171452. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és készülék folyadékok, különösen vér, hormonkoncentrációjának meghatározására radioaktív úton megjelölt anyagok alkalmazásával
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 171452 • Bejelentés napja: 1974. V. 06. (HO-1673) Német Szövetségi Köztársaság-beli elsőbbsége: 1973. V. 30. (P 23 27 576.5) Közzététel napja: 1977. VIII. 27. Megjelent: 1978. VII. 31. Nemzetközi osztályozás: G01N 33/16 -JA Wmffir • Bejelentés napja: 1974. V. 06. (HO-1673) Német Szövetségi Köztársaság-beli elsőbbsége: 1973. V. 30. (P 23 27 576.5) Közzététel napja: 1977. VIII. 27. Megjelent: 1978. VII. 31. I ORSZÁGOS ALÁLMÁNY HIVATAL I • Bejelentés napja: 1974. V. 06. (HO-1673) Német Szövetségi Köztársaság-beli elsőbbsége: 1973. V. 30. (P 23 27 576.5) Közzététel napja: 1977. VIII. 27. Megjelent: 1978. VII. 31. Feltalálók: dr. Paschalis Stratos vegyész, Frankfurt/Main, dr. Kern Rudolf vegyész, Mainz, dr. Mück Karl-Friedrich vegyész, Wiesbaden, Német Szövetségi Köztársaság Tulajdonos: Hoechst Aktiengesellschaft, Frankfurt/Main, Német Szövetségi Köztársaság Eljárás és készülék folyadékok, különösen vér, hormonkoncentrációjának meghatározására radioaktív úton megjelölt anyagok alkalmazásával A találmány tárgya eljárás és készülék folyadékok, különösen vér, hormonkoncentrációjának meghatározására radioaktív úton megjelölt vegyületek alkalmazásával. A test bizonyos mirigyeiben szintetizált és a 5 véráramba jutó hormonok igen kis koncentrációban vannak jelen a vérben. Mennyiségük pontos meghatározása csak a radioaktív úton megjelölt indikátorok alkalmazásával vált lehetővé. A vizsgált hormon vegyi természetétől függően 10 kétféle analizálási eljárást különböztetünk meg. Ha hormon immunogén jellegű, azaz alkalmas antitestek létrehozására, a kimutatás módszere az ún. radioimmunoassay. Ha a hormon nem immunogén jellegű, az ún. kompetitív protein-kötés analízist 15 alkalmazzák. Mindkét módszerre jellemző, hogy a hormon meghatározott részét ioncserélő anyag segítségével vagy más alkalmas módon el kell távolítani a reakcióoldatból. Az ismert radioimmunokémiai módszereknél pél- 20 dául ismert mennyiségű, radioaktív úton megjelölt, illetve meg nem jelölt hormonból álló keveréket komplexvegyület képzése mellett speciális antitesttel reagáltatnak. A megjelöléshez valamely alkalmas izotópot (például 125 J, 131 J, I4 C, 3 H) 25 használnak. Az antitest és a hormon között reakcióegyensúly áll be, mikoris kis mennyiségű hormon kötetlen formában van jelen. Ennek a szabad résznek a mennyisége egyenesen arányos a keverékben levő hormon összmennyiségével. Ezt a sza- 30 bad részt valamely alkalmas adszorbens segítségével eltávolítják és meghatározzák a mennyiségét. Ennek alapján etalongörbét rajzolnak fel, amely lehetővé teszi ismeretlen összetételű keverék hormontartalmának meghatározását. Az ugyancsak ismert kompetitív protein-kötés analízis azon alapul, hogy a hormonokat, különösen a kis molekulasúlyúakat, a vérben bizonyos speciális proteinek kötik meg és szállítják. Ezt a szerepet a két pajzsmirigyhormonnál, a tiroxinnál és a trijódtironinnál egy a-globulin, az ún. „Thyroxine-Binding-Globulin" (TBG) tölti be. Az ilyen proteinek, hasonlóképpen, mint a radioimmunokémiai módszereknél az antitestek, primer komplexképzőként alkalmazhatók a megfelelő hormonnál. Ennél a módszernél is úgy járnak el, hogy az oldatban levő hormon szabad részét elkülönítik és meghatározzák a mennyiségét. Ennek az eljárásnak egy változata szérumokban levő hordozóproteinek kapacitásának meghatározása. A szérumot, amelyben az adott hormonhoz tartozó protein kapacitását meg kell határozni, kis mennyiségű, radioaktív úton megjelölt hormonnal keverik. A hordozóprotein és a megjelölt hormon között reakció megy végbe, amelynek során a megjelölt hormon részben helyettesíti a kötött inaktív hormont, részben maga közvetlenül kötődik. A nem kötött részt adszorpció útján eltávolítják az oldatból és meghatározzák a mennyiségét. 171452