170418. lajstromszámú szabadalom • eljárás Rhizopus oryzae törzs lipáz-termelésének növelésére

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1975. VII. 10. (GO-1317) ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1977. I„ 28. Megjelent: 1978.1.31. 170418 Nemzetközi osztályozás: C12D 13/10 í './'! i;'ccs Feltalálók: dr. Széli Valéria vegyészmérnök 40%, Kovácsné dr. Szabó Ilona gyógyszerész 10%, dr. Kelemen Ágnes gyógyszerész 10%, dr. Horváth István xsgyész 10%, dr. Cseh György orvos 10%, dr. Hegyaljai Kiss Géza vegyész 5%, Tölgyesi László vegyésztechnikus 15%. Tulajdonos: Gyógyszerkutató'Intézet, Budapest Eljárás Rhizopus oryzae törzs lipáz-termelésének növelésére 1 A találmány tárgya eljárás Rhizopus oryzae (MNG 00135) törzs lipáz-termelésének növelésére süllyesztett, aerob kultúrában, szerves szén- és nitrogénforrást tartalmazó táptalajon. 5 Ismeretes, hogy a lipázok a triglicerideket olaj-víz emulzió határfelületen bontó enzimek. E hidrolízis termékei di- és monogliceridek, zsírsavak és glicerin lehetnek. Ismeretes növényi eredetű lipáz, mint például a ricinusmag lipáza, 10 lehet a lipáz állati eredetű, mint . például a pankreász lipáz, valamint ismeretesek mikrobiológiai eredetű lipáz enzimek is. Az emberi szervezetben gyakran előfordul, hogy a pankreász nem kielégítő mennyiségben választ ki lipáz 15 enzimet, s ekkor azt mesterségesen pótolni kell. További fontos gyakorlati felhasználási terület lehet még a szőrmeipar, textilipar és más ipari területek. Lipáz mikrobiológiai úton történő előállítására 20 több eljárás ismeretes. Ezen szabadalmi irodalomból megismerhető eljárások legnagyobb része a Mucoraceae család törzseivel végzett lipáz előállítására vonatkozik, de ismeretesek különböző baktériumtörzsekre vonatkozó lipáz-előállítási mó- 25 dok is. A Mucoraceae család törzseit és ezek között egyéb Rhizopus törzsek mellett a Rhizopus oryzae-t a 6495/61 számú japán szabadalmi leírás 30 szerzői használták lipáz termelésre. Az eljárás hátránya, hogy a törzs által termelt lipáz mennyisége mindössze 78 E/ml. (Egységnyi az az enzim-mennyiség, mely pH 5,2-nél 100//mól zsírsavat szabadít fel 1 óra alatt olívaolaj szubsztrátból.) A fenti szerzők által izolált Rhizopus oryzae törzs lipázának pH optimumát Nagaoka K. és munkatársai [Agr. Biol. Chem. 33, 299-305 (1969)] a Rhizopus formosaensis és Rhizopus chinensis törzsek lipázáéhoz hasonló pH 7,0-nak találták. A Mucor lipolyticus Aac 10102 törzs a Pankreatin lipázhoz hasonló enzimet termel (8912/67 számú japán szabadalmi leírás). Maximális enzimszintet korlátozott Ca-szint mellett végzett fermentációval kaptak. Az eljárás hátránya az alacsony termelési szint, a legjobb példa szerint is csak 90,2 E/ml-es lipáz-termelési szintet értek el (egységnyi az az enzim-mennyiség, mely 37 C°-on, pH 8,0-nál 50 /wnól zsírsavat szabadít fel 50 perc alatt olívaolaj szubsztrátból), melynek kb. 70%-át tudják kinyerni. A 3 513 073 számú USA-beli szabadalmi leírás szerint a Rhizopus arrhizus var. delemar törzzsel 275 E/ml lipáz termelés érhető el. (Egységnyi az az enzim-mennyiség, mely 37 C°-on 1 /imól zsírsavat szabadít fel percenként olívaolaj szubsztrátból.) Az eljárás hátránya, hogy bár a törzs által termelt 170418