174114. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új aminosav-származékok előállítására
11 174114 12 dat és 225 ml jégecet frissen készített elegyét csepegtetjük hozzá. A jégecetes hidrogén-peroxid be csepegi et ése után a hűtést megszüntetjük és a reakcióelegyet 4 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük, majd 30 °C-on vákuumban bepároljuk. Az olajos terméket exszikkátorban először foszfor-pentoxid, majd szilárd kálium-hidroxid felett szárítjuk. A termék 28,5 g karbobenziloxioKa-benzil)-L-glutamil-taurin. A nyers terméket tisztítás nélkül 7-L-glutamil-taurin előállítására használhatjuk fel. 3. példa 26,32 g (55 mM) karbobenziloxi-y-fú-benzil)-L-glutamil-taurint (2. példa) feloldunk 50 ml jégecetben, majd 50 ml 4 mólos jégecetes hidrogénbromid-oldatot adunk hozzá. Élénk széndioxid-fejlődés tapasztalható. Az elegyet szobahőmérsékleten 2 órán át állni hagyjuk, majd vákuumban 30 °C-on bepároljuk. Az olajos maradékot 170 ml vízben oldjuk és 5 x 70 ml éterrel kirázzuk. A vizes fázist vákuumban 35 °C-on bepároljuk. A termék 20,42 g 7<a-benzil)-L-glutarriil-taurin, mely 90%-os etanolból átkristályosítható. Rf (n-butanol-piridin-jégecet-víz 15:10:3:12) = 0,53 Rf (n-butanol-jégecet-víz 4:1 :1). 4. példa 529 mg (1,1 mM) karbobenziloxi-7-(a-benzil)-L-glutamil-taurint (2. példa) feloldunk 5 ml In kálium-hidroxid-oldatban és szobahőmérsékleten 4 órán át állni hagyjuk. Ezután az oldatot 3 x 3 ml éterrel kirázzuk, a vizes fázist egy 1 x 20 cm-es Dowex 50 x 2 oszlopra visszük és vízzel eluáljuk. 50 ml oldatot gyűjtünk, melyet vákuumban 35 °C-on szárazra párolunk. A nyers karbobenziloxi-7-L-glutamil-taurint pH 6,5-nél végzett papírelektroforézissel tisztítjuk. Ciszteinsavra vonatkoztatott relatív mozgékonysága 1,05. Rf (n-butanol-piridin-jégecet-víz 15:10:3:12) =0,57 5 5. példa 5,79 g (12,1 mM) karbobenziloxi-7-(a-benzil)-L-glutamil-taurint (2. példa) 100 ml etanol és 25 ml víz elegyében oldunk és rázás közben 0,5 g 10%-os palládium-csontszén katalizátor segítségével hidrogénezzük, előnyösen két alkalommal újabb 0,25—0,25 g katalizátor beadagolásával. A hidrogén-fogyás megszűnése után az .oldatot szüljük, 30 °C-on vákuumban bepároljuk és a visszamaradó olajos anyagot exszikkátorban foszfor-pentoxid felett szárítjuk. A termék 3,1 g 7-L-glutamil-taurin. Vízben igen jól, alkoholban nem oldódik. Kevés víz, majd alkohol kis részletekben történő adagolásával kristályosítható. A kristályos nyers termék olvadáspontja: 202—204 °C. Az anyagot 80%-os etanolból többször átkristályosítjuk. A tisztított végtermék súlya: 2,02 g az N,N’-bisz[N-karbobenziloxi-7-(a-benzil)-L-glutamil]-cisztaminra számítva 66%. Op.: 219—220 °C. [a]p° = +14° (víz, c=l,02). Ciszteinsavra vonatkoztatott relatív mozgékonyság pH = 6,5-nél papírelektroforézisnél: 0,73, pH= 1,8-nál pedig 0,53. Rf érték (n-butanol-piridin-jégecet-víz 15:10:3:12) = 0,19 Analízis a C7H14N206S (254,27) képletre: Számított: C = 33,07%, H = 5,55%, N= 11,02%, 0 =37,75%, S =12,61%, Talált: C =33,15%, H = 5,76%, N= 10,94%, 0 =37,53%, S =12,17%. 6. példa A 3. példában kapott 7-(a-benzil)-L-glutamil-taurint (20,42 g) feloldjuk 150 ml In kálium-hidroxid-oldatban. Az elegyet szobahőmérsékleten 4 órán át állni hagyjuk, majd felvisszük egy 2x100 cm-es, H+-ciklusban levő Dowex 50x2 oszlopra (Fluka, 100—200 mesh), majd vízzel eluáljuk. A vizes mosás kezdetétől számítva 300 ml eluátumot szedünk, s ezt vákuumban 35 °C-on bepároljuk. Az olajos maradékot 8—10 ml víz és mintegy 100 ml etanol hozzáadásával kristályosítjuk. Szűrés, alkohollal történő mosás és szárítás után a kristályos termék 13,7 g 7-L-glutamil-taurin. Az anyagot 80%-os vizes alkoholból átkristályosítjuk. A tiszta termék súly 9,79 g N,N’-bisz[N-karbobenziloxi-7-(a-benzil)-L-glutamil ]-cisztaminra számítva 70%. Fizikai állandói megegyeznek az 5. példában megadottal. 7. példa 5,42 g (11 mM) karbobenziloxi-L-glutaminsav-(a-benzil)-7-p-nitrofenilésztert [Chem. Bér. 96, 204, (1963)] feloldunk 50 ml piridinben, az elegyet 0 °C-ra hűtjük és 30 perc alatt 1,25 g (10 mM) taurin 20 ml vízzel készített oldatát csepegtetjük hozzá intenzív keverés közben. Ezután az elegyhez 3,08 ml (22 mM) trietilamint csepegtetünk, majd a hűtést és a keverést megszüntetjük. Az elegyet szobahőmérsékleten 72 órán át állni hagyjuk, majd vákuumban bepároljuk. A maradékot 50 ml vízben oldjuk és a sárga oldat elszíntelenedéséig 1 n sósav-oldatot adagolunk hozzá. Az oldatot a p-nitrofenol eltávolítása céljából 10 x 50 ml éténél kirázzuk. A vizes fázist vákuumban bepároljuk. A termék 6,9 g karbobenziloxi-7- -(a-benzil)-L-glutamil-taurin-trietilammónium-só. Az anyagot ezután katalitikus hidrogénezésnek vetjük alá az 5. példa szerint, majd az oldószert vákuumbepárlással eltávolítjuk és a trietilamin eltávolítása céljából az anyagot kevés vízben oldjuk és 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
