169882. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antibiotikumok előállítására

MAGTAB NEFK0ZTAKSA8AG SZABADALMI LEÍRÁS 169882 ft'C * ¥\(í Bejelentés napja: 1975. VII. 25. (LE-776) Nagy-Britanniai elsőbbsége: 1974. VII. 27. (33283/74) Közzététel napja: 1976. IX. 28. Megjelent: 1977.X. 31. Nemzetközi osztályozás: C12D 9/20 $!#*» Bejelentés napja: 1975. VII. 25. (LE-776) Nagy-Britanniai elsőbbsége: 1974. VII. 27. (33283/74) Közzététel napja: 1976. IX. 28. Megjelent: 1977.X. 31. ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Bejelentés napja: 1975. VII. 25. (LE-776) Nagy-Britanniai elsőbbsége: 1974. VII. 27. (33283/74) Közzététel napja: 1976. IX. 28. Megjelent: 1977.X. 31. Feltalálók: Parenti Francesco biológus, Coranelli Carolina vegyész, Tamoni Giorgio vegyész, Milánó, Lancini Giancarlo vegyész, Pavia, Olaszország Tulajdonos: Gruppo Lepetit S. p. A., Milánó, Olaszország Eljárás új antibiotikumok előállítására 1 A találmány az antibiotikumok egy új osztályának előállítására és elkülönítésére vonatkozik, amelyekhez az Actinoplanes genushoz tartozó törzsekkel végzett fermentációval juthatunk. Ezeket az anyagokat a következőkben A, B és C metabolit- 5 nak fogjuk nevezni, a B metabolitot gardimicinnek is nevezik. Mint fentebb mondottuk, az antibiotikumokat az Actinoplanes genushoz tartozó törzsek tenyésztésével állítjuk elő. Ezeket a törzseket Temossi 10 (Olaszország) és Garbadi Bridge (India) környékén gyűjtött talaj mintákból izoláltuk. Saját letéti számaink: A/6353 az olasz talajmintából izolált törzsre és A/10889 az indiai talajmintából izolált törzsre. Mindkettőt deponáltuk az ATCC-ben, ahol 15 ezek a 31048 illetve 31049 számot kapták. Az új antibiotikumok előállítása során a szelektált organizmust aerob körülmények között vizes tápközegben tenyésztjük, amely egy szénforrást, 20 egy nitrogénforrást és szervetlen sókat tartalmaz. A törzset rendszerint előtenyésztjük egy rázott lombikban, amíg jelentős antibiotikus aktivitás halmozódik fel, majd a tenyészetet fermentációs táptalajt tartalmazó fermentorok beoltására használjuk fel. 25 A tenyésztést 25-35 C° hőmérsékleten aerob körülmények között folytatjuk kellő ideig ahhoz, hogy jelentős antibiotikum-szint keletkezzék. Ezen idő alatt mikrobiológiai vizsgálatokat végzünk agardiffúziós módszerrel a keletkezett antibiotikum 30 koncentrációjának meghatározására. Tesztorganizmusként Sarcina lutea-t használunk. Az így előállított antibiotikus aktivitású anyag hagyományos eljárásokkal izolálható a fermentléből, például extrakcióval olyan szerves oldószerrel, amelyben az antibiotikus aktivitású anyag oldható és amely a vizes közeggel nem elegyedik. E célból 3-6 szénatomos rövidszénláncú alkanolok és 1-4 szénatomos rövidszénláncú halogénezett szénhidrogének alkalmazhatók előnyösen. A szerves fázist elválasztjuk a vizes közegtől, kis térfogatra töményítjük és 10-15 órán át alacsony hőmérsékleten hagyjuk állni csapadék képződéséig, amelyet szűréssel nyerünk ki. A kapott nyers termék Whatman No.l papíron végzett paplrkromatográfiája és szilikagélen végzett vékonyréteg kromatográfiája, majd a kimutató rendszerként Staphylococcus aureusszal végzett mikrobiológiai előhívás (Nicolaus et ak, II Farmaco, Ed. Prat.,' 8, 350-370, 1961) legalább két aktív komponens jelenlétére mutat, amelyeket azonosítási célokra A és B metabolitnak nevezünk. Az utóbbi nagyobb mennyiségekben képződik, mint az előbbi. Ez a két komponens különböző Rf

értékű, amely .értékek az eluáló rendszer minőségétől függően változnak. Az A és B metabolit tiszta vegyületként izolálható a szokásos technikák alkalmazásával, 169882