169462. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Litoralon koncentrátum, vagy keverék előállítására

169462 fokozzák a mucintermelő mirigyek szekréciós tevékenységét (kehelysejtek, könnymirigy stb.) »Kémiai szempontból az új anyag, vagy anyagok az alábbi jellemzőket mutatják: triklórecetsavval nem csaphatok^ le, tehát nem fehérje, illetve nem 5 polipeptid jellegűek. Nem zsírtermészetű anyagok, acetonban, kloroformban nem oldódnak, ezzel szemben vízoldhatók. A Litoralon megtartja biológiai aktivitását oldatának olyan kezelése után is, amely a fehérje természetű anyagokat denaturálja, 10 tehát salétromossavat, vagy etilénoxidos kezelést követően is. Találmányunk tárgya a fentiekben ismertetett, eddig ismeretlen Litoralont tartalmazó hormon koncentrátum, vagy keverék előállítása oly módon,. 15 hogy emlős állatból izolált mellékpazsmirigyet megszárítunk és megőrlünk, majd kívánt esetben zsírtalanítunk, majd kívánt esetben vízzel extrahálunk és a kapott oldatot liofilizáljuk. Az ily módon előállított koncetrátum (vizes "20 oldat, vagy liofilizált por) már alkalmas az alábbiakban részletezett gyógyászati, vagy biológiai hatások eléréséhez alkalmazható gyógyszerkészítményekhez. Előállíthatunk azonban aktívabb koncentrátumokat is úgy, hogy a hatóanyagot koncentrál- 25 tabb, vagy tisztább formában tartalmazó termékre törekszünk, vagy a mellette kísérőként jelenlevő kalciumaktív hormon hatástalanításával. A vizes extraktumot megszabadíthatjuk a fehérjéktől és polipeptidektől, ha az extraktumhoz fe- 30 hérjelecsapószert adunk és az így kapott oldatot használjuk fel a kivált csapadék eltávolítása után. Fehérje-lecsapószerként ólomacetátot, vagy egyéb nehéz-fémsót, triklórecetsavat, szulfoszalicil- 35 savat alkalmazhatunk. Alkalmazhatunk oldószeres, vagy kisózásos fehérjementesítést is. Legcélszerűbbnek és legeredményesebbnek mi a triklórecetsavas lecsapást találtuk, ennek egyetlen hátránya, hogy viszonylag nehéz a lecsapószer-feleslegtől megszaba- 40 dúlni. Ez célszerűen sorozatos éteres extrakcióval történhet, de szóba jöhet (újabb tapasztalataink szerint a Litoralon nem különösebben hőérzékeny) a fehérjementesített vizes oldat felmelegítése is, így a triklórecetsav mintegy 90%-át elbonthatjuk. (Klo- 45 roform és széndioxid keletkezik.) Tapasztalataink szerint a fehérje, polipeptid és egyéb frakciók szétválasztása igen jó eredménnyel történhet gél-filtrálás segítségével is. Ilyenkor a keresett anyagunk a nem-fehérje frakcióban talál- 50 ható, ahol számos egyéb anyag szennyezi. (Anorganikus sók, inosit. purin vegyületek, aminosavak stb.) A hatóanyag-koncentrátum további tisztítása sokféle módon történhet és ilyen célra felhasznál- 55 hatók a kromatográfiás, dialízises, extrakciós, precipitációs, adszorpciós és egyéb módszerek is. A kalcium-aktív parathormon megsemmisítésére a legmegfelelőbb mód a fehérjékkel, illetve polipeptidekkel készségesen reagáló anyagokkal történő 60 kezelés. Ilyen lehet a salétromossav, etilénoxid, formalin stb. A fehérje mentes vizes koncentrátumot kívánt, esetben további tisztítás után liofilizáljuk, vagy prccipitáljuk. *>5 Mint már említettük, a Litoralon, vagy Litoralonok egységes volta még nem tisztázott. Megállapítottuk, hogy különféle kémiai és fizikokémiai műveletekkel különféle aktív „Litoralon-frakciókat" különíthetünk el egymástól. így különféle frakciókat kaphatunk szerves oldószeres kicsapással, különféle kromatografálási eljárásokkal, gélfiltrálással, dialízissel, extrakcióval, frakcionált kisózásokkal, ioncserélő gyantás kezelésekkel. A frakciók finomabb elkülönítésére ezen műveletek kombinációját is alkalmazhatjuk. A precipitált, vagy liofilizált Litoralont, vagy Litoralon-frakciókat tovább tisztíthatjuk. Tisztítási módszerként ismételt extrakciókat és kristályosítást alkalmazhatunk. Találmányunk tárgyát képezik továbbá azon gyógyászati és/vagy preventív kompozíciók, amelyek hatóanyagként Litoralont, vagy Litoralon-frakciókat tartalmaznak, biológiailag ártalmatlan kísérőanyagokkal elkeverve. Ezen készítmények hatóanyagtartalma 0,1 mg-10 mg. E készítményeket a gyógyszergyártás ismert módszereivel állíthatjuk elő, Litoralont tartalmazó szilárd, vagy folyékony koncentrátumokból, illetve keverékekből, tabletta, kúp, szolució, kenőcs, porkeverék, vagy spray formájában. A tablettákat 0,1 - 3 mg hatóanyag-tartalommal száraz granulálásos eljárással készíthetjük, de alkalmazható a nedves granulálási technológia is. Segédanyagként bármilyen, a gyógyszeriparban használatos ártalmatlan segédanyag alkalmas a tablettázáshoz. Injekciós oldat 0,1 — 3 mg/ml koncentrációjú vizes oldatból készíthető, ez esetben azonban szükséges az említett fehérje-mentesítés és a fehérje-mentesítő szerektől történő tökéletes megszabadulás. Az injekciós oldatot célszerűbb steril szűréssel előállítani. Az injekciós oldatnak nincs szövetizgató hatása és nem okoz semmiféle anaphylaxiás mellékhatást. 0,1 - 1 mg/g hatóanyag koncentrációval készíthetők kenőcskészítmények is az anyagból. Erre vonatkozóan a legtöbb hidrofil, vagy hidrofób gyógyászati kenőcs alapanyag megfelel. Hasonló a helyzet a kúpkészítésnél is. ahol mind a butyrum cacao, mind a szintetikus kúp alapanyag masszák (pl. Carbowax is) megfelelnek a célnak. A kúpok hatóanyag-tartalma a koncentrátum tisztaságától függően 0,1 — 5 mg. Találmányunk tárgyát képezik olyan kozmetikai készítmények is, amelyek biológiailag aktív hatóanyagként Litoralont tartalmaznak. Ezen kozmetikai készítmények szilárd, vagy folyékony Litoralon koncentrátumokból ismert oldószerekkel, adalékanyagok, töltő-, hígító-, csúsztató-, vivő-anyagok hozzáadása után állíthatók elő kenőcs, szolució, krém, emulzió, porkeverék, spray stb. formájában, 0,05 - 0,5 mg/g koncentrációban. A Litoralon hatóanyagot tartalmazó készítményekkel széleskörű klinikai terápiás vizsgálatokat folytattunk. Az adagolás általában napi háromszori 1 -3 mg Litoralon hatóanyagot tartalmazó koncentrátum volt. Káros mellékhatást mintegy 1 000 betegnél vizsgálva gyakorlatilag nem észleltünk, néhány esetben volt megfigyelhető urticaria-szerű ki-