173825. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nagytisztaságú béta-ciklodextrin gazdaságos ipari előállítására
9 173825 10 Minta Lecsapószer 3 napos minta a-CD /3-CD 5 napos minta a-CD /3-CD D toluol ++ E p-cimol ++ F n-dekanol ++ CD = ciklodextrin + — = gyengén detektálható + = detektálható ++ = jól detektálható +++ = igen jól detektálható A vékonyréteg-kromatográfiás meghatározást oly módon viteleztük ki, hogy vízzel kétszeresére hígított majd forralással homogenizált ciklodextrin konverzióelegyből 5 /nl-t Silicagel-G (N-N, Polygram U-Sil G, gyártja: Macherey-Nagel Co., Düren, NSZK) vékonyrétegre csöppentünk és 4:3:3 arányú n-butanol-etanol-víz eluenssel, felszálló technikával futtatjuk. Az elválasztott ciklodextrineket a kifejlesztett kromatogram jódgőzkamrában való telítésével tesszük láthatóvá. 4. példa Az 1. példa szerint előállított 100 ml „B” jelű konverzióelegyet csapvízzel kétszeresére hígítjuk. A retrogradált alakban kivált keményítő maradványok diszpergálása, a toluol eltávolítása és a toluol-ciklodextrin zárvány komplex kristályok visszaoldása céljából felforraljuk a konverzióelegyet és a felszabaduló toluolt vízgőzdesztillációval eltávolítjuk. Az így nyert forró homogén oldathoz fél térfogatrész (100 ml) etanolt elegyítünk, az oldatot 40 1 óráig hűlni hagyjuk, majd az így kapott 33 térfogatszázalék etanol tartalmú zagyból a kivált keményítő-határdextrin-etanol komplexeket 2% Hyflo Super Cel jelű szűrési segédanyag segítségével kiszűrjük. A szűrést célszerűen 38—42 °C-on 45 végezzük. A kapott szűrletet 5 térfogatszázalék etanol tartalomig bepároljuk. Ehhez a koncentrátumhoz 5 térfogatszázalék toluolt adunk, majd az elegyet 10 óráig 18—20°C-on kevertetjük és a képződött csapadékot centrifugáljuk. 50 Az így nyert 35 g nedves súlyú (60% víztartalmú) centrifugált csapadékot 350 ml csapvízben felszuszpendáljuk és a toluolt 90—95 °C-on vákuumdesztüláció útján eltávolítjuk. Ezután a 55 desztillálást a fenti hőfokon folytatva a levet mintegy 60% szárazanyagtartalmú, szirup sűrűségű állagig betöményítjük. A /3-ciklodextrint az anya - lúgból szobahőmérsékleten kristályosítjuk, kiszűrjük és légszárazra szárítjuk. 60 Ily módon 11,2 g, 14,5% víztartalmú terméket nyerünk (szárazanyag tartalmának 90%-a 0-ciklodextrin), melynek dextróz-ekvivalensben kifejezett redukálóképessége < 0,5 DE. 65 ++ + +++ + +++ ++ + +++ + — 5. példa 20 A 4. példa szerint előállított nyers /3-ciklodextrinből (90 szárazanyagszázalék-tartalmú /3-ciklodextrint tartalmazó, 14,5% víztartalmú termék) 100g-ot 1800 ml desztillált vízben feloldunk 70 °C-on, majd 20 g aktív szénnel a fenti hőfokon, 25 kevertetés mellett derítjük. Az aktív szenet 55—60 °C-on kiszűrjük, a szűrletet 85—90 °C-on kivitelezett vákuumdesztillációval 1/8-ad térfogatra bepároljuk, majd a forró koncentrátumot leengedjük, kristályosítjuk. A kristályokat üvegszűrőn 30 szűrjük, 3 x 50 ml desztillált vízzel mossuk és légszárazra szárítjuk. Ily módon 83 g kristályos /3-ciklodextrint nyerünk, melynek /3-ciklodextrin tartalma szárazanyag-tartalomban kifejezve 99,2%, víztartalma pedig 12,9%. 35 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás nagy tisztaságú /3-ciklodextrin előállítására a-amilázzal elfolyósított keményítőből ciklodextrin-glükoziltranszferáz enzim segítségével és tisztítási műveletekkel, azzal jellemezve, hogy parciálisán elfolyósított, 25—35 súlyszázalékos, vizes keményítő szuszpenzióhoz ciklodextrin-glükoziltranszferáz enzimet adunk /3-ciklodextrin lecsapószer, előnyösen valamely alkil-benzol-származék, előnyösen toluol vagy p-cimol, vagy 8-12 szénatomos alkanol, előnyösen oktanol, dekanol, undekanol, dodekanol jelenlétében, a konverzió befejezése után a lecsapószert eltávolítjuk, előnyösen desztilláljuk, a konverzióelegyet 1—4 szénatomos alkohollal, előnyösen etanollal vagy i-propanollal elegyítjük, és a keményítő-határdextriritől megtisztítjuk, a visszamaradó oldatból a /3-ciklodextrint komplex formájában valamely alkil-benzol-származékkal előnyösen toluollal vagy p-cimollal szelektíven lecsapjuk és elkülönítjük, a komplexből a lecsapószert eltávolítjuk, előnyösen desztilláljuk, a visszamaradó oldatot bepároljuk, és kívánt esetben a kapott /3-ciklodextrint többször átkristályosítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a konverzióhoz 25—35 súlyszázalék, előnyösen 33 súlyszázalék kukoricakeményítőt és/vagy burgonyakeményítőt 5
