172778. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és reagens valamely szubsztrátum koncentrációjának enzimkinetikus meghatározására
17 172778 4. Táblázat folytatása 18 3. Táblázat Kinetikus glükóz-meghatározás GlucDH-val (glükóz-dehidrogenátokkal) KSCN mmól Phloretinx Mmól (/»-gátlás % 310-78-1,4 20 10 310 1,4 81 38,5-17 15-14 76 38,5 14 78 x2,4,6-trihidroxi-0-4-hidroxifenil-propiofenon 20 4. Táblázat Kinetikus húgysav-meghatározás urikázzal 25 KSCN mmól Xanthin Mmól ^-gátlás % 500-82 30-20 34 500 20 82 35 10-17-80 76 10 80 72 40 KSCN Xanthin ^gátlás mmól Mmól % 40 — 41-40 60 40 40 62 A 3. és 4. táblázatból láthatjuk, hogy mindenkor olyan mennyiségben jelenlevő inhibitor, amely legalább 60%-os gátlást okoz, a második inhibitor befolyását, amely 50%-nál kisebb gátlást okozó mennyiségben van jelen, teljesen elnyomja és csak a túlnyomó mennyiségben jelenlevő inhibitor hatása érvényesül. 4. példa Kinetikus glükóz-meghatározás glükóz-dehidrogenázzal A következő kísérleti átyagösszetételt alkalmaztuk: 0,12 mól foszfátpuffer pH= 7,6 40 mmól szulfoszalicilsav 55 mmól EDTA 150 mmól NAD 0,86 mmól — 2,59 mmól glükóz 1,8 U (egység) glükóz-dehidrogenáz 0,31 mól KSCN, illetve 1,4 nmól 2,4,6-trihidroxi-ő-4-hidroxifenil-propiofenon A mérési értékeket a következő 5. táblázat mutatja. 5. Táblázat Glükóz Inhibitor nélkül 0,31 mól KSCN 1,4 nmól phloretinx mmól AE/perc gátlási% AE/perc gátlási% AE/perc gátlási% [S] 2,59 75,4 1,72 54,0 1.29 40,6 0,86 31,1 2,59 1,72 1,29 0,86 x2,4,6-trihidroxi-ß-44iidroxifenil-propiofenon 17 77,5 62,5 17,1 10,5 80,6 45,5 15,8 8,0 80,3 30,0 26,0 4,5 85,5 24,0 22,8 16,0 78,8 10,5 80,6 7,0 82,7 5,0 83,9 9
