169664. lajstromszámú szabadalom • Eljárás aszimmetriás nyílt szénláncú cisztin-tartalmú peptidek előállítására
13 169664 14 BOC-Tyr-Cys-Asn-OtBu Szabadalmi igénypontok Trt-Leu-Val-Cys-Gly-OH 210 mg BOC-Tyr-OH-t, 87 mg N-hidroxiszukcinimidet és 0,094 ml N-etil-morfolint 3 ml 5 dimetil-formamidban —10 C°-on összekeverünk 155 mg N-etil-morfolinnal. Két órán át 20 C°-on állni hagyjuk, majd hozzáadunk 680 mg H-Cys-Asn-OtBu I 10 Trt-Leu-Val-Cys-Gly-OH-t 7 ml dimetil-formamidban és 15 órán át 20 C°-on állni hagyjuk. Ezután leszűrjük és a szűrletet 35 C°-on és 0,01 torr nyomáson bepároljuk. A maradékot kloroform-n-hexán elegyből kicsapjuk, így vékonyré- 15 teg kromatográfiásan tiszta fenti terméket kapunk. Rf = 0,40 kloroform-metanol 7:3 elegyben. A 2. pontban alkalmazott kiindulási anyagot az alábbi módon állíthatjuk elő. 20 H-Cys(Trt)-Asn-OtBu.HCl 7,76 g Trt-Cys(Trt)-Asn-OtBu-t feloldunk 60 ml jégecetben és cseppenként hozzáadunk 15 ml vizet. Egy órán át 20 C°-on állni hagyjuk, majd hozzáadunk 45 ml vizet, leszűrjük és a szűrletet 25 bepároljuk. A maradékot felvesszük 150 ml etilacetátban és az oldatot 0,5 n nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és vízzel mossuk. Nátrium-szulfát felett szárítjuk, majd az oldószert lepároljuk, a maradékot feloldjuk 10 ml etil-acetátban és 0 C°-on összekever- 30 jük 5 ml, etil-acetáttal készített 2 n sósavval és 150 ml petroléterrel. A csapadékot leszűrjük és petroléterrel utánamossuk. Vékonyréteg kromatográfiásan tiszta fehér színű port kapunk. Rf = 0,50 kloroform-metanol 8:2 elegyben. 35 H-Cys-Asn-OtBu.HCl 11,10 g H-Cys(Trt)-Asn-OtBu.HCl-t feloldunk 80 ml metanolban és 80 ml etil-acetátban és összekeverjük 7,3 g higany(II)-acetáttal. Négy órán át 20 C°-on állni hagyjuk, majd 15 percen keresztül kén- 40 hidrogéngázt vezetünk át az oldaton, szűrjük és a szűrletet bepároljuk. A maradékot háromszor eldörzsöljük 20-20 ml petroléterrel, az oldhatatlan viszkózus olajszerű anyagot feloldjuk 20 ml kloroformban és a terméket 110 ml petroléter hozzáadásával fehér 45 por alakjában kicsapjuk. Rf = 0,35 kloroform-metanol 1:1 elegyben. 1. Eljárás aszimmetriás nyílt szénláncú cisztinpeptidek vagy ezek származékai előállítására megfelelő dszteintartalmú aminosavszekvenciákból, amelyekben az egyik dszteingyök merkaptocsoportja szabad és a másik dszteingyök merkaptocsoportja tritil- vagy acilamido-metil-csoporttal védett, és amelyek kívánt esetben egyéb, a peptid kémiában szokásos védőcsoportot is tartalmazhatnak, azzal jellemezve, hogy a merkaptocsoporton tritil- vagy acilamido-metil-csoporttal védett aminosavszekvenciát I általános képletű szulfenilhalogeniddel Hal-S-CO-OR3 I — ahol Hal jelentése legfeljebb 80-as atomsúlyú halogénatom, előnyösen klóratom és R3 jelentése valamely, adott esetben klóratommal vagy rövidszénláncú alkoxicsoporttal helyettesített, legfeljebb 18 szénatomos alkilcsoport, előnyösen metilcsoport — reagáltatjuk és a kapott, a kénatomon — SCOOR3 csoporttal védett ciszteinvegyületet a peptídszintézis tetszés szerinti további lépésében olyan ciszteinnel, dszteintartalmú peptiddel vagy ezek olyan származékával kondenzáljuk, mely vegyületekben a merkaptocsoport szabad és kívánt esetben az egyéb védőcsoportokat ismert módon lehasítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy olyan I általános képletű vegyületet alkalmazunk, ahol Hal klóratomot és R3 valamely 1—4 szénatomos alkilcsoportot jelent. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy olyan aminosavszekvenciából indulunk ki, amelyekben a merkaptocsoport rövidszénláncú alkanoil-amido-metil-csoporttal védett. 4. A 3. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy olyan aminosavszekvendából indulunk ki, amelyben a merkaptocsoport acetamido-metil-csoporttal védett. 5. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy olyan aminosavszekvenciából indulunk ki, amelyekben a merkaptocsoport tritilcsoporttal védett. 6. Az 1—5. igénypont bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy I általános képletű szulfenilhalogenidként a metoxi-karbonilszulfenil-kloridot alkalmazzuk. A kiadásért felelős: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 77-1291 - Dabasi Nyomda, Budapest - Dabas Felelős vezető: Földes György igazgató
