170438. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a gyűrűs eritromicin-A-karbonát L-aszparagin-savas sójának előállítására
3 170438 4 pneumoniae-val és Enterococcus-fajokkal szemben meghatározott minimális gátló koncentrációja (MGK) nagyságrendileg megegyezik a szabad bázis megfelelő adataival. A gyűrűs eritromicin-A-karbonát L-aszparaginsavas sója tehát megtartja az alapvegyület biológiai aktivitását, további előnyös sajátsága pedig az, hogy felszívódás kedvezőbb a gyűrűs eritromicin-A-karbonáténál és az eritromicinénál, ugyanakkor pedig toxicitása azonos vagy kisebb az említett két antibiotikuménál. így például ha patkányoknak orálisan azonos súlyú gyűrűs eritromicin-A-karbonátot, illetve gyűrűs eritromicin-A-karbonát L-aszparaginsavas sót adunk be, és az időről-időre végzett vérszint-meghatározás során a vér gyűrűs eritromicin-A-karbonát-szintjét minden esetben 100%-nak tekintjük, az eritromicin-A-karbonát L-aszparaginsavas sójának vérszintjére a következő értékeket kapjuk: 15 perc elteltével: 186%, 30perc elteltével: 226%, lóra elteltével, 172%, 2 óra elteltével: 132%, 3 óra elteltével: 100%, 5 óra elteltével: 103%, és 7 óra elteltével: 130%. Hasonlóképpen, a tüdő-szövetekben - az orálisan beadott azonos mennyiségű gyűrűs eritromicin-A-karbonát esetén mért antibiotikum-szintet minden esetben 100%-nak tekintve - az L-aszparaginsavas só adagolásakor a következő antibiotikum-szintek észlelhetők: 1 óra elteltével: 188%, 2 óra elteltével: 242%, 3 óra elteltével: 322%, 5 óra elteltével: 250%, és 7 óra elteltével: 446%. Ha patkányoknak orálisan azonos súlyú gyűrűs eritromicin-A-karbonát L-aszparaginsavas sót, illetve eritromicint adunk be, és az időről-időre végzett vérszint-meghatározás során az eritromicin-szintet minden esetben 100%-nak tekintjük, az eritromicin-A-karbonát L-aszparaginsavas sójának vérszintjére a következő értékeket kapjuk: 15 perc elteltével: 156%, 30 perc elteltével: 430%, lóra elteltével: 4'7 7%, 2 óra elteltével: 212%, 3 óra elteltével: 170%, és 5 óra elteltével: 103%. Az eritromicin-A-karbonát L-aszparaginsavas sójának beadásakor a tüdő-szövetekben észlelhető, hasonlóan számított antibiotikum-szint értékei a következők: 1 óra elteltével: 1010%, 2 óra elteltével: 973%, 3 óra elteltével: 1590%, 5 óra elteltével: 1300%, és 7 óra elteltével: 514%. A gyűrűs eritromicin-A-karbonát akut toxicitása (LDS o) fehér egéren 4,05 g/kg, az eritromiciné 2,58 g/kg, míg ha az állatoknak 2,5-5 g/kg gyűrűs eritromicin-A-karbonát L-aszparaginsavas sót adunk * be, toxikus jelenségeket egyáltalán nem tapasztalunk. A gyűrűs eritromicin-A-karbonát L-aszparaginsavas sójának n-oktanol/víz rendszerben egyensúlyi állapotban mért látszólagos megoszlási állandója (a koncentrációk arányában kifejezve) 109. A gyűrűs eritromicin-A-karbonát L-aszparaginsavas sóját a találmány szerint úgy állítjuk elő, hogy a gyűrűs eritromicin-A-karbonátot vizes közegben vagy víz és szerves oldószer elegyében, szobahőmérséklet és a reakcióelegy forráspontja közötti hőmérsékleten, oldat képződéséhez szükséges ideig sztöchiometrikus mennyiségű L-aszparaginsawal reagáltatjuk. A kapott oldatot fagyasztva szárítjuk, vagy a szerves oldószert és a vizet lepároljuk, majd kívánt esetben a víznyomokat biner vagy terner azeotrop elegyet képező anyagok felhasználásával eltávolítjuk. A fenti eljárással a C42 H7 2 N 2 0 18 • H 2 0 tapasztalati képletű monohidrátot kapjuk. Ez a ter-5 mék színtelen, vízben oldódó anyag. A termék káliumbromid-pasztillában felvett infravörös abszorpciós spektrumában az 1100-1900 cm"1 hullámszám-tartományban a következő jellemző sávok észlelhetők: 1180, 1250, 1395, 1475, 1630, 1730 10 és 1820 cm-1 . A termék hígított deuterometanolban felvett NMR-spektrumában az 1-3 ő sávtartományban a következő jellemző sávok észlelhetők: 2,86 (s, 6H, N(CH3) 2 ] 1,61, 1,25. A találmány szerinti eljárást az oltalmi kör 15 korlátozása nélkül az alábbi példákban részletesen ismertetjük. 1. példa 20 3,8 g gyűrűs eritromicin-A-karbonát 10 ml forrásban levő acetonnal készített oldatához 0,665 g L-aszparaginsav 50 ml vízzel készített oldatát adjuk, és az elegyet oldat képződéséig melegítjük. Ezután 25 az acetont csökkentett nyomáson lepároljuk, és a maradékot fagyasztva szárítjuk. A gyűrűs eritromicin-A-karbonát L-aszparaginsavas sóját a 131-142 C°-on olvadó monohidrát formájában kapjuk, 100%-os hozammal. 30 ElemzésaC42 H 72 N 2 Oi 8 • H 2 0 képlet alapján: számított: C =55,38%, H = 8,19%, N = 3,07%, O =33,38%, 35 talált: C =55,57%, H = 8,24%, N = 2,62%, O =33,40%. 40 2. példa 3,8 g gyűrűs eritromicin-A-karbonát 40 ml 96%-os etanollal készített oldatához 0,665 g L-asz-45 paraginsav 40 ml vízzel készített oldatát adjuk, és az elegyet oldat képződéséig keverjük. Az oldószer főtömegét csökkentett nyomáson lepároljuk, majd a maradékhoz abszolút etanolt adunk, és így a víz maradékát eltávolítjuk. Az 1. példában kapott ter-50 mékkel azonos jellemzőkkel rendelkező gyűrűs eritromicin-A-karbonát L-aszparaginsavas só-monihidrátot kapunk. Csökkentett nyomáson hosszú ideig végzett szárítás után vízmentes termékhez jutunk. 3. példa 3,8 g gyűrűs eritromicin-A-karbonát 10 ml for-60 rásban levő acetonnal készített oldatához 0,665 g L-aszparaginsav 20 ml forró vízzel készített oldatát adjuk, és az elegyet oldat képződéséig melegítjük. Az oldószert csökkentett nyomáson lepároljuk, a maradékhoz benzolt adunk, majd a víznyomokat 65 azeortop desztillációval eltávolítjuk. 2
