173603. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-28086 jelű antibiotikumok előállítására
11 173603 12 4,19, 4,12, 4,05, 3,95, 3,89, 3,78, 3,62, 3,59, 3,52, 3,48, 2,81, 2,73, 2,63, 2,54, 2,52, 1,99, 1,84, 1,71, 1,67, 1,64, 1,55, 1,43, 1,33, 1,18, 1,11, 0,96, 0,94, 0,90, 0,87, 0,84, 0,77, 0,74, 0,68 pprn. Az A 28 086-komplex B összetevője több szerves oldószerben, mint például metanolban, etanolban, dimetil-formamidban, dimetil-szulfoxidban, etil-acetátban, kloroformban, acetonban és benzolban oldódik, ugyanakkor nem poláros szerves oldószerekben, például hexánban csak gyengén, és vízben nem oldódik. Bár az A 28 086-komplex B összetevőjének kémiai szerkezetét nem határoztuk meg, az eddig rendelkezésre álló fizikai-kémiai adatok szerint az egy karboxilcsoportot, két ketonos kötésű oxigénatomot és egy vagy több hidroxil-csoportot tartalmaz. Az A 28 086 antibiotikum-komplex D vegyülete, ha a Streptomyces aureofaciens NRRL 5758 törzzsel állítjuk elő a komplexet, minor összetevőként van jelen. Ha a komplexet a Streptomyces aureofaciens NRRL 8092 törzzsel állítjuk elő, akkor viszont a D összetevő a mért antibiotikus aktivitás 10%-át adja. A D vegyidet, ha víz és aceton elegyéből kikristályosítjuk, fehér színű, kristályos anyag, amelynek olvadáspontja 96-98°C. Látszólagos molekulasúlya a nagy feloldású tömegspektrometriás mérés szerint: 778. A tömegspektrum csúcsa az A 28 086-komplex D összetevőjének nátriumsója esetén 800,5050-nél látszik (számítás szerint C44H73O; 1 Na = 800,5050). A D szabad sav esetén enyhe csúcs látszik 778-nál, és egy nagyobb 760,5117-nél (C44H72O10 = 760,5125). Az m/e: 760 a szabad sav tömegspektrumában a molekuláris ion vízvesztéséből adódik. Az A 28 086 D összetevője szabad sav alakjának molekula-ion összetétele így C44H7JOH. A 28 086 antibiotikum-komplex D összetevőjére a C44H74O,, tapasztalati képletet javasoljuk. Az elemanalízis a következő eredményekkel zárult: C: 67,59%, H:9,38%, 0:22,77%. Az elméleti elemösszetétel a következő (C44H74 0t ,-re számítva): C: 67,87%, H: 9,51%, O: 22,77%. Az A 28 086-komplex D komponensének infravörös abszorpciós spektrumát a 8. ábrán adjuk meg. A spektrumban a következő elnyelési maximumok látszanak: 2,89, 3,39, 3,43, 3,50, 5,88, 650, 727 , 7,60 , 7,84 , 9,00 , 9 26, 9,62, 10,31. 10,58, 11,10 és 11,49 mikron. A D összetevő 95%-os vizes etanolos oldatában vizsgáivá nem mutat elnyelési maximumot az ultraiooiya tartományban. Az A 28 096-komplex D komponensének deutero-kloroformban mért mágneses magrezonancia spektruma a következő: Ô: 6,00, 420, 4,10, 4,00, 358, 352, 3,86. 3,83, 3,79, 3.67, 3,64, 3,57, 3,54, 2,88 , 2,81, 2.71, 2,62 , 2,58 , 2,48, 2,43, 2,37 , 2,29 , 221. 2,15 . 2,10 , 2,04, 1,97, 1,89, 1,83, 1,76, 1,68, 1,61, 1,58, 1,55, .1,47, 1,39, 1,30, 1,25, 1,18, 055, O5O, 038 , 0,84, 0,74 és 0,68 ppm. Az aceton és víz elegyéből kikristályosított D vegyidet Röntgen-diffrakciós képe a következő (Cu+*-sugárzás, 1,5405 X, nikkelszűrő, d: Angströmökben megadott térközök): d Relatív intenzitás 12,40 100 1020 70 8,85 90 7,80 30 6,80 10 6,30 lOÜ 5,70 20 5,35 2C 5,10 20 45O 10 4,65 20 4,45 40 420 30 3,30 u 3.15 05 2,99 <;5 2,77 05 228 05 Az A 28 086 antibiotikum-komplex D komponensének 25°C hőmérsékleten mért fajlagos forgatása —56° (konc.: 0,1, metanolban). A D vegyidet 80%-os vizes dimetil-formamidban kivitelezett elektromeírikus titrálása szerint egy, pK, 8,67-tel jellemezhető titiálhatc csoportot tartalmaz. Az A 28 086-komplex D összetevője egy sor szerves oldószerben, például metanolban, etanolban, dimetil-formanűdban, dimetil-szulfoxidban, etil-acetátban, kloroformban, acetonban és benzolban oldódik. A vegyidet nem poláros szerves oldószerekben, például hexánban csak gyengén, vízben nem oldódik. Az A 28 086 jelű antibictikum-komplex D összetevője egy, sók és észter-származékok képzésére alkalmas savas, és legalább egy észterezhető hidroxilcsoportot tartalmaz. Az előzőekben megadott fizikai tulajdonságok alapján javaslatot teszünk az A 28 086 antibiotikum-komplex D komponensének szerkezetére vonatkozóan. Mivel a szerkezet csak javaslat, érthető, hogy csak munkahipotézis alapja lehet. Az A 28 086 antibiotikum-komplex D összetevőjének feltételezett szerkezeti képletét a II általános képleten adjuk meg. Az általános képletben R, metil- és R2 etil-, vagy Rt etil- és R2 metilcsoporíot jelent. Az A 28 086-komplex A, B és D összetevőinek különböző eluálóelegyekke! és Bacillus subtilis ATCC 6633 tesztorganizmussal meghatározott, papirkromatográfiás Rf-értékeit az 1. táblázatban adjuk meg. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
