyces törzstől eltérő új fajnak bizonyult, és ez a törzs igen magas termelési 25 szinten (700—1000 pg/mi) és viszonylag rövid fermentációs idő alatt képes teljesen tiszta, egyéb aktinomicinektől teljesen mentes aktinomicin D termelésére. A magas termelési szint következtében az aktinomicin D elkülönítése is igen egyszerű és 30 gazdaságos.

174150