174072. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 3,7-diszubsztituált-cef-em-4-karbonsav-származékok előállítására
5 174072 6 1. táblázat folytatása Vegyület (száma) Staphylococcus aureus Staphylococcus pyogenes Escherichia coli B Klebsiella pneumoniae Shigella flexneri Proteus mirabilis Salmonella abortivo equina Salmonella typhimurium 318 0,097 6,25 3,1 3,1 12,5 3,1 12,5 321 0,037 0,12 1,25 0,25 10 10 20 20 327 0,1 0,12 1 0,15 1,25 20 2,5 cefalotin 0,1 1,25 1,25 0,3 1,5 6,2 1,5 3 cefalozin 0,1 1,25 1,25 0,6 1,5 3,1 1,25 1,5 A vegyületek terápiás aktivitásának meghatározására in vivo vizsgálatokat végeztünk 6-6 darab Swiss Cobs albino hím egérből álló csoportokon. Az állatokat Staphylococcus aureus és Salmonella abortivo equina mikroorganizmusokkal fertőztük meg, az LDS0 értéknek megfelelő mennyiség kétszeresét adva be i.p. A kísérletileg fertőzött állatokat 4 óra elteltével a találmány szerinti vegyületekkel kezeltük (szubkután beadás). Az elhullást 7 napig naponta feljegyeztük. A vegyületek aktivitását ED50 érték formájában határoztuk meg (az a mg/kg egységben kifejezett dózis, amely a megfertőzött egerek 50%-át meggyógyítja) [Reed és Münch. Am. J. Hyg., 27, 493 (1938)]. A kapott eredményeket a 2. táblázat tartalmazza. 2. táblázat Terápiás aktivitás egéren (Staphylococcus aureus) Vegyület (száma) ED5o, mg/kg 356/307 50 308 17,5 310 35 311 17,5 312 40 313 20 314 20 315 40 316 40 321 15 cefalozin 30 cefalotin 30 A találmány szerinti vegyületek mind széles 20 spektrumú antibakteriális aktivitással rendelkeznek. Különösen kiemelkednek a 356/307, 308, 310, 313, 314, 315, 316, 317, és 321 jelzésű vegyületek, amelyek kitűnő Staphylococcus ellenes hatásúak, és a hatásuk lényegesen kedvezőbb, mint az 25 ismert cefalosporin-származékoké, például a cefaloziné (1 206 305 számú nagy-britanniai szabadalmi leírás) vagy a cefalotiné (618 663 számú belga szabadalmi leírás). Az új (I) általános képletű vegyületek in vitro 30 vizsgálatokkal megállapított biológiai tulajdonságait igazolták azok az in vivo kísérletek, amelyek során egéren kísérletileg kiváltott fertőzéseket sikeresen küzdöttek le. Valóban, a 356/308, 311, 313, 314 és 321 jelzésű vegyületek a cefalozinnál és a 35 cefalotinnál hatékonyabbaknak bizonyultak a Staphylococcus aureus törzzsel kísérletileg kiváltott fertőzéseknél. A találmány szerinti vegyületek általában kevés- 40 bé aktívak Gram-negatív baktériumokkal szemben. A 314, 317 és 321 jelzésű vegyületek azonban ugyanolyan terápiás aktivitást mutattak, mint a cefalotin, Salmonella abortivo equina mikroorganizmussal szemben egéren. A 321 jelzésű vegyület 45 terápiás aktivitása Salmonella abortivo equina törzszsel kísérletileg fertőzött egéren lényegében megegyezett a cefalotinéval, és valamivel kisebb volt, mint a cefaloziné (ED50 értékek, mg/kg: 321 = 50, cefalotin = 50, cefazolin = 25). Ez a viselkedés eltérő 50 farmakokinetikára mutat, vagy legalább is azt jelzi, hogy az új vegyület nagyobb mértékben hozzáférhető a szervezet számára. A találmány szerinti eljárást az alábbi példákon részletesen ismertetjük. 55 1. példa 7-Fenil-acetamido-3-(6-karboxamido-pirazin- 60 -2-il-tiometil)-cef-3-em-4-karbonsav (356/311) 3 g 7-fenil-acetamido-3-acetoxi-metil-cef-3-em-4- -karbonsavat, 1,3 g 2-merkapto-pirazint és 1,36 g 65 nátriumhidrogénkarbonátot 30 ml víz és 15 ml ace-3
