173804. lajstromszámú szabadalom • Eljárás klavulánsav-származékok előállítására
17 173804 18 sített extraktumokat vízmentes magnéziumszulfáton szántottuk. A kloroformot csökkentett nyomáson lepároltuk, és a visszamaradó 0,49 g sárga olajat szilikagél oszlopon kromatografáltuk. Az elúciót etilacetát és cildohexán 1 :2 arányú elegyével végeztük. Ilyen módon 0,150 g cím szerinti vegyületet kaptunk színtelen olaj alakjában. Infvarövös spektrum: (film) 1805, 1765, 1700 cm'1. MMR spektrum: (CDC13) 1,17 (9H, szingulett), 3.02 (1H, dublett, J = 17 Hz), 3,23 (3H, szingulett), 3,46 (1H, kettős dublett, J = 17 Hz és 3 Hz), 3,95 (2H, dublett, J = 7 Hz), 4,79 (1H, triplett, J = 7 Hz), 5.03 (1H, szingulett), 5.63 (1H, dublett, J = 3 Hz), 5,73 (2H, AB kvartett). 21. példa Klavulánsav-ftalidilészter-O-metil-éter előállítása 2,5 g klavulánsav-nátriumsó-metil-étert 10 ml száraz dimetilformamidban oldottunk, és az oldathoz keverés közben hozzáadtunk 8 ml dimetilformamidban oldott 2,16 g brómftalidot. A reakcióelegyet 1 órán át kevertük szobahőmérsékleten a nedvesség kizárásával. A dimetilformamidot csökkentett nyomáson lepároltuk, és a maradékot 50 ml etilacetátban oldottuk. Az oldatot 30 ml vízzel mostuk, és vízmentes magnéziumszulfáton szárítottuk. Az oldószert csökkentett nyomáson lepároltuk, és a visszamaradó 3,0 g narancsszínű olajat szilikagélen kromatográfáltűk, eluálószerként etilacetátot használva. 5 ml térfogatú frakciókat gyűjtöttünk össze, és a terméket tartalmazó frakciókat egyesítettük (az azonosítást vékony-rétegkromatográfiás vizsgálattal végeztük). Az oldószert csökkentett nyomáson lepároltuk, a visszamaradó 0,8 g viaszos anyagot száraz éterrel trituráltuk, a kapott szilárd anyagot szűrtük, vákuumban szárítottuk. 0,20 g cím szerinti vegyületet kaptunk színtelen szilárd anyag dákjában. Infravörös spektrum: (nujd) 1798, 1762, 1699 cm-1. MMR spektrum: (CDC13) 3,05 (1H, dublett, J = 17 Hz), 3,27 (3H, szingulett), 3,49 (1H, kettős dublett, J = 17 Hz és 3 Hz), 3,99 (2H, dublett, J = 7 Hz), 4,78 (1H, triplett, J = 7 Hz), 5,12 (1H, szingulett), 5.64 (1H, dublett, J = 3 Hz), 7,36 (1H, szingulett), 7,48-7,98 (4H, multiplett). 22. példa Biológiai aktivitás a) A találmány szerinti vegyületek, egereknek beadva, kevéssé toxikusak. Például szubkután be- i adás esetén az 5. és 12. példa szerinti vegyületek LDS0 értéke nagyobb, mint 250mg/kg. b) A találmány szerinti vegyületek növelték az ampicillin hatékonyságát különböző Gram-pozitív 5 és Gram-negatív organizmusokkal, így például a Staphylococcus aureus Russell, Klebsiella aerogenes, Proteus mirabilis és az Escherichia coli törzsekkel szemben. 1 /ig/ml találmány szerinti vegyület jelenlétében az alábbi minimális gátló koncentrációjQ értékeket kaptuk ampicillinre Staphylococcus aureus Russel törzs alkalmazásakor: DAl An Minimális gátló koncentráció Mg/ml 6. 1,6 7. 1,25 9. 1,25 10. 1 Az ampicillin önmagában nem gátolta a teszt 25 organizmus növekedését még 250/ig/ml koncentrációban sem. A találmány szerinti vegyületek egyike sem gátolta a teszt organizmus növekedését 5 /ig/ml koncentrációban. 30 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás a (II) általános képletű klavulánsav-származékok előállítására, ahol 35 R jelentése 1-4 szénatomos alkil-, 2-4 szénatomos alkenil-, benzil- vagy nitro-benzil-csoport, vagy egy Q-(CH2)n- általános képletű csoport, ahol 40 n értéke 1-4 közötti egész szám, Q jelentése (1-4 szénatomos alkoxi)-karbonil-, (1-4 szénatomos alkil)-karbonil-, benziloxi-karbonil-, halogén-fenil-karbonil-, ciano-, hidroxilvagy fenil-karbonil-csoport vagy adott esetben 45 1—4 szénatomos alkil-csoporttal és/vagy benziloxi-karbonil-csoporttal szubsztituált amino-csoport, A jelentése adott esetben 1-4 szénatomos alkoxi-csoporttal szubsztituált 1-4 szénatomos alkil- 50 -csoport, 2—4 szénatomos alkenil-csoport, benzil-csoport, szubsztituált benzil-csoport - ahol a szubsztituens előnyösen 1-4 szénatomos alkoxi-csoport - pivaloiloxi-metil-csoport vagy ftalidil-csoport, 55 azzal jellemezve, hogy valamely (III) általános képletű klavulánsav-észtert, ahol A1 jelentése adott esetben 1—4 szénatomos alkoxi-csoporttal szubsztituált 1-4 szénatomos alkoxi-csoporttal szubsztituált 1—4 szénatomos alkil-csoport, 2—4 szénato- 50 mos alkenil-csoport, benzil-csoport vagy szubsztituált benzil-csoport, ahol a szubsztituens előnyösen 1—4 szénatomos alkoxi-csoport, alkilezőszerrel, előnyösen egy Nj-R általános képletű diazo-vegyülettel, ahd R jelentése a fenti, reagáltatva étere- Í5 zünk, és kívánt esetben a kapott észtert önma9
