172190. lajstromszámú szabadalom • Eljárás racém 5-fenil-hidantoin hidrolizisére
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 172190 Bejelentés napja: 1976. VII. 9. (SA—2945 Olaszországi elsőbbsége: 1975. VII. 10. (25252 A/75) Nemzetközi osztályozás: C 07 B 29/02 C 12 D 13/10 C 07 C 101/06 ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1978.1. 28. Megjelent: 1979. IV. 30. ^ 1 l # J Feltalálók : Degen Ludwig vegyész, Róma, Viglia Aurelio vegyész, Monterotondo, Fascetti Eugenio vegyész, Róma, Perricone Elena vegyész, Róma, Olaszország Tulajdonos: Snamprogetti S. p. A., Milánó, Olaszország Eljárás racém 5-feniI-hidantoin hidrolízisére 1 A találmány tárgya eljárás racém 5-fenil-hidantoin D-(-)-N-karbamoil-fenil glicinné történő hidrolízisére. A hidrolízishez olyan különleges mikroorganizmusok alkalmazására kerül sor, amelyek hidantoint használnak nitrogénforrásként. Néhány aminosav, mégpedig a fenilglicin és a p-hidroxi-fenilglicin fontos közbenső termék olyan vegyületek előállításánál, amelyek a gyógyszerészeti iparban széleskörben kerülnek alkalmazásra. Az elmúlt időkben számos kísérletet végeztek D-aminosavak előállítása érdekében, de egyetlen módszer se volt kivitelezhető ipari méretekben. Az optikai izomerek szétválasztására alkalmas kémiai módszerek nagyon költséges és alacsony hozamokat adnak. Ezek a módszerek kámfor-szulfonsav használatán alapulnak. Egy másik módszer abban áll, hogy D-acil-aminosavat aciláz enzimmel szelektív módon hidrolizálnak. A D-acilázok azonban viszonylag ritkák és mindig szennyezettek L-acilázzal, amely a folyamatot megnehezíti és olyan termékhez vezet, amelynek az optikai tisztasága nem éppen megfelelő. A 482 645 sz. svájci szabadalmi leírás szerint a hidantoinokat 150 C°-on autoklávozva hidrolizálják a-aminosavvá. Az enzimes hidrolízis, amely a találmány tárgya, lehetővé teszi valamely aminosav, vagy aminosav-származék egyes sztereoizomer formájának az előállítását racém vegyületből. 2 A 170 211 számú magyar szabadalmi leírásban már javasoltak egy módszert D,L-aminosavak vagy származékaik enzimes rezolválására. Ez a módszer lényegében abban áll, hogy borjúmájból kivont hidropirimidinhidrolázzal (E.C.3.5.2.2.) enzimesen hidrolizálják az (1) képletnek megfelelő racém formájú vegyületeket. A hidrolízis a reakcióvázlat szerint megy végbe. Most azt találtuk, hogy az (1) képletü racém vegyület reakcióvázlat szerinti enzimes rezolválását olyan hidrolázokkal is elvégezhetjük, amelyeket a Pseudomonas genus mikroorganizmusai szolgáltatnak. Ezeket a mikroorganizmusokat eddig még nem alkalmazták ilyen reakcióknál. A találmány szerinti eljárás abban áll, hogy a hidrolízist különböző Pseudomonas speciseekhez tartozó törzsek, előnyösen Pseudomonas sp. CBS 145.75, Pseudomonas sp. 146.75, Pseudomonas sp. ATCC 11299, Pseudomonas desmolyticum NCÍB 8859, Pseudomonas fluorescens ATCC 11250 vagy Pseudomonas putida ATCC 12633 törzsek tenyészetével, maradék sejtjeivel vagy a belőlük kinyert enzimkivonatokkal végezzük. Az 5-(D,L)-fenil-hidantoin mikroorganizmusokkal való szelektív hidrolízisét a következő módon végezzük: a baktériumtörzseket, amelyeket földből, növényekből, különböző hulladékokból és hasonlókból különítettünk el, valamint baktérium-gyűjteményekből származó törzseket ferde tenyészetből 250 ml-es edényekbe oltunk át, amelyek 50 ml-nyi, következő összetételű tápközeget tartalmaznak: 5 10 15 20 25 30 172190 1
