170093. lajstromszámú szabadalom • Mikrobiológiai eljárás L-lizin előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL. SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1973. IV. 16. (VE-714) Közzététel napja: 1976. X. 28. Megjelent: 1977. XI. 5. 170093 Nemzetközi osztályozás: C 12 D 13/06 Feltaláló: Alikhanian Sos Isaakovich, biológus, Zaitseva Zinaida Müchailovna, fiziológus, Turovtseva Valentina Vasilievna, mikrobiológus, Moszkva, Szovjetunió Tulajdonos: Vsesojuzny Nauchno-Issledovatelsky Institut Genetiki i Selektsii Promyshlennykh Mikroorganizmov, Moszkva, Szovjetunió Mikrobiológiai eljárás L-lizin előállítására 1 A találmány tárgya uj mikrobiológiai eljárás L-lizin előállítására, amely esszenciális aminosav, szarvasmarha és szárnyasok etetésére használják takarmányadalékként, az élelmiszeriparban pékáruk tápértékének növelésére és izjavitásra, valamint alkalmazzak a gyógyszer- 5 iparban is. Ismeretes, hogy az L-lizint mikrobiológiai utón állitják elő homoszerin- vagy homoszerin-, izoleuoin- és valin-hiányos Miorococcus glutamieus vagy Corynebasterium glutamicus törzs, valamint homoszerin-hiányos Brevibasterium sp. 10 törzs olyan fermentációs táptalajon való termelésével, amely szénhidrátokat, nitrogénforrásként ammóniumaókat vagy karbamidot és növényi fehérjehidrolizátumot' /például szójaba"b-, buzafehérjehidrolizátumot/ vagy mikrobás fehérjehidrolizátumot /fanyersanyagok felhaszná- 15 lásával kapott takarményélesztőt/ tartalmaz /lásd a 2 979 439 számú Amerikai Egyesült Államok-beli, valamint az 1 18o lo4, 1 186 988 és 1 2oo 353 számú nagybritanniai szabadalmi leírást/. A törzset 24 *C és 37 °C közötti hőmérsék- 20 léten levegőztetés és keverés közben termelik. Az eljárás befejezése után elválasztják a törzs biomasszáját a folyékony táptalajtól és a kapott nativ oldatból elkülönitik a terméket. Az ismert eljárások hátránya, hogy a törzs növekedéséhez szükséges fenti hidrolizátumok 25 jelenlétében a fő nyersanyagok, szénhidrátok kihasználása L-lizin bioszintézisére viszonylag rossz hatásfokú /2o-28 <&/. A találmány célja, hogy a fenti hátrányokat kiküszöböljük. A találmány feladata, hogy az L-lizin mikro- 30 biológiai előállítási eljárásában, amely abból áll, hogy homoszerin- vagy homoszerin-, izoleucin- és valin-hiányos Micrococcus glutamicus vagy homoszerin-hiányos Brevibacterium sp. törzset olyan fermentációs táptalajon tenyésztünk, amely szénhidrátokat, mikrobás fehérjehidroli- 35 zátumot és ammőniumsókat vagy karbamidot mint nitrogénforrást tartalmaz és a fermentációt 28 °C és 35 °C közötti hőmérsékleten levegőztetés és keverés közben végezzük, majd a törzs biomasszáját a folyékony táptalajtól elválasztjuk és a kapott nativ oldatból a terméket elválasztjuk, a mikrobás fehérjehidrolizátum fajtáját ugy változtassuk, hogy a szénhidrátok kihasználását L-lizin bioszintézisére jobb hatásfokúvá tegyük. A találmány értelmében a feladatot ugy oldjuk meg, hogy mikrobás fehérjehídrolizátumként ásványolaj eredetű szénhidrogéneken önmagában ismert módon tenyésztett Candida élesztő vagy a fenti termelő törzsek valamelyikének a folyékony táptalajtól elválasztott biomasszájának hidrolizátumát alkalmazzuk. Azáltal, hogy a fermentációs táptalajhoz az emiitett nyersanyagok hidrolizátumait adjuk, megnövelhető a szénhidrátok kihasználása L-lizin bioszintézisére /L-lizin kitermelés L-lizin-monohidrokloridra számitva és a táptalaj szénhidrát tartalmára vonatkoztatva 39 #/. A Candida élesztő hidrolizátumát vagy a törzs biomasszájának hidrolizátumát a találmány értelmében egyrészt ugy állithatjuk elő, hogy az emiitett élesztőt vagy biomasszát valamely ásványi savval kezeljük, majd ezt követően a savat semlegesítjük. Előnyösen ugy járunk el, hogy a Candida élesztőt vagy valamelyik termelő törzs biomaszszáját 4-8 n ásványi savval kezeljük 129-132 °C hőmérsékleten, a sav mennyisége 1 g kiindulási anyagra számitva 3-lo ml. A találmány szerinti eljárás egyszerűsítése és gazdaságosabbá tétele céljából előnyös, ha az ásványi sav semlegesítését ammóniával végezzük és az eközben keletkező ammóniumsót a fermentációs táptalaj alkotórészeként hasznosítjuk. A Candida élesztó hidrolizátumát a találmány értelmében előállíthatjuk ugy ie, hogy 170093