173662. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ovulációt serkentő új nonapeptidamid-származékok előállítására
25 173662 26 adunk hozzá. A reakcióelegyet ezután 0 °C-on 2 órán át, majd szobahőmérsékleten 5 órán át keverjük. A kicsapódott diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, majd a szűrletből a dimetil-formamidot csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékot 50 ml n-butanollal extraháljuk, majd az extráktumot egymást követően 5%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, 0,1 n sósavoldattal és vízzel mossuk. Az n-butanolt ezután ledesztilláljuk, majd a maradékot éténél eldörzsöljük, a kapott csapadékot pedig etanol és éter elegyéből újraoldás 149—151 C olvadáspontú vegyületet kapjuk. Fajlagos forgatóképesség metanolban). (bomlik) cím szerinti [a]37=-26,6° (c = 1, Rf4= 030. Elemzési eredmények a C3 9 Hg 3 Oj 2 Nj 1 • 3/2 H20 képlet alapján: számított: C =51,75%, H =7,35%, N =17,02%, talált: C =51,89%, H =7,30%, N =16,72%. (d) Z-Tyr-(Z)-Trp-OBzl előállítása 50 ml dioxán és 10 ml etil-acetát elegyében feloldunk 9,0 g Z-Tyr-(Z)-OH-t és 10,2 g Trp-OBzl-p-toluol-szulfonátot, majd a kapott oldatot 0 °C-ra lehűtjük és ezután egymást követően 3,93 g HONB-t, 4,53 g DCC-t és 3,0 ml trietil-amint adunk hozzá. A reakcióelegyet ezután 5 órán át keverjük, majd a kicsapódott diciklohexil-karbamidot kiszűrjük. A szűrletből az oldószereket csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, majd a maradékot 200 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot egymást követően 5%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, 1 n sósavoldattal és vízzel mossuk, majd nátrium-szulfát felett szárítjuk. Az etil-acetátot ledesztilláljuk, majd a maradékot először petroléterből kristályosítjuk, azután pedig etil-acetát és petroléter elegyéből átkristályosítjuk. Igv 13 g mennyiségben a 103—104 °C olvadáspontú cím szerinti vegyületet kapjuk. Fajlagos forgatóképesség [a]p3= -4,7° (c=l, metanolban). Rf4= 0,88. Elemzési eredmények a C43H39O8N3 képlet alapján: számított: C =71,16%, H=5,42%, N = 5,79%, talált: C =71,11%, H=5,29%, N = 5,76%. (e) Z-)Pyr)Glu-Tyr-Trp előállítása 100 ml metanolban feloldunk 53 g Z-Tyr(Z)-Trp-OBzl-t, majd a kapott oldatot 300 mg palládiumkorom jelenlétében katalitikus redukciónak vetjük alá 5 órán át. Ezután a katalizátort kiszűrjük, majd a szűrletből a metanolt csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékot feloldjuk 20 ml dimetfl-formamidban, majd a kapott oldathoz 3,39 g Z-(Pyr)Glu-ONB-t és 1,12 ml trietil■amint adunk. Az elegyet ezután szobahőmérsékleten 12 órán át keverjük, majd a dimetil-formamidot ledesztilláljuk. A maradékhoz 100 ml etil-acetát és 100 ml víz elegyét adjuk. A vizes fázist 1 n sósavoldattal megsavanyítjuk, majd 100 ml n-butanollal extraháljuk. Az extraktumot vízzel mossuk, majd az n-butanolt ledesztilláljuk. A maradékot éterrel eldörzsöljük, amikor is port kapunk. Ezt a port etanol és éter elegyéből újra kicsapjuk. így 4,5 g mennyiségben a 165—169 °C olvadáspontú (bomlik)cím szerinti vegyületet kapjuk. Fajlagos forgatóképesség [aj^-4,80 (c = 0,5, metanolban). Rf^O.63. Elemzési eredmények: a C33H3208N4 • H20 képlet alapján: számított: C =62,85%, H=5,43%, N = 8,89%, talált: C =62,96%, H = 5,35%, N = 8,76%. (f) (Pyr)Glu-Tyr-Trp-Ser-Tyr-(D)-Ala-Leu-Arg-Pro-NHCH2CH3 előállítása 20 ml metanolban feloldunk 184 mg Z-(Pyr)Glu-Tyr-Trp-OH-t, majd a kapott oldatot 50 mg palládiumkorom jelenlétében 3 órán át hidrogénezzük. A katalizátort ezután kiszűrjük, majd a szűrletből a metanolt csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, a maradékot pedig 2 ml dimetil-formamidban feloldjuk. Ugyanakkor 316 mg BOC-Ser-Tyr-(D)-Ala-Leu-Arg(N02)-Pro-NHCH2CH3-t 10 ml trifluor-ecetsawal kezelünk 40 percen át 0,36 ml In sósavoldat jelenlétében. Ezután a trifluor-ecetsavat ledesztilláljuk, majd a maradékot éterrel eldörzsöljük és alaposan megszárítjuk nátrium-hidroxid felett exszikkáíorban. Ezt a port és 81 mg HONB-t feloldunk az előzetesen elkészített dimetil-formamidos oldatban, majd az oldatot —2 °C-ra lehűtjük. Az oldathoz ezután 93 mg DCC-t és 0,05 ml N-etil-morfolint adunk. A kapott reakcióelegyet 0 °C-on 2 órán át, majd szobahőmérsékleten 1 éjszakán át keverjük. A képződött diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, majd a szűrlethez 50 ml étert adunk. Az ekkor képződött csapadékot kiszűrjük. Mennyisége 350 mg. Ezt a terméket 7 g szilikagélből készült oszlopon átbocsátjuk eluálószerként Rf‘ meghatározásához alkalmazott oldószerelegyet használva. A kívánt vegyületben dús frakciókat összeöntjük, majd az oldószert az elegyből ledesztilláljuk. A maradékot etil-acetáttal eldörzsöljük. A kapott termék mennyisége 270 mg. Ebből a termékből 150 mg-ot 4 ml vízmentes hidrogén-fluoriddal kezeltünk 0 °C-on 1 órán át 0,1 ml anizol és 0,1 ml 2-merkaptoetanol jelenlétében, majd a hidrogén•fluoridot csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékot nátrium-hidroxid felett exszikkátorban szárítjuk, majd 50 ml vízzel extraháljuk. Az extraktumot 1 cm átmérőjű és 5 cm hosszú, Amberlite IRA-410 (acetát formájú) gyantából készült oszlopon átbocsátjuk. Az eluátumot és a vizes mosóoldatokat elegyítjük, majd egy, 1,5 cm 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 13
