169437. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szedatív hatású peptidek előállítására
15 169437 16 mennyiségű vízzel felhígítjuk, így lecsapjuk a dipeptidet. A keletkező csapadékot 3 órán át keverjük 0 C -on, majd leszűrjük. Kitermelés: 14 g. Rf Te : EtOH rendszerben (8:2) = 0,09, szilíciumdioxidon. Ennek a dipeptidnek lOg-ját 200 ml 90%-os ecetsavban feloldjuk, majd hozzáadunk lg, 10% palládiumot tartalmazó aktív szenet. Az elegyen 2 napon át hidrogéngázt buborékoltatunk keresztül. A katalizátor leszűrése után a szűrletet szárazra pároljuk, így 2 g H-D-Phe-Arg-OH-acetátot kapunk. Rf Bu : Py : Ac : víz rendszerben [4 : 3/4 : : 1/4 : 1] = 0,20, szilíciumdioxidon. b) Boc-Met-Glu(OtBu>His-D-Phe-Arg-OH Az 1. a) példa szerinti módon előállított Boc-Met-Glu(OtBu)-His-N3 -hoz 4 mmól, a fenti a) lépés szerint kapott H-D-Phe-Arg-OH-acetátot adunk, majd a pH-t trietilamin hozzáadásával 7,1-re állítjuk be. Az elegyet 70 órán át keverjük 0 C -on, majd szűrjük. A szűrletet bepároljuk. A maradékot etilacetáttal elkeverjük és szűrjük. Ezután a maradékot dimetilformamidban felvesszük és cseppenként hozzáadjuk száraz etilacetáthoz. Az elegyet 2 órán át keverjük 20 C -on, majd az amorf csapadékot leszűrjük. Kitermelés: 60%. Rf Bz : EtOH rendszerben (8 : 2) = 0,15, szilíciumdioxidon. c) Hasonlóképpen eljárva állítjuk elő az alábbi peptideket: Boc-0-Ala-Glu(OtBu)-His-D-Phe-Arg-OH, Boc-(a-Me)Ala-Glu(OtBu)-His-D-Phe-Arg-OH, Boc-Gly-Glu(OtBu)-His-D-Phe-Arg-OH, Dam-Glu(OtBu)-His-D-Phe-Arg-OH. d) Védőcsoportok eltávolítása A védőcsoportokat az 1. b) példa szerinti módon távolítjuk el. 60—65%-os kitermeléssel kapjuk az alábbi peptid-acetátokat: H-0-Ala-Glu-His-D-Phe-Arg-OH-acetát Rf x 0,13 H-Met-Glu-His-D-Phe-Arg-OH-acetát Rf x 0,18 H-(a-Me)Ala-Glu-His-D-Phe-Arg-OH-acetát Rf x 0,16 H-Gly-Glu-His-D-Phe-Arg-OH-acetát Rf x 0,13 Dam-Glu-His-D-Phe-Arg-OH-acetát Rf x 0,25 7. példa A-Glu-His-D-Phe-NH(CH2 ) S -NH 2 (ahol A jelentése H-Met, H-Ala, 5 H-Val vagy H-0-Ala) a) H-D-Phe-NH(CH2 ) s -NH-Boc 10 15 20 25 30 35 9,24 g Z-D-Phe-ONP-t feloldunk 40 ml dimetilformamidban. 4,77 g Boc-NH(CH2 ) 5 -NH 2 -hidroklorid 60 ml dimetilformamiddal és 2,88 ml trietflaminnal készített oldatának hozzáadása után az elegyet 20 órán át keverjük 20 G -on. A keletkező csapadékot szűréssel eltávolítjuk, a szűrletet szárazra pároljuk. Az olajszerű maradékot száraz etilacetátból kristályosítjuk. A csapadék leszűrése utáni kitermelés: 90% (8,66 g). Rf To : EtOH rendszerben (8:2) = 0,80, szilíciumdioxidon. Ennek a védett aminosavamidnak 4,8 g-ját 100 ml száraz metanolban feloldjuk. Hozzáadunk 0,9 g, 10% palládiumot tartalmazó aktív szenet, 2,5 órán át hidrogéngázt buborékoltatunk keresztül az elegyen, majd leszűrjük. A szűrletet szárazra pároljuk. Rf Bu : Ac : víz rendszerben (4:1:5) = 0,25, szilíciumdioxidon. b) Boc-Met-Glu(OtBu)-His-D-Phe-NH-(CH2 ) 5 -NH-Boc Az 1. a) példa szerinti módon előállított Boc-Met-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 -ból készített azid 5,85 gjához hozzáadunk 3,47 g a) lépésben előállított származékot és 3,76 ml N-etilmorfolint. Az elegy pH-ját 7,0-ra beállítjuk, majd az ele-40 gyet 70 órán át keverjük 0 C°-on. A keletkező csapadékot leszűrjük, majd a szűrletet vákuumban bepároljuk. A kapott maradékot vizes etilacetátban felvesszük, majd vízzel mossuk. Ezután a szerves fázist szárítjuk és bepároljuk. A 45 maradékot petroléterből kristályosítjuk. 50 55 60 Rf Bu : Py : Ac : víz rendszerben : 1 /4 : 1 ] = 0,76, szilíciumdioxidon. c) A megfelelő hidrazinokból kiindulva és hasonlóképpen eljárva az alábbi peptideket állíthatjuk elő: Boc-Val-Glu(OtBu)-His-D-Phe-NH--(CH2 ) 5 -NH-Boc, Boc-Ala-Glu(OtBu)-His-D-Phe-NH-(CH2 )s-NH-Boc, Boc-0-Ala-Glu(OtBu)-His-D-Phe-NH-(CH2 )s-NH-Boc. d) Védőcsoportok eltávolítása [4 :3/4 : xRf Bu : Py : Ac : víz rendszerben [4:3/4:1/4:1], szílíciumdioxidon. A b) és c) lépésekben kapott peptideket az 1. b) példa szerinti módon eljárva az alábbi peptid-65 -acetátokká alakíthatjuk. 8
