173603. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-28086 jelű antibiotikumok előállítására
37 173603 38 egy ökör bendőjéből sebészi úton bevezetett kanüüel bendőfolyadékot veszünk. Az ökröt nagyszemű takarmánnyal etetjük. A bendőfolyadékot négyrétegű vásznon át szűrjük, a szűrletet összegyűjtjük. A szűrőágyon maradó darabos anyagot a bendőfolyadék eredeti térfogatának megfelelő mennyiségű fiziológiás pufferten szuszpendáljuk, majd ezt ismét szűrjük. A következő összetételű puffert használjuk: összetevő g/liter dinátrium-hidrogén-foszfát 0,316 kálium-dihidrogén-foszfát 0,152 nátrium-hidrogén-karbonát 2,260 kálium-klorid 0,375 nátrium-klorid 0,375 magnézium-szulfát 0,112 kálcium-kloiid-dihidrát 0,050 [Cheng és mti., J. Dairy Sei., 38, 1225-1230 (1955)]. Egyesítjük a két szűrletet, majd addig hagyjuk 5 állni, míg darabos anyag különül el a felszínen. Elkülönítjük az átlátszó réteget, 1:1 arányban a fenti összetételű pufferral hígítjuk, majd pH-ját 6,8 és 7,0 közötti értékre állítjuk be. 10 25 ml térfogatú lombikba 10 ml hígított bendőfolyadékot öntünk, majd 40 mg, az előzőekben megadott takarmánnyal, 1 mg szójabab fehérjével és a vizsgálandó vegyülettel egészítjük ki az oldatot. Kísérletként 4 párhuzamos lombikot 15 használunk. Kétszer négy darab kontroli-lombikot is indítunk. A méréseket egy nulla órás és egy inkubált, 16 órás kontrollal végezzük. Mindegyik kísérleti lombikot 16 órán át, 38°C hőmérsékleten inkubáljuk. Az. inkubáció után megmérjük a 20 pH-kat, és mindegyik lombikhoz 25% (2 ml) metafoszforsavat adunk. Ülepedni hagyjuk a mintákat, majd a propionát-, acetát-' és butirát-származékok meghatározására gázkromatográfiásán analizáljuk a felülúszókat. 25 vas(III)-szulfát-heptahidrát 0,008 Az aktív vegyületek szignifikánsan növelik a kontrollokhoz képest a propionát-termelést. mangán-szulfát-monohidrát 0,004 cink-szulfát-heptahidr át 0,004 réz-szulfát-pentafcidr át 0,002 kobalt-klorid-szeksztahidrát 0,001 30 A vizsgált vegyietekkel kapott eredményeket statisztikusan összehasonlítjuk a kontroli-eredményekkel. A 12. táblázatban megadjuk a hatóanyagot tartalmazó lombikok illékony zsírsav-kon centrációjának a kontrollokhoz viszonyított ará- 35 nyát. 12. táblázat Vegyület ppm a bendőfolyadékban A kezelt és kontroll hányadosa acetát butirát propionát teljes illékony mól% mól% mól% zsírsav (mM/í) A 28 086 A 1 0,94 0,87 1,34 1,26 A 28 086 B 1 0,97 0,96 1,15 1,29 A 28 086 A-acetil-észter 1 0,79 0,76 2,04 1,04 A 28 086 A-propionil-észter 1 0,90 0,68 1,73 1,25 A 28 086 A-butiril-észter 1 0,91 0,81 1,56 1,19 A 28 086 A-valeril■észter 1 0,92 0,79 1,55 1,18 A 28 086 A-kaproil-észter 1 0,86 0$7 1,57 0,99 19
