171136. lajstromszámú szabadalom • Eljárás alfa-metil-3,4-dihidroxi-fenil-alanin-származékok előállítására
33 171136 34 végül 14 órán át 5-10C°-on szántjuk. Az oldhatatlan, nyers tartarát-sót kiszűrjük, majd a fenti átkristályosítási műveletet addig ismételjük, amíg lényegében állandó olvadáspontú és optikai forgatóképességű terméket nem kapunk. így a 3-( 3,4-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin-szukcinimidometilészter másik optikai antipódjának tartarát-sóját kapjuk. Az optikailag aktív tartarát-sókat a következőképpen alakítjuk át optikailag aktív hidrokloridokká: Az L-3-(3> 4-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin-szukcinimidometilészter tartarát-sóját 50 ml 1:9 térfogatarányú etanol-etilacetát elegy és 10 ml telített vizes nátriumkarbonát-oldat keverékével összerázzuk. Az elegyet szűrjük, a szűrletet vízmentes magnéziumszulfát fölött szárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és a szűrletet csökkentett nyomáson betöményítjük. A maradékot 25 ml abszolút etanolban oldjuk, az oldathoz 5 ml vízmentes 9,6 n etanolos sósavoldatot adunk, és az elegyet csökkentett nyomáson betöményítjük. 1^3-(3,4--Dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin-szukcinimidometilészter-hidroklorid-hidrátot kapunk. A termék vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat (adszorbens: fluoreszcens szilikagél-lemez, futtatószer: 3 :7 térfogatarányú metanol-benzol elegy) alapján egységes, R, = 0,5. 25. példa A) 1^3-(3,4-Dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin-a-szukcinimidoetilészter-hidroklorid-dihidrát (/3-izomer) előállítása frakcionált kristályosítással 10 g, a 2. példa szerint előállított L-3-(3,4-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin-a- szukcinimidoetilészter-hidrokloridot (a ß)-izomerelegy) 50 ml meleg, 95%-os etanolban oldunk, az oldatot zavarosodás fellépéséig vízmentes éterrel hígítjuk, majd beoltjuk, és a lombik falának kapargatásával beindítjuk a kristályosodást. Az elegyet 12 órán át 5-10C°-on tartjuk, majd a civált szilárd anyagot leszűrjük és 70 C°-on szárítjuk. 95%-os etanol— etüéter elegyből végzett hasonló átkristályosítási lépések után 123-126 C°-on bomlás közben olvadó terméket kapunk. 95%-os etanolból végzett végső átkristályosítás után 129-131 C°-on bomlás közben olvadó L-3-(3,4-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin-a-szukcinimidoetilészter-hidroklorid-dihidrátot (|3-izomer) kapunk (a terméket éjszakán át 70 C°-on szárítottuk). A termék vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat (adszorbens: fluoreszcens szilikagél-lemez, futtatószer: 1 : 1 térfogatarányú metanol-benzol elegy) alapjás egységes, Rf = 0,7. B) L-3-(3,4-Dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin-a-szukcinimidoetilészter-hidrokloridhidrát (a-izomer) előállítása A ß-izomer első átkristályosítási műveletében kapott, a-izomerben dús anyalúgot 40-45 C /15-20Hgmm nyomáson betöményítjük. A maradékot 20 ml meleg 95%-os etanolban oldjuk, az oldatot zavarosodás fellépéséig etilacetáttal hígítjuk, majd beoltjuk, és a lombik falának kapargatásával megindítjuk az a-izomer kristályosodását. A terméket 95%-os etanolban oldjuk, és 5 etilacetáttal ismét kicsapjuk. Az L-3-(3,4-dihidroxi- f e n i 1) - 2 -metil-alanin-a-szukcinimidoetilészter-hidroklorid-hidrátot etilacetátos szolvát formájában kapjuk. Rf = 0,7 (fluoreszcens szilikagél-vékonyrétegen 1 : 1 térfogatarányú metanol-benzol eleggyel fut-10 tátva). 26. példa 15 L-3-(3,4-Dihidroxi-feniT)-2-metil-alanin-pivaloiloximetilészter-hidroklorid előállítása 0,95 g (4,0 mmól) L-3-(3,4-dihidroxi-fenil)-2-me-20 til-alanin-szeszkvihidrát és 0,61 g (4,06 mmól) pivaloiloximetilklorid 5 ml dimetilszulfoxiddal készített oldatát 23 órán át 20-25 C°-on keverjük. Az oldatot 10 ml desztillált vízzel hígítjuk, majd 5 g gyengén bázikus anioncserélő gyantával (hidroxil-25 -ciklus) töltött oszlopon bocsátjuk át. A gyantaoszlopot vízzel eluáljuk. A pozitív vas(III)-klorid próbát adó frakciókat egyesítjük, és 3 g gyengén savas kationcserélő gyantával (hidrogén-ciklus) töltött oszlopon bocsátjuk át. A reagálatlan 30 I^3-(3,4-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanint desztillált vízzel eluáljuk, majd, amikor a frakciók már nem adnak pozitív vas(III)-klorid próbát, az eluálást 1 n ecetsav-oldattal folytatjuk. Az észter-frakciót (50 ml, pH = 3,2) 1 n sósavoldattal pH = 2,0 értékre 35 savanyítjuk, majd 20 órán át 0,1—0,3Hgmm nyomáson liofilizáljuk. Az L-3-(3,4-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin-pivaloiloximetilésztert ecetsavas szolvátja formájában kapjuk. Op.: 95—105 C° (bomlás). Elemzés a Ci6 H 23 N0 6 • HCl-i1/3 C2H 4 0 2 kép-40 let alapján: számított: C =52,11%, H = 6,69%, N = 3,58%, talált: C =52,11%, H =6,49%, 45 N = 3,73%. 27. példa 50 L-3-(3,4-Dihidroxi-fenil)-2-metil-alanin-a-szukcinimidoetilészter-hidroklorid előállítása 0,95 g (4,0 mmól) L-3-(3,4-dihidroxi-fenil)-2-me-55 til-alanin-szeszkvihidrát és 0,65 g (4,0 mmól) N-(a-klór-etil)-szukcinimid 5 ml dimetilszulfoxiddal készített oldatát 23 órán át 20-25 C°-on keverjük. Az oldatot 10 ml desztillált vízzel hígítjuk, majd 5 g gyengén bázikus anioncserélő gyantával (hidr-60 oxil-ciklus) töltött oszlopon bocsátjuk át. A gyantaoszlopot vízzel eluáljuk, a pozitív vas(III)-klorid próbát adó frakciókat egyesítjük, és 3g gyengén savas kationcserélő gyantával (hidrogén-ciklus) töltött oszlopon bocsátjuk át. A reagálatlan 65 L-3-(3,4-dihidroxi-fenil)-2-metil-alanint desztillált 17
