172178. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vacina előállítására a Marek-féle betegség ellen
7 172178 8 számú izolátorba, és megfelelő egyedi jelzéssel láttuk el őket. A 2. számú izolátor állatait 1,6 X 105 PFE/csibe virulens MB vírussal intraperitoneálisan fertőztük. A kísérlet 74 napig tartott, összegzett eredményét az 1. táblázat tartalmazza. 1. táblázat Izolátor Létszám Vírus-dózis Elhulott/ oltott MB po zitív/ol tott* 1 sz. 10 0 0/10 0/10 2 sz. 10 Ml 2000 PFE MBHV 1,6 X105 4/10 5/10 PFE 10 MBHV 1,6 X105 PFE 7/10 9/10 * MB pozitív az az állat, amelyben a kísérlet lezárását követő kórboncolás során az MB egyértelműen megállapítható volt. Az adatok X2 próbában végzett elemzése szerint a vakcinázott csoportban P = 5% szinten szignifikánsan kevesebb volt az MB előfordulása a nem vakcinázott csoporthoz képest. A második kísérletben kereskedelmi forgalomból származó 19 fehérleghom húshibrid állatot vakcináztunk, 600 PFE dózisú sejthez kötött Ml vírussal intraperitoneálisan. A 17 oltatlan kontroll állatot napos korban túlnyomásos, szűrtlevegővel ellátott izolátorba helyeztük. A fertőzést követő 20. napon a kontroll állatokat kivettük az izolátorból és a vakcinázott állatokkal együtt 1,9 X104 PFE dózisú virulens MB vírussal (MBHV) fertőztük intra-abdominálisan. Az egyedi jelzéssel ellátott állatokat közös állatszobában helyeztük el. A kísérlet 2 hónapig tartott, összegzett eredményét a 2. táblázatban foglaltuk össze. 2. táblázat Csoport Létszám Vírus-dózis Elhullott/oltott MB pozitív/oltott* Vakcinázott 19 Ml 600 PFE 2/19 4/19 Nem vakcinázott 17 MBHV 1,9 X104 PFE MBHV 1,9 X104 PFE 5/17 9/17 * Magyarázat az 1. táblázat alatt. Az adatok X2 próbával végzett elemzése szerint a vakcinázott csoportban P = l% szinten szignifikánsan kevesebb állat betegedett meg a vakcinázott csoportban a nem vakcinázott csoporthoz képest. 5 A két laboratóriumi kísérletben a vakcinázást követően rendkívül virulens MBHV törzzsel fertőztük az állatokat mesterséges úton. Természetes körülmények között az állatok ilyen súlyos fertőződést nem kaphat- 10 nak. Az általunk izolált Ml jelzésű törzs sejthez kötött formában ilyen körülmények között is kielégítő védelmet biztosított a Marek-féle betegség ellen. , Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás élő legyengítetlen Ml tyúkherpesz vírus törzset tartalmazó sejthez kötött fagyasztott vagy sejt- 20 mentes és kívánt esetben fagyasztott vagy liofilizált sejtmentes vírusvakcina előállítására, azzal jellemezve, hogy az Országos Közegészségügyi Intézetben 00 130 MNB szám alatt letétbe helyezett Ml jelzésű tyúkherpesz vírus törzzsel csirkeveséből, csirkeembrió-fibroblasztbór 25 vagy kacsaembrió-fibroblasztból származó szövettenyészetet beoltunk, a beoltott tenyészetet inkubáljuk, majd a sejteket elkülönítjük az inkubált tenyészetből és friss tenyészetre helyezzük, és így sorozatos sejttenyésztést végzünk, majd 30 a) élő, legyengítetlen, sejthez kötött fagyasztott vírusvakcina előállítása esetén az utolsó sejttenyészetben a sejteket tripszinnel kezeljük, majd a sejteket elválasztjuk a tripszintől és dimetilszulfoxidot vagy glicerint tartal-35 mazó tenyésztési közegben szuszpendáljuk és fagyasztjuk, vagy b) élő, legyengítetlen, sejtmentes vírusvakcina előállítása esetén az utolsó sejttenyészetben a sejteket trip-40 színnel kezeljük, ezután a sejteket a tripszintől elválasztjuk, elroncsoljuk, az elroncsolt sejteket eltávolítjuk, majd kívánt esetben a kapott vakcinát fagyasztva szárítjuk vagy fagyasztjuk. 45 2. Az 1. igénypont bármelyik változata szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a tripszines kezelést tripszint és etiléndiamintetraecetsav-dinátriumsót tartalmazó fiziológiás konyhasóoldattal végezzük. ______A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó ig«»gatAja t 79.6707.66-42 Alföldi Nyomda, Debrecen — Felelős vezető: Benkő István igazgató 4
