173132. lajstromszámú szabadalom • Adszorbciós oszlop és eljárás annak előállítására
5 173132 6 (Overhead stirrer) alkalmazása volt célszerű. Ezzel a berendezéssel teljesen egyenletes szemcseeloszlás volt elérhető. További fontos jellemzője a találmány szerinti megoldásnak a szeparáló közeg és a víz arányának betartása. Ez az arány biztosítja az egyenletes zagytérfogatot valamennyi adszorpciós oszlopban és ezzel válik lehetővé az egyenletes leválasztás betartása. A gyakorlatban a szeparáló közeg és a víz aránya 1:1,5 és 1,5:1 érték között bizonyult megfelelőnek. A találmány szerinti eljárásnak megfelelően tartósított és elkészített gélt nem szabad hűtőszekrényben tartani, minthogy alacsony hőmérsékleteken nehéz eltávolítani az esetlegesen az anyagban maradt levegőt. A bevezetőben már említettük, hogy a találmány szerinti adszorpciós oszlopok különösen jól alkalmazhatók a radioimmunológia területén, és ott is elsősorban az olyan eljárások során, amelyeknél centrifugális erőt használnak fel az anyagok keverésére, reagensek és/vagy reakciótermékek szétválasztására vagy átvitelére. Az adszorpciós oszlopokat azonban természetesen más analitikai eljárásoknál is fel lehet használni, olyanoknál is, amelyekben nem alkalmaznak centrifuges erőt felhasználó berendezéseket. Ezeknél a vizsgálatoknál azonban a találmány szerinti megoldás nem biztosít semmivel sem jobb hatást, mint az egyéb felhasználható adszorpciós oszlopok. Annak következtében, hogy a találmány szerinti adszorpciós oszlopokban alkalmazott géloszlopokat centrifugális erő hatásának tesszük ki, rendkívül fontos, hogy az alkalmazás során, az az a centrifugális erő hatására ne lépjen fel a szerkezeti víz távozása következtében előálló összetömörödés vagy töredezés. Ugyancsak nagyon fontos, hogy az egyes adszorpciós oszlopokban a folyadékáteresztés mértéke teljesen azonos legyen, és ezzel az egységes mérés az adszorpció vagy deszorpció során biztosítható legyen. Mindezeket a tulajdonságokat az adszorpciós oszlop előállítása során kell biztosítani. A találmány szerint előállított adszorpciós oszlopok a legelőnyösebben alkalmazhatók a 468 649 számú USA szabadalmi bejelentésben ismertetett eljárás és berendezés alkalmazása során. Ez a berendezés egy többmérőhelyes műszer, amelyben a reagensek és/ vagy reakciótermékek keverése, átvitele és szétválasztása centrifugális erőtér segítségével történik. A berendezésben megoldható a komponensek részleges összekeverése, szabályozható az inkubációs idő és a komponensek teljesen egyidejű szétválasztása és mérése oldható meg. Jól felhasználható a találmány szerinti adszorpciós oszlop ebben a berendezésben különböző radioimmunológiai vizsgálatokhoz, amelyek során testfolyadékokat, vérszériumot és hasonló közegeket vizsgálnak. A továbbiakban ismertetendő 1-4. példákban bemutatott adszorpciós oszlopok alkalmasak például digoxin, trijódtironon (T-3), tetrajódtironin (T-4), kortizon és hasonlók vizsgálatára. A találmány további tészleteit példák segítségével illusztráljuk. 1. példa Tartóbetéteket állítottunk elő olymódon, hogy körülbelül 1,6 mm vastag polietilén-lemezekből 7,87 — 8 mm átmérőjű tárcsádat vágtunk ki. A polietilén pórusainak nagysága 25 ± 3 p volt. A kivágott tárcsákat ezután acetonba helyeztük, és rázogattuk, hogy a zsiradékot eltávolítsuk róla. Amíg a tárcsák az acetonban voltak, a környezetben vákuumot hoztunk létre és az acetonból a tárcsákat közvetlenül a vízbe merítettük. A tárcsák átitatásakor körülbelül 1 liter vizet használtunk 500 tárcsa átitatására. A vízzel történő átitatást szintén vákuumban végeztük. Ezután a tárcsákat egy olyan tartályba helyeztük, amely részlegesen erős oxidáló közeggel volt feltöltve. Ez a közeg volt hivatva a tárcsákat hidrofób állapotából hidrofil állapotba juttatni. Az oxidáló közeg krómsav volt, amelyet úgy álítottunk elő, hogy 8-10 g káliumkromátot 35-50 ml, lágy vagy ionmentesített vízben oldottunk fel. A műveletet 1500-2000 ml-es főzőpohárban végeztük, és utána fokozatosan állandó keverés mellett 1 liter koncentrált kénsavat öntöttünk hozzá. A tárcsákat a krómsavban hagytuk egészen addig, amíg zöld színűek nem lettek. Ez általában 5-10 percenig tartott. Ezután a tárcsákat kivettük a krómsavból, és desztillált vízzel lemostuk őket egészen addig, amíg fehérek vagy krémszínűek nem lettek. A mosás is általában 5-10 percet vett igénybe. Általában a mosás akkor tekinthető befejezettnek, ha az öblítővíz és az elvezetett víz pH-értéke azonos. A tárcsák hidrofil állapotba olymódon ellenőrizhető, hogy a kiszárított tárcsákat üres adszorpciós oszlopok ba helyezzük, majd az oszlopot vízzel feltöltjük. A víznek azonnal csöpögni kell a tárcsák alatt, jelezve, hogy a hidrofób állapotból a hidrofil állapotba történő átalakulás teljesen megtörtént. Ezután a tárcsákat desztillált vagy ionmentesített víz alatt lehet tárolni. 2. példa Gélszuszpenziót állítottunk elő olymódon, hogy 40-50 gramm térhálós dextrán gélt, amelyben a szemcsék nagysága 20 és 80 p között volt, vastagfalú mércés Pyrex főzőpohárba tettünk. Ezután a gélhez desztillált vagy ionmentesített vizet adtunk hozzá. A víz mennyisége a gél súlyának mintegy 6-8-szorosa volt. A gélt és a vizet ezután addig kevertük, amíg egy homogén sűrű zagyot kaptunk. A keveréket ekkor forrásban lévő vízbe helyeztük legalább 1 órára. Ezt követően a szuszpenziót hűlni hagytuk, és a folyadékszint és a gélágy arányát körülbelül 1:0,8 értékre állítottuk be. Végül a szuszpenzió minden 1000 ml-éhez 0,1 g bakteriosztatikus közeget adtunk. 3. példa Ismét gélszuszpenziót készítettünk a 2. példában bemutatott módon. 40-50 g térhálós dextrán gélt vastagfalú, mércés Pyrex főzőpohárba helyeztünk. A gél súlyának 6-8-szorosát kitevő desztillált vagy ionmentesített vizet adtunk hozzá, és egészen addig kevertük, amíg teljesen homogén lett. A keveréket ezután egy éjszakán át állni hagytuk. Végül a folyadékszint és a gélágy arányát 1:0,8 értékre állítottuk be, és a szuszpenzió minden 100 ml-éhez 0,1 gramm bakteriosztatikus közeget adtunk. Felhasználás előtt a szuszpenziót gáztalanítottuk, hogy az esetleg bentmaradt légbuborékok eltávozzanak. 4. példa Polisztirénből állítottunk elő adszorpciós oszlopokat. Az oszlopok átmérője körülbelül 9 mm, hossza 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
