172604. lajstromszámú szabadalom • Eljárás L-lizin kinyerésére fermentáció útján
17 172604 18 A fenti 48 oras fermentáció során az AJ-3392 törzs 7,1 g/dl L-lizin hidrokloridot termel és a kezdeti ecetsavmennyiség 30%-a használódik fel. Ugyanakkor az 1. példa szerinti eljárásnál 1 liter fermentlé csak 56,3 g L-lizin hidrokloridot tartalmazott. 6. példa Brevibacterium lactofermentum AJ—3391, AJ-3392, AJ—3393, AJ-3394, AJ-3395 és AJ—3396 törzseket tenyésztünk a 3. példa szerinti módon, kivéve, hogy az AJ-3396 törzs táptalajához 5 mg/ml hípoxantint adunk. Fő szénforrásként etanolt alkalmazunk. 12. táblázat A termelt L-lizin A terméshozam az 5 Törzs mennyisége g/dl-ben elhasználódott glükózra vonatkoztatva, % .0 AJ—3424 4,4 44 AJ—3425 3,2 il No. 872 1,8 18 .5 8. példa A különböző törzsek által 48 órás tenyésztés Brevibacterium lactofermentum AJ—3424, során képződött L-lizin hidroklorid mennyiségeket 20 AJ—3425 és a kontroll No. 872 törzsekkel az all. táblázatban tüntettük fel. alábbi összetételű inokulumtáptalajt oltunk és 31 C°-on 18 óra hosszat keverés és levegőztetés közben inkubáljuk. Az inokulumtáptalaj összetétele 11. táblázat a következő: 25-----------------------------------------------——---------------Glükóz 1,5% Hipoxantin adalék Termelt Törzs mennyisége a L-lizin ammóniumacetát 0,3% táptalajban mg/dl g/dl--------------——-------------------------------------------- 30 karbamid 0,1% AJ—3391 5,2 KH2P04 0,1% AJ-3392 — 6,3 AJ—3393-6,5 AJ-3394-6,1 AJ-3395-5,0 AJ—3396 5 5,5 A 11. táblázatból látszik, hogy etanolra vonat koztatva 27,7% a kitermelés, azaz 6,3 g L-lizin hidroklorid keletkezik 48 órás fermentáció során, míg az 1. példa szerinti eljárásnál a Jeves”-ből 50,4 g/liter L-lizin hidroklorid volt a hozam. 7. példa A Brevibacterium lactofermentum AJ—3424 55 (FERM P—1711), AJ—3425 (FERM P-1712) és a No. 872 (kontrollként) törzseket tenyésztünk az 1. példában leírt módon, azzal az eltéréssel, hogy a táptalajban 0,2 mg/liter tiamin hidroklorid, az AJ—3425 törzs esetén ezenkívül míg 3% szójabab 60 fehérjehidrolizátum is van. A 72 órás inkubálás során képződött L-lizin (hidroklorid) mennyiségeket a 12. táblázatban tüntetjük fel. 65 MgS04 * 7H20 0,04% Fe~ 2 ppm Mn~ 2 ppm biotin 0,05 mg/liter tiamin hidroklorid 0,2 mg/liter szójabab fehérjehidrolizátum (7% összes nitrogéntartalommal) 2% pH = 7,5% Főfermentációhoz 300 ml következő összetételű táptalajt használtunk, 1 literes üvegfermentorban: glükóz 2% Ammóniumacetát 0,5% karbamid 0,2% kh2po4 0,1% MgS04 • 7H20 0,04% Fe~ 2 ppm Mn~ 2 ppm 9