170786. lajstromszámú szabadalom • Eljárás MM-13902 antibiotikum-sók előállítására
170786 29 30 A 15. példa szerint kapott termék az elemi analízis alapján feltehetően 2:2:2 arányban tartalmaz nitrogént, ként és nátriumot. Az MM 13902 antibiotikum dinátriumsójának cirkuláris dikroizmus-görbéjét Cary 61 kiíró spektropolariméteren vettük fel. A meghatározáshoz 0,37 mg/ml koncentrációjú oldatot használtunk fel, a fény úthosszát 1 cm-re állítottuk be. A pozitív és negatív maximumokat az alábbiakban közöljük: X (nm) 186 221 286 323 zlE/m + 67,24 X 10"4 —67,24 X 10"4 — 3,3 X10"4 — 8,2 X 10"4 Az MM 13902 antibiotikum dinátriumsójához változó mennyiségben ampicillint kevertünk, és tápagaron, sorozathígítási módszerrel meghatároztuk a keverékek antibakteriális aktivitását. Az észlelt minimális gátló koncentráció-értékeket all. táblázatban soroljuk fel. 11. táblázat Mikroorganizmus Ampicillin MGK-értéke Ampicillin és 0,01 0,05 0,2 (xg/ml MM 13902-Na2 MGK-értéke MM 13902--Na2 MGK-értéke Proteus mirabilis C889 500 31 1—2 — 0,2 Staphylococcus H. Russell 500 62 8,0 0,5 0,8 A táblázat adataiból megállapítható, hogy az MM 13902 antibiotikum dinátriumsója szinergetikusan fokozza az ampicillin antibakteriális aktivitását. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az (I) képletű MM 13902 antibiotikum szervetlen bázisokkal képezett mono- és di-sóinak előállítására, ahol a tiszta dinátriumsó a következő jellemző sajátságokkal rendelkezik: (i) a só vízben igen jól oldódik, metanolban oldható, kloroformban, dietiléterben és szénhidrogénekben azonban lényegében oldhatatlan; (ii) a só vizes oldatban felvett ultraibolya abszorpciós, spektrumában körülbelül 305 és 225 nm hullámhossz-értéknél jellegzetes abszorpciós maximum észlelhető; (iii) a só frissen készített káliurnbromid-pasztillában 0,4 súly% sókoncentráció mellett felvett infravörös abszorpciós spektruma lényegében a 2. ábrán bemutatottnak felel meg, és a spektrumban körülbelül 3450, 2950, 1750, 1620, 1510, 1400 és 1260 cm'1 hullámszám-értéknéljellegzetes abszorpciós maximum észlelhető; (iv) a só deutériumoxidban felvett NMR-spektruma lényegében a 3. ábrán bemutatottnak felel meg, és a spektrumban a következő jellemző sávok észlelhetők: (a) körülbelül 2,85 és 4,00 T centrummal két dublett 5 (csatolási állandó: körülbelül 14 Hz), (b) körülbelül 8,55 T centrummal egy dublett, és (c) körülbelül 8,00 x kémiai eltolódásnál egy éles szingulett; (v) a só cellulóz-vékonyrétegen, különböző oldószerrendszerek felhasználásával meghatározott körülbelüli 10 Rf -értékei a következők: (a) R f = 0,72 (7:7:6 térfogatarányú n-butanol: izopropanol: vízeleggyel futtatva), (b) Rf = 0,85 (7:3 térfogatarányú izopropanol: vízeleggyel futtatva), (c) Rf = 0,81 {1:1:6 térfogatarányú n-butanol: etanol: vízeleggyel futtatva), és (d) Rf = 0,75 15 (4:1 arányú n-propanol: vízeleggyel futtatva); (vi) a sónak az Escherichia coli B 11 törzs által termelt ß-laktamazzal szembeni I50-értéke 0,001 [/.g/ml és 0,0001 (Jtg/ml közé esik; és (vii) a só 6-(D[—]-a-amino-fenilacetamido)-penicillán-20 savval együtt adagolva szinergetikusan fokozza ez utóbbi vegyület különféle mikroorganizmusokkal, köztük a Proteus mirabilis és Staphylococcus aureus Russell törzsekkel szembeni aktivitását, azzal jellemezve, hogy az MM 4550 jelű komplex termék oldatából kromatográ-25 fiás úton elkülönítjük az MM 13902 antibiotikum sóját tartalmazó oldatfrakciót, majd e frakcióból elkülönítjük az MM 13902 antibiotikum sóját. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a kromatografálás során po-30 láros hordozóanyagot, valamint semleges vagy közel semleges pH-értékre pufferolt vizes elektrolit-oldatot használunk fel. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a kromatografálás 35 során tercier amino- vagy kvaterner ammónium-csoportokat tartalmazó hordozóanyagot, valamint pH = 7 értékre pufferolt vizes nátriumklorid-oldatot használunk fel. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási 40 módja, azzal jellemezve, hogy a kromatografálás során közömbös hordozóanyagot, valamint vizet és rövidszénláncú alkanolt tartalmazó oldószer-elegyet használunk fel. 5. Az 1. vagy 4. igénypont szerinti eljárás foganato-45 sítási módja, azzal jellemezve, hogy a kromatografálás során hordozóanyagként szilikagélt vagy cellulózt, oldószer-rendszerként pedig víz és izopropanol elegyét használjuk fel. 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás továbbfejlesztése 50 gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy az MM 13902 antibiotikum valamely, az 1. igénypontban definiált sóját gyógyszerészeti hígító-, hordozóés/vagy segédanyagokkal, és adott esetben valamely egyéb biológiailag aktív anyaggal, célszerűen 6-(D[—]-55 -a-amino-fenilacetamido)-penicillánsavval keverjük öszsze. 4 db rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 78.5455.66-42 Alföldi Nyomda, Debrecen — Felelős vezető: Benkő István igazgató 15
