170725. lajstromszámú szabadalom • Eljárás alfa-L- aszparagil- L-fenilalanin alkilészterek előállítására
170725 10 a-L-aszparagil-L-fenilalaninra számítva (TLC-vel meghatározva) a következők: Termék % a-L-aszparagil-L-fenilalanin-metilészter 40—45 a-L-aszparagil-L-fenilalanin (reagálatlan) 20—25 aszparaginsavészter 15—20 diészter 15—20 11. példa Hőmérővel, keverővel és kondenzátorral felszerelt megfelelő reakcióedénybe beviszünk 111,5 g (0,4 mól) a-L-aszparagin-L-fenilalanint, majd 500 ml metanolt és 132,5 ml 3,42 n sósavat adunk hozzá. A reakcióelegyet keverés közben 2 óra hosszat 30 Cc -on melegítjük, utána 25 C°-ra lehűtjük és hozzáadunk 9,5 ml (0,12 mól) 50%-os nátriumhidroxid-oldatot 15 perc leforgása alatt. Ezután a keverést jeges fürdőben 1 óra hosszat folytatjuk és a reagálatlan a-L-aszparagil-L-fenilalanint szűréssel elkülönítjük. Az elkülönített a-L-aszparagil-L-fenilalanint 50—50 ml jéghideg metanollal kétszer mossuk, majd vákuumban szárítjuk. Ily módon 25 g oc-L-aszparagil-L-fenilalanint kapunk (körülbelül 90%-os tisztaságú). A szűrletből 575 ml metanolt visszanyerünk desztillációval. A maradékhoz hozzáadunk 225 ml vizet és 41,5 ml 37%-os (0,49 mól) sósavat és az elegyet 2 óra hosszat 0—5 C°-on keverjük. A szilárd a-L-aszparagil-L-fenilalanin-metilészter-hidrokloridsót szűréssel elkülönítjük és 610 ml vízben 50 C°-on újra feloldjuk. A kapott oldat pH-ját 17,45 g (0,22 mól) 50%-os nátriumhidroxid-oldattal 4,0—4,5 értékre állítjuk be és 2 óra hosszat 5 C°on keverjük. Az oc-L-aszparagil-L-fenilalanin-metilésztert szűréssel elválasztjuk és 0—5 C°-os vízzel mossuk, a mosást 30 ml vízzel ötször ismételjük meg. Az a-L-aszparagil-L-fenilalanin-metilésztert vákuumban szárítjuk. Ily módon 33,65 g terméket kapunk, amely 98%osnál nagyobb tisztaságú (TLC-vel meghatározva). 12. példa a-L-aszparagil-L-fenilalanin-metilészter 22,3 g a-L-aszparagil-L-fenilalanin, 24,3 ml 3,76 n metanolos sósav és 25 ml metanol oldatát 30 C°-on 1,5 óra hosszat keverjük. Az észterezési reakció befejezése után 2,85 g 50%-os nátriumhidroxid-oldatot adunk 12 perc alatt cseppenként az elegyhez a reagálatlan a-L-aszparagil-L-fenilalanin kicsapása végett. Ezután a reakcióelegyet 45 percig szobahőmérsékleten keverjük. A kristályos a-L-aszparagil-L-fenilalanint szűréssel elkülönítjük. Az a-L-aszparagil-L-fenilalanint kétszer 5 mossuk 10—10 ml metanollal és utána szárítjuk, ily módon 6,5 g a-L-aszparagil-L-fenilalanint kapunk (amely körülbelül 90%-os tisztaságú TLC-vel meghatározva). A szűrletet és a mosófolyadékot visszavisszük a reakcióedénybe és a metanolt vákuumdesztillációval kinyer-10 jük. A desztilláció utáni maradékhoz hozzáadunk 45 ml vizet és 8,3 ml 37%-os sósavat. A reakciómasszát 0— 5 C°-on 1,5 óra hosszat keverjük és a szilárd a-L-aszparagil-L-fenilalanin-metilészter-hidrokloridsót szűréssel elkülönítjük. 15 Az elkülönített anyagot 120 ml 50 C°-os vízben oldjuk és a keletkező oldat pH-ját 3,2 g 50%-os nátriumhidroxid-oldattal 4,5-re állítjuk. Az elegyet ezután 1,5 órán át 0—5 C°-on keverjük és a kivált a-L-aszparagil-L-fenilalanin-metilésztert szűréssel elválasztjuk, ötször 20 mossuk 6—6 ml 0—5 C°-on vízzel, utána pedig szárítjuk. Ily módon 6,7 g a-L-aszparagil-L-fenilalanin-metilésztert kapunk, amely 98%-os tisztaságú vagy tisztább (TLC-vel meghatározva). Az előzőekben leírt megoldások csupán a találmány 25 szerinti eljárás bemutatására szolgálnak, de más módszerek is kivitelezhetők anélkül, hogy a találmány oltalmi körét túlhaladnánk. Ennek megfelelően a találmány szerinti eljárás nem korlátozódik kizárólag a példákban leírt módszerekre. 30 Szabadalmi igénypontok 35 1. Eljárás a-L-aszparagil-L-fenilalanin-(l—3 szénatomos)-monoalkilészterek előállítására egy aszparaginsavszármazék és fenilalanin reakciójával, azzal jellemezve, hogy valamely N-védett-L-aszparaginsavanhidridet L-fenilalaninnal reagáltatunk, a kapott N-védett-40 -a-L-aszparagil-L-fenilalaninról a védőcsoportot önmagában ismert módon, előnyösen savas hidrolízissel eltávolítjuk és a keletkező a-L-aszparagil-L-fenilalanint valamely 1—3 szénatomos alkanollal észterezzük, majd a kapott a-L-aszparagil-L-fenilalanin-alkilésztert ismert 45 módon, szabad alakjában vagy sójaként kinyerjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy N-védett-L-aszparaginsavanhidridként N-formil-L-aszparaginsavanhidridet használunk. 50 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy alkanolként metanolt használunk. 2 lap rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 77.5449.66-42 Alföldi Nyomda, Debrecen — Felelős vezető: Benkő István igazgató 5
