173305. lajstromszámú szabadalom • Eljárás úl penámkarbonsav-származékok és ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
13 173305 14 Lactobacillus species; Corynebacterium diphteriae gravis; Corynebacterium pyogenes M; Clostridium tetani ; Pseudomonas aeruginosa species. 2. In vivo kísérletek Az alábbi 1. táblázat szemlélteti az 1. példa termékének baktériumokkal szembeni hatását fehéregérrel végzett állatkísérletben. A CFj törzsből származó fehéregereket intraperitoneálisan fertőztük mindenkor a megadott baktériumtörzzsel. I. táblázat Állatkísérletek fehéregérrel Az ED100 meghatározása 24 óra után: Kórokozó (3-laktám-antibiotikum dózis mg/testsúlykilogramm (szubkután) Escherichia coli Neum. 2x150 Klebsiella 63 2x 100 Kezelés: kétszer, 30 és 90 perccel a fertőzés után. Az ED100 az a dózis, amelynél fertőzés után 24 órával az állatok 100%-a még él. A találmány szerinti eljárást az alábbi példák szemléltetik. A következő példákban alkalmazott 6-(a-amino-fenilacetamido)-2,2-dimetil-penam-3-karbonsav mintegy 14% vizet tartalmazott, azonban ugyanilyen jól felhasználhatunk vízmentes 6-(oc-amino-fenilacetamido)-2,2-dimetil-penam-3-karbonsavat (lásd a 3 144 445 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírást) is. A példákban felhasznált 6-(a-amino-p-hidroxi-fenilacetamido)-2,2-dimetil-penam-3-karbonsav mintegy 13% vizet tartalmazott, de ugyanilyen jól vízmentes kiindulási anyagot is felhasználhatunk. A példákban felhasznált 6-[2-amino-2-(ciklohexa-l,4- -dien-1 -il)-acetamido]-2,2-dimetil-penam-3-karbonsav teljesen vízmentes volt. A kiindulási vegyületek víztartalmának a találmány szerinti eljárás végrehajtásánál nincs jelentősége. A példák során a kiindulási anyagokat a következő nevekkel jelöljük: „Ampicillin”=6-(a-amino-fenilacetamido)-2,2-dimetiI-penam-3-karbonsav; „Amoxicillin’^ 6-(a-amino-p-hidroxi-fenilacetamido)-2,2-dimetil-penam-3-karbonsav ; „Epicillin”=6-[2-amino-2-(ciklohexa-l,4-dien-l-il)-acetamido]-2,2-dimetil-penam-3- -karbonsav. A vegyületek oldalláncában D = R konfiguráció van. A találmány szerinti vegyületek NMR-spektrumait, ha mást nem adunk meg, deuterometanolban (CD3OD) vettük fel. A zárójelben levő jelek jelentése a következő: s=szingulett m=multiple« d=dublett t=triple« q=kvartett A találmány szerinti vegyületek IR-spektrumaít, ha mást nem adunk meg, paraffinolajos (nujolos) szuszpenzióban vettük fel. A példákban éteren dietilétert és szobahőmérsékleten mintegy 20 °C-ot értünk. Minden hőmérsékletet °C-ban adunk meg. A %-ban megadott kitermelések az elméleti kitermelés %-át jelentik. Nátrium-6-{D-a-[(2-oxo-3-fenil-imidazolidin-1-il)-karbonilamino]-fenilacetamido}-2,2-dimetil-penam-3- -karboxilát (VII képletű vegyület) A) 8,0 súlyrész Ampicillin-tríhidrát 80 térfogatrész 80%-os, vizes tetrahidrofuránnal készített szuszpenziójához keverés közben addig adunk trietilamint, amíg a keverék pH-ja a 8,0 értéket eléri. Jeges vízzel való hűtés közben ezután 4,4 súlyrész l-klórkarbonil-2-oxo-3- -fenil-imidazolidint adunk hozzá és trietilamin megfelelő adagolásával a pH-t 7,0—7,5 értéken tartjuk. Addig keverjük a reakcióelegyet, amíg már nem kell a pH tartásához több trietilamint beadagolni (mintegy 1/2 óra). Ekkor mintegy 100 térfogatrész vízzel felhígítjuk a reakcióelegyet. rotációs bepárlóban teljesen eltávolítjuk a tetrahidrofuránt és a vizes oldatot, miután etilacetátot rétegeztünk rá, hűtés és keverés közben 2 pH-ra megsavanyítjuk. A szerves fázist elválasztjuk, vízzel mossuk és magnézium-szulfát felett megszárítjuk. A szárítószer eltávolítása után mintegy 1 mólos éteres (mintegy 10% metanolt tartalmazó) nátrium-2-etilkapronát-oldat hozzáadásával kristályos formában kicsapjuk a nátrium-6-{D-a-[(2-oxo-3-fenil-imidazolidin-l-il)-karbonilamino]-fenilacetamido}-2,2-dimetil-penam-3-karboxilátot. Kitermelés: 10,2 súlyrész. (i-laktám-tartalom: 95%. IR-sávok (nújolban, a karbonil-tartományban): 1780, 1755, 1705, 1690, 1600, 1545 és 1520 cm '-nél. N MR jelek (deuterometanolban) t — 2,25—2,9 (m, 10 H), 4,4 (s, 1 H), 4,45—4,65 (AB, 2 H), 5,85 (s, 1 H), 6,05—6,2 (s, 4 H), 8,4 (s, 3 H) és 8,5 (s, 3 H) ppm-nél. Az elektroferogram csak egy, Bacillus subtilis, Escherichia coli és Pseudomonas aeruginosa elleni antibiotikus hatású foltot mutat. Az anyag 1,5 mól kristályvizet tartalmaz. Ezt a számított analízis eredmények kiszámításánál figyelembe vettük : Számított: C=53,3%; H = 5,0%; N== 11,9%; S = 5,5%; Talált: C=53,3%; H=5,5%; N=ll,9%; S=5,6%. B) A Vili képletű l-klórkarbonil-2-oxo-3-fenil-imidazolidint l-fenil-2-oxo-imidazolidinből és 1,1—1,3 mólekvivalens foszgénből tetrahidrofuránban, 20 °C-on mintegy 20 órai reakcióidővel kristályos csapadék formájában kaptuk. Olvadáspont: 208 °C. Számított: C = 53,5%; H=4,0%; Cl = 15,8%; N = 12,5%; Talált: C=53,4%; H=4,3%; Cl=16,l%; N= 11,8%. 1. példa 2. példa Nátrium-6-{D-a-[(2-oxo-3-fenil-imidazolidin-l-il)-karboniIamino]-p-hidroxi-fenilacetamido}-2,2-dimetilpenam-3-karboxilát (IX képletű vegyület). Ezt a penamkarbonsav-származékot az 1. példában leírt módon 2,5 súlyrész Amoxicillin-trihidrátból és 1,35 súlyrész l-klórkarbonil-2-oxo-3-fenil-imidazolidinból állítjuk elő. A megsavanyítás után a szabad penamkarbonsav egy része nem oldódik az etilacetátban és ki-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
