173561. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás p-hidroxi-fenil-acetamido-penám-3-karbonsav-származékok előállítására
5 173551 6 6. 50 mg zsírmentesített búzakorpát, 44 ml 0,1 mól-os 7,5 pH-jú káliumfoszfát puffer-oldatot és 04 ml 5 mg/ml p-acetoxiampicillinnek fenti pufferral készült oldatát elegyítjük. A biokromatográfia segítségével kapott eredmé- 5 nyékét az 1. táblázat foglalja össze. 1. táblázat p-hidroxiampicillinné való átalakulás %-ban Reakcióidő (órában) 10 Vizsgálat 1 száma 0 2 1 2 3 4 6 1. 12 23 32 64 100 91 95% 2. 11 34 45 68 120 75 77% 3. 11 32 39 45 68 75 98% 4. 8 32 55 59 80 80 77% 5. 14 34 64 109 131 104 104% 6. 16 66 66 91 98 116 86% Az optimális eredményt az 5. számú oldat esetében kaptuk. Ebben az esetben az átalakulás 2 óra alatt végbemegy, az alkalmazott enzim mennyisége ez esetben 10 mg/ml, a pH értéke: 7,0. 35 3. példa Organizmus Adagolás módja CDS0 mg/kg Staphylococcus aureus Smith intra-muszkuláris 0,2 orális 0,9 Salmonella enteritidis intramuszkuláris 5,4 orális 4,0 Klebsiella pneumoniae intramuszkuláris 7 orális 7 Staphylococcus enteritidis orális 3,5 Orális vizsgálatok eredménye A 6-D-(—)-a-amino-a-(4-hidroxi-fenil-acetamido)-2,2-dimetil-penám-3-karbonsav vérszint értékét orális adagolás után is megvizsgáltuk. A vizsgálathoz 4 egeret alkalmaztunk, a vizsgálati anyagot 30 mg/kg dózisban adtuk be. Az átlagos vérszint-érték változása a következő volt. Idő (óra) Vérszint (mcg/ml) 0,5 8,1 1,0 4,0 2,0 1,40 3,5 U A vizsgálathoz az alábbi reakcióelegyet készítjük 40 el: 50 mg zsírmentesített búzakorpát, 24 mg 6 -D - (-) <*-amino-a-(p-acetoxi-fenil-aceta mido)-2,2 -dimetil-penám-3-karbonsavat (p-acetoxiampicillin) és 5,0 ml vizet elegyítünk. Az elegyet 28°C-on rázatjuk, majd az 1. példában leírtak szerint 45 biokromatográfia segítségével 1, 2, 3 óra elteltével vizsgáljuk. A vizsgálat eredménye azt mutatja, hogy a p-acetoxiampicillin 3 óra alatt 100%-osan p-hidroxiampicillinné alakul át. A reakcióelegy pH-ja konstans 50 5,7 értéket mutat, noha puffer oldat nincs jelen. A biológiai vizsgálat eredménye A 6-D-(—)<*-amino-a-(p-hidroxi-fenil-acetamido)- 55 -2,2-dimetil-penám-3-karbonsav közepes gyógyászati dózisának (CDS0) meghatározását egereken végeztük letális dózisban beadott különféle patogén mikroorganizmusok alkalmazásával. Az ily módon kapott CDS0 értékeket az alábbi táblázat foglalja 60 össze. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás 6-D-(—)-o-amino-a-(p-hidroxi-fenü-acetamido)-2,2-dimetil-penám-3 karbonsav vagy hidrátjának előállítására, azzal jellemezve, hogy 6-D-(—)-a-amino-a-(p-ace to xi-fenil-acetamido)- 2^-dimetil-penám-3-karbonsavat 5,0-74 pH értéken, adott esetben puffer jelenlétében búzakorpa-észterázzal kezelünk, majd a kapott terméket önmagában ismert módon elkülönítjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a búzakorpa-észterázt a vizes oldat egész térfogatára számított 5—10 mg/ml koncentrációban alkalmazzuk. 3. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a búzakorpa-észterázt a vizes oldat egész térfogatára számított 10 mg/ml koncentrációban 54—6,0 közötti pH-értékű oldatban, vagy előnyösen puffer jelenlétében 7,0 pH-értékű oldatban alkalmazzuk. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 794233 - Zrínyi Nyomda 3
