170665. lajstromszámú szabadalom • Eljárás aminocukor származékok tiszta állapotban való elkülönítésére keverékeikből
11 170665 12 b) Infravörös-spektrum A spektrumból kevés következtetés vonható le, rosszszul feloldott infravörös-spektrum KBr-ben. Fő abszorpciós sávok az O—H és C—O vegyértékrezgések tartományában. (3700—3100 cm"-1 , illetve 1180—950 5 cm"1 ). c) Forgatóképesség [oc]D = + 147,2° (vízben) d) A III. komponens NMR-spektrumát DaO-ban 220 MHz-n a 3. ábra mutatja. e) Metilezés Hakomori szerint A III. komponenst dimetilszulfoxidban metiljodiddal és nátriumhidriddel metilezve főtermékként 13-szorosan metilezett III. komponenst és kisebb mennyiségben 14-szeresen metilezett terméket is kapunk. f) A metilezett termék tömegspektruma A molekulacsúcs 827 értéken (1,5% relatív intenzitás) 20 C38 H 69 NOi 8 összegképletnek felel meg. (841 értéken 0,1% relatív intenzitással egy második molekulacsúcs van jelen.) A legfontosabb fragmens-csúcsok: 25 739 (27% relatív intenzitás) 592 (3,7% relatív intenzitás) 535 (30% relatív intenzitás) 388 ( 9% relatív intenzitás) 386 (13% relatív intenzitás) 30 284 (13% relatív intenzitás) 187 (12% relatív intenzitás) 171 (40% relatív intenzitás) 101 (34% relatív intenzitás) 88 (25% relatív intenzitás) 35 75 báziscsúcs (alapcsúcs) A homológ sor legközelebbi tagja a IV. komponens. Ez a vegyület részleges savas hidrolízis során — miként említettük — II. komponenssé és glükózzá hasítható 40 1: 2 mólarányban. Futtatószer: n-butanol-etilalkohol-víz 50: 30: 20 F 1500 Kieselgel-lel készített DC-kész lemezek (gyártja Schleicher und Schüll): Rglűkóz -értékek: 0,41—0,46 45 A magasabb homológok, azaz az V—VIII. komponensek a szacharázt sokkal kevésbé képesek gátolni, mint a sorozat alacsonyabb tagjai (II—IV. komponens). A magasabb komponensek savas hidrolízisekor közbenső termékekként mindig kimutathatók az alacso- 50 nyabb komponensek; emellett hasadási termékekként glükóz és maltóz keletkezik. Vékonyrétegkromatográfia Futtatószer: n-butanol-etilalkohol-víz 50: 30: 20 A kromatografálást F 1500 Kieselgel-lel készített DC- 55 készlemezeken (gyártója Schleicher und Schüll) végezzük. Rglükóz-ertékek: V. komponens (nt +n 2 =4): 0,30—0,34 VI. komponens (nj + n2 = 5): 0,21—0,23 60 VII. komponens (n, + n2 = 6): 0,14—0,16 VIII. komponens (ni +n2 =7): 0,09—0,11 A találmány szerinti homológ sor alacsonyabb tagjainál tapasztaltakhoz hasonlóan az V—-VIII. komponen- 65 sek savas totálhidrolízisénél is I. komponens és glükóz képződik diszkrét mólarányokban, éspedig 1: 4, 1: 5, 1:6, 1:7 és 1:8 arányban (amikoris a glükóz százalékos mennyisége 74,4%, 79,7%, 83,3%, 86,5%, illetve 89,1%). F 1500 Kieselgel-lemezeken n-butanol, etanol és víz 45: 35: 20 térfogatarányú elegy ével mint futtatószerrel végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálatokban háromszoros előhívás után az alábbi Rf -értékeket kapjuk a fenti savas totálhidrolízisnél kapott anyagokra: Glükóz: I. Standard Rrérték komponens arány — glükóz 0,77 — maltóz 0,65 — maltotrióz 0,51 — maltotetraóz 0,39 — maltopentaóz 0,27 4: 1 — 0,25 — maltohexaóz 0,21 5: 1 — 0,18 — maltoheptaóz 0,15 6: 1 — 0,13 — maltooktaóz 0,11 7: 1 — 0,09 8: 1 — 0,07 Az előzőekben ismertetett katalitikus hidrogénezést az V—VIII. komponensekkel elvégezve is az tapasztalható, hogy a glükózegységek közül egyesek a ciklohexéngyűrű 4-helyzetében kapcsolódnak. Tekintettel arra, hogy ezek a vegyületek l-*4 kötésű lineáris oligoglükozid-láncokat tartalmaznak, felhasználhatók szénhidrátokat lebontó bizonyos enzimek szubsztrátjaiként. Az alkalmazható enzimek körét nyilvánvalóan azokra lehet korlátozni, amelyek hatását ezek a vegyületek nem gátolják. így például bakteriális és gombaeredetű a-amilázok felhasználhatók bármely olyan oligoglükozidlánc lebontására, amely 3 vagy több glükózegységet tartalmaz és lebomlása során alacsony molekulasúlyú vegyületeket és érintetlen szacharidfragmenseket, például maltózt és maltotriózt ad. Ez a lebomlási folyamat végbemegy a találmány szerinti homológ sor azon tagjaival, amelyekben nj +n2 értéke 3 vagy ennél nagyobb. Ez viszont további bizonyíték az a-helyzetű l-*4 kötésre. Részben lebonthatók (3-amiláz által a találmány szerinti homológ sor azon tagjai, amelyekben ní +n 2 értéke 4—7. Tekintettel arra, hogy a ß-amilaz maltózegységeket egy a, l-»4 kötésű glükózláncnak csak a nem-redukáló végéről tud lehasítani, a kapott bomlástermékek gondos elemzése értékes információt ad bármely, a ciklohexéngyűrű 4-helyzetében kötött oligoglükozid-szubsztituenstől, különösen pedig ezen szubsztituens lánchosszáról, valamint a bisz-dezoxi-glükózhoz kötődő láncban (azaz a vegyület redukáló végében) levő glükózegységek számáról. A 4, 5, 6, 7 vagy 8 glükózegységet tartalmazó I általános képletű vegyületek azonban nem bonthatók le teljesen a ß-amilaz által. E vegyületek egy részének ellenállóképessége minden valószínűség szerint azzal magyarázható, hogy szerkezetük nem teszi lehetővé a ß-amilaz megfelelő támadását. 6
