171217. lajstromszámú szabadalom • Eljárás amiláz-inhibitor előállítására

11 171217 12 Az embereken végzett keményítő-táplálási kísérletek során meghatároztuk a szérum átlagos inzulintartalmát is fJ.E/ml egységekben kifejezve, a II. táblázat szerintivel azonos időpontokban. Az inzulin-meghatározásokat radio-immunológiai módszerrel végeztük vénás vér szérumában, Hales és Randié [Biochem. J. 88, 137 (1963)] kettős antitest-módszere szerint. Az ennek során kapott eredményeket a III. táblázatban foglaltuk össze. A találmány szerint előállított amiláz-inhibitor hatóanyagnak, valamint az SE 50/13 törzs felhasználásával lefolytatott fermentáció termékeként kapott fermentlében jelen levő szennyező színezékeknek aktívszénen való adszorpcióját az 1. ábra szemlélteti. Az ábrán az 1. és 2. görbe azt mutatja, hogy a fermentlé különböző pH-értékeken a vízszintes tengelyen g-ban megadott mennyiségű aktívszénnel történt kezelés után mennyi amiláz-inhibitor aktivitást tartalmazott, a jobboldali függőleges tengelyen megadott AIE/fil egységekben kifejezve. Az 1. görbe a 2,1 pH-értéken, a 2. görbe pedig a 6,5 pH-értéken lefolytatott aktívszenes kezelés eredményét szemlélteti. A 3. és 4. görbe az ugyanilyen körülmények között lefolytatott aktívszenes kezelés után a fermentleben visszamaradt színezékek mennyiségét szemlélteti, az 550 nm hullámhosszon mért extinkció-értékek alapján; a 3. görbe a 6,5 pH-értéken, a 4. görbe pedig a 2,1 pH-értéken történt adszorpció eredményére vonatkozik. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás amiláz-inhibitor előállítására, azzal jellemezve, hogy az Actinomycetales-rendbe tartozó SE 50 Actinoplanacea-törzs egy variánsát, a Centraalburean voor Schimmelcultures (Baarn, Hollandia) intézetnél CBS 614.71 nyilvántartási szám alatt letétbehelyezett SE 50/13 törzset valamely szénforrást és nitrogénforrást, valamint egyéb szokásos adalékokat tartalmazó táp-5 közegben tenyésztjük és a fermentáció során képződött inhibitor-hatású anyagot a fermentléből elkülönítjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy 2%-ot meghaladó, előnyösen 10 4—6% keményítőtartalmú tápközeget alkalmazunk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a fermentlé feldolgozása során a szennyező színezékeket savas pH-tartományban, előnyösen 1—3 pH-értéken aktívszénen szelektíven adszorbeáltatjuk. 15 20 25 30 4. Eljárás az amiláz-inhibitornak az előző igénypontok bármelyike szerint történő előállítására alkalmas SE 50/13 Actinoplanacea-törzs kitenyésztésére, azzal jellemezve, hogy a Centraalbureau voor Schimmelcultures (Baarn, Hollandia) intézetnél CBS 961,70 nyilvántartási szám alatt letétbe helyezett SE 50 Actinoplanatörzs kultúráját adott esetben mutagen behatásokkal ismert módon történő kezelés után, valamely szénforrást és nitrogén forrást, valamint egyéb szokásos adalékokat tartalmazó ágár-táptalajon eloszlatjuk és több napig, előnyösen 28 °C hőmérsékleten inkubáljuk, majd a kapott kolóniák amiláz-inhibitor termelő képességének vizsgálata alapján kiválasztott legjobb termelő kolóniákkal a fenti szelekciós eljárást legalább egyszer megismételjük. 1 db rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 78.5766.66-42 Alföldi Nyomda, Debrecen — Felelős vezető: Benkő István igazgató