170668. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antibakteriális hatású 7-[D- alfa-amino- alfa-(p-hidroxifenil)-acetamido]- 3-(1,2,3-triazol- 5- iltiometil)- 3-cefem-4-karbonsav-szeszkvihidrát előállítására

15 170668 16 összetétel 1 adagra 15 adagra Steril, porlasztott 7-[D-a-0,275 g 4,125 g -amino-a-íp-hidroxifenü)(egyenértékű -acetamido-3-(l ,2,3-triazol - 250 mg -5-iltiometil)-3-cefem-4-BL—S640 -karbonsav-szeszkvihidrát aktivitással) Lecitin 0,002 0,030 Metilparabén 0,0009 0,0135 Propilparabén 0,0001 0,0015 Polivinilpirrolidon (Povidon) 0,005 0,075 Nátriumklorid 0,002 0,030 Tween 80 0,001 0,015 A felhasználandó BL—S640 szeszkvihidrátnak sterilnek, pirogénmentesnek kell lennie és az egész folyamat alatt aszeptikus körülmények között kell kezelni. Intramuszkuláris BL—S640 szeszkvihidrát (porlasztott) (Szükséges mennyiség 250 mg/ml BL—S640) aktivitást: BL—S640 szeszkvihidrát aktivitása 1. A BL—S640 szeszkvihidrátnak sterilnek, pirogénmentesnek kell lennie és az egész folyamat alatt aszeptikus körülmények között kell kezelni. 2. A BL—S640 szeszkvihidrátot sterilen kell porlasztani egy steril porlasztóban. 3. A steril, porlasztott BL—S640 szeszkvihidrátot és a steril nátriumkloridot egy steril Patterson Kelly V keverőbe adagoljuk, amely folyadékadagolásra szolgáló erősítő szabályozóval van felszerelve. A keverőt sterilizáljuk oly módon, hogy perecetsawal bepermetezzük és 16 óra hosszat etilénoxidgáz hatásának tesszük ki. Vigyáznunk kell arra, hogy a keverőben ne menjen végbe a gázok kondenzálása. A kondenzálást elkerülhetjük, ha szobahőmérsékleten dolgozunk. A keverőt 30 percig erőteljesen működtetjük annak érdekében, hogy biztosítsuk az anyag alapos összekeverését. 4. A lecitint, metil- és propilparabént, Tween-80-t és a Povidon-t olyan mennyiségű metilénkloridban oldjuk, amely megközelítően a szükséges BL—S640 szeszkvihidrát egyötödének (1/5) felel meg. 5. Aszeptikus körülmények között a 4. lépésből származó oldatot megnövelt nyomáson egy steril 0,22 mikronos Millipore szűrőn keresztül valamely, steril környezetben levő, megfelelő tartályba vezetjük. 6. A keverő „folyadékadagoló készülékét" használjuk az 5. lépésből származó steril, pirogénmentes metilénkloridos oldat szükséges mennyiségének öt egyenlő adagban való bevitelére. Az egyes adagok bevitele után az erősítő szabályozót alkalmazzuk legfeljebb két percig és 4 „keverési" szakaszt iktatunk be minden egyes oldatadagoláshoz szükséges tizenöt perces keverési idő alatt. Az egyes keverések befejezésekor a keverések idején kialakult túlnyomást meg kell szüntetni (a túlnyomást a keverőkészülék oldalfalán elhelyezett mérővel mérhetjük) és a metilénklorid gőzök eltávolítására vákuumot alkalmazunk. Ezt a műveletet a gőzök teljes eltávolítása érdekében meg kell ismételni. A gőzök eltávolításának az elősegítésére azokat 45 °C-ra melegítjük oly módon, hogy meleg vizet keringtetünk a keverő falában. 7. Abban az esetben, ha az összes oldatot bevittük és a keverőből eltávolítottuk a gőzöket, az anyagot kiveszszük a keverőből és szárításhoz továbbítjuk. Az anyagot fedett tálcákra tesszük és meleg levegőben hat óra hosz-10 15 20 30 35 40 45 50 55 60 65 szat szárítjuk, közben ügyelünk arra, hogy a szárító levegő az 54 °C-ot ne lépje túl. Hat óra hosszáig tartó melegítés után a melegítést megszüntetjük és 10 óra hosszat levegőt keringtetünk a tálcák felett a teljes szárítás biztosítására. 8. A bevont anyagot újra porítjuk a 2. lépésben megadott körülmények között oly módon, hogy egy 200 mesh lyukbőségű szitán legfeljebb 0,1% maradjon vissza. 9. Az anyagot steril tartókba visszük mint végterméket felhasználásra. 10. A bevont BL—S640 szeszkvihidrát teljes mennyiségét aszeptikus körülmények között megszabott méretű szilíciumbevonatú ampullákba töltjük. 5. példa 7-[D-a-amino-a-(p-hidroxifenil)acetamido]-3-(l,2,3-triazol-5-iltiometil)-3-cefem-4-karbonsav-szeszkvihidrát-oldat készítése intramuszkuláris vagy intravénás adagolásra összetétel 4 ml-re 25 BL—S640 szeszkvifiidrát 1,08 g (egyenértékű 250 mg/ml BL-^S640 aktivitással) Nátriumhidrogénkarbonát 0,27 g Ionmentesített víz 3,0 g Bio-próba Veszteség/ 250 mg/ml — 238 - 0,8 238 - 0,8 226 - 5,8 220 - 8,3 202 -15,9 A fenti alkotókat összerázzuk, így egy borostyánkő színű oldatot kapunk, amelynek a pH-ja =7,1. Az oldatot szobahőmérsékleten állni hagyjuk és időszakonként meghatározzuk stabilitását. A meghatározások eredményei a következők: Idő 0 15 perc 30 perc 60 perc 90 perc 2 óra A fenti 250 mg/ml-es oldat legalább 90 percig stabilis szobahőmérsékleten és elfogadható i. m. vagy i. v. adagolási forma. Biológiai adatok Azt találtuk, hogy a BL—S640 szeszkvihidrát vízben való oldás és táptalajjal való hígítás után a következő legkisebb gátlókoncentrációkat (M. I. C. = Minimum Inhibitory Concentration mutatja) mcg/ml-ben a megadott mikroorganizmusok ellen, amelyeket éjszakán át 37 °C-on próbacsőben való inkubálás után állapítottunk meg. Az eredményeket az I. Táblázatban adjuk meg, ahol feltüntetjük a cefalexinre, egy forgalomban levő orálisan felszívódó cefalosporinra, kapott értékeket is. A II. Táblázatban a BL—S640 szeszkvihidrát és a cefalexin hatását hasonlítjuk össze egerek vérszintjének szabályozásában orális beadás után. AIII. Táblázatban a BL—S640 szeszkvihidrát és a nátriumcefalozin hatását hasonlítjuk össze egerek vérszintjének szabályozásában intramuszkuláris beadás után. 8