169664. lajstromszámú szabadalom • Eljárás aszimmetriás nyílt szénláncú cisztin-tartalmú peptidek előállítására
169664 Azt találtuk továbbá, hogy egy — S—COOR3 csoporttal védett ciszteint, illetve cisztein-peptidet vagy ezek származékát ciszteinnel, illetve valamely ciszteintartalmú peptiddel vagy ennek egy szabad merkaptocsoporttal rendelkező származékával a megfelelő cisz- 5 ön-vegyületté alakíthatunk. A fenti reakciót az alábbi (1) reakcióegyenlettel szemléltetjük: R-S-X+Hal-S-CO-OR3 —>R-S-S-CO-OR 3 (1) 10 ahol Hal és R3 jelentése a fenti, R és X jelentése pedig az alábbiakban megadott. A találmány szerinti reakció előnye a fenti irodalmi helyen ismertetett eljárással szemben az, hogy a 15 cisztein-peptidből végtermékként kizárólag a megfelelő szulfenil-tiokarbonát keletkezik, míg az ismert eljárás során a szulfenil-tiokarbonát a szabad SH-csoporttal rendelkező, beadagolt tiollal szimmetriás diszulfid képződése közben részben tovább reagálhat az 20 alábbi (2) reakcióegyenlet értelmében: R'-SH + Hal-S-CO-OR3 • R' -S-CO-OR3 (2) R'-S-S-CO-OR3 + R'-SH • R' -S-S-R' + COSR3 OH 25 ahol R' jelentése megegyezik R szubsztituens alábbiak szerinti jelentésével. Az (1) reakcióegyenletben X tritilcsoportot (Trt) vagy acilamido-metilcsoportot (Acilm) jelent, például 30 olyan csoportot, amely a 2 060 969 sz. német szövetségi köztársaságbeli nyilvánosságra hozatali iratban van leírva. Az acilamido-metilcsoport például egy olyan -CH2-NH-CO-R 4 általános képletű csoport, ahol —CO—R4 valamely karbonsav, így valamely alifás, 35 aromás, aralifás vagy heterociklusos karbonsav vagy valamely szénsavszármazék acilcsoportját jelenti, így valamely szénsavészter- vagy karbaminsavgyököt. R4 elsősorban valamely adott esetben szubsztituált rövidszénláncú alkilcsoport, így például metil-, etil-, pro- 40 pil-, izopropil-, n-butil- vagy terc-butil-csoport, amely ciklohexilcsoportot vagy valamely adott esetben szubsztituensként például klóratomot, trifluor-metilvagy nitrocsoportot tartalmazhat. Ezenkívül R4 je- 45 lenthet például valamely adott esetben szubsztituált, 3—8 szénatomos cikloalkilcsoportot, előnyösen 5—6 gyűrűtagú cikloalkilcsoportot, így ciklopentil- vagy ciklohexilcsoportot vagy valamely adott esetben szubsztituált aromás vagy aralifás csoportot, ahol az 50 aromás gyűrű előnyösen benzolgyűrű, mindenekelőtt adott esetben szubsztituált fenil- vagy benzilcsoportot, például szubsztituálatlan vagy a fenilcsoportban rövidszénláncú alkilcsoporttal, rövidszénláncú alkoxicsoporttal, halogénatommal vagy nitrocsoporttal 55 szubsztituált fenil- vagy benzilcsoportot, vagy egy, adottesetben a fenti módon szubsztituált, előnyösen monociklusos heterociklusos csoportot, például tienilvagy furilcsoportot. „Hal" mint legfeljebb 80-as atomsúlyú halogénatom, fluor- vagy brómatomot, 60 elsősorban klóratomot jelent. R3 jelentése, mint adott esetben klóratommal vagy rövidszénláncú alkoxicsoporttal szubsztituált, legfeljebb 18 szénatomos alkilcsoport, előnyösen 1—6 szénatomos alkilcsoport, így etil-, propil-, n-butil-, n-oktil-, n-oktadecil-, első- 65 sorban metil-, továbbá 2-klóretil-, 2-metoxi-etil-csoport. Az 1 568 632 sz. német szövetségi köztársaságbeli nyilvánosságra hozatali irat ismerteti az I általános képletű szulfenilhalogenidek előállítását. R a cisztein, illetve valamely cisztein-peptid gyökét vagy pedig ennek egy származékának gyökét jelenti. Cisztein-peptideken olyan peptideket kell érteni, amelyek egy ciszteingyököt és adott esetben ezenkívül egy vagy több cisztingyököt tartalmaznak. A peptidek elsősorban természetben előforduló peptidek és ezek szintetikus analógjai, valamint az ilyen peptidek részszekvenciái. Ezek a peptidek a természetben előforduló aminosavakból vannak felépítve, továbbá ezek homológjaiból, szerkezeti izomerjeiből és optikai izomerjeiből, a peptidek például a fenti aminosavakon és azok optikai izomerjein kívül 3—7 szénatomos amino-(rövidszénláncú)-alkánsavakat, így például ß-alanint, a-aminovaj savat, 7-aminovaj savat, a'ß-diamino-propionsavat, norvalint, norleucint, továbbá például hidroxiprolint, normetionint, fenilglicint, ornitint, citrullint vagy N-alkil-aminosavakat, így N-metiltirozint vagy megfelelő D-vegyületeket tartalmazhatnak. A peptidek származékai például az amidok, így a C-terminális N-szubsztituálatlan vagy N-szubsztituált amidok, például N-monoalkil- vagy N-aminoalkilszubsztituált C-terminális amidok, ahol az alkilcsoport 1—18 szénatommal rendelkezik, továbbá a C-terminális észterek, például olyan alkilészterek, ahol az alkilcsoport 1—18 szénatomos, továbbá az N-aszubsztituációs termékek, mindenekelőtt az N-a-acílszármazékok, ahol az acilcsoport 1—18 szénatomos és végül a peptidek szintézisében használatos közbenső termékek, így az aktivált amino- vagy karboxilcsoporttal rendelkező peptidek, például az aktivált észterek, hidrazidok, azidok, vegyes anhidridek, valamint a megfelelő olyan vegyületek, amelyekben a funkcionális csoportok, így az amino-, karboxil-, hidroxil-, merkapto- és/vagy guanidinocsoportok a szokásos módon védőcsoportokkal védve vannak. A találmány tárgya tehát eljárás aszimmetriás nyüt szénláncú cisztin-peptidek vagy ezek származékai előállítására megfelelő ciszteintartalmú aminosavszekvenciákból, amelyekben az egyik ciszteingyök merkaptocsoportja szabad és a másik ciszteingyök merkaptocsoportja tritil- vagy acilamido-metilcsoporttal védett, és amelyek kívánt esetben egyéb, a peptid kémiában szokásos védőcsoportot is tartalmazhatnak, mely eljárást az jellemez, hogy a merkaptocsoporton tritil- vagy acilamido-metilcsoporttal védett aminosavszekvenciát I általános képletű szulfenilhalogeniddel Hal-S-CO-OR3 I — ahol Hal jelentése legfeljebb 80-as atomsúlyú halogénatom, előnyösen klóratom és R3 jelentése valamely, adott esetben klóratommal vagy rövidszénláncú alkoxicsoporttal helyettesített, legfeljebb 18 szénatomos alkilcsoport, előnyösen metilcsoport — reagáltatjuk és a kapott, a kénatomon — SCOOR3 csoporttal védett cisztein-vegyületet a peptid-szintézis tetszés szerinti további lépésében olyan ciszteinnel, ciszteintartalmú peptiddel vagy ezek olyan szárma-2
