169326. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek előállítására aktivészteres módszerrel katalizátorok hozzáadása útján
23 169326 24 Analízis a Csi'liUaNiÖ? képlet (mólsúly 582,7) alapján: számított: C =63,91%, N = 9,60%, H = 7,27%, talált: C =64,2%, N = 9,7%. H = 7,7%, 1) Z-Phe-Val-Gln-OH számított: C =61,59%, N = 10,64%, H = 6,51%, talált: C =61,6%, N = 10,4%. H = 6,7%, zámított: alált: C =62,6%, N = 12,16%, C =62,2%, N =11,9%. H = 7,56%, H = 7,9%, 10 11,1 g (19 mmol) Z-Phe-Val-Gln-OBu'-t 30 ml trifluorecetsavban oldunk. Az oldatot 30 perc állás után szobahőmérsékleten bepároljuk, a maradékot éterrel eldörzsöljük és leszívatjuk. A terméket további tisztítás céljából etilacetáttal fel- 15 forraljuk, petrolétert adunk hozzá, leszívatjuk és szárítjuk. Hozam 8,45 g (85%), olvadáspont 225-227 C°. [á\y = -10,7° (c=l, dimetilacetamidban). Analízis a C27H34N4O7 képlet (mólsúly 526,6) 20 alapján: 25 m) Z-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Ile-Asn-ThKBuVoW 7,95 g (10 mmol) H-Trp-Leu-Ile-Asn-ThríBuVOBut-Hcl • és 5,27 g (10 mmol) Z-Phe-Val-Gln-OH 100 ml dimetilformamidban készült oldatához 1,3 ml N-etilmorfolint, 1,35 g 1-hidroxi-benzo-triazolt adunk és az oldathoz 0C°-on keverés közben 2,2 g diciklohexilkarbodiimid 20 ml dimetilformamidban készült hideg oldatát adagoljuk. A reakcióeiegyet 1 óra hosszat 0 C -on és 1 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük. A csapadékot leszívatjuk és a szűrletet bepároljuk. A maradékot nátriumhidrogénkarbonát oldattal eldörzsöljük és leszívatjuk. A szűrőn levő maradékot 1 liter etanollal felforraljuk. A nehezen oldható maradék súlya 5,6 g, ; olvadáspontja 253-255 C° (bomlik), [aß 0 =-15,3° (c=l, dimetilacetamidban). Az alkoholból még 2,8 g kikristályosodik, amelynek olvadáspontja 251 -254 C 'bomlik). összhozam 8,4 g (66,5%). Analízis a C66 H 9S NiiOi4 képlet (mólsúly .266,6) alapján: 55 ) H-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Ile-Asn-ThríBu*)-OBu* • CH3COOH 7,6 g (6 mmol) Z-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Ile-Asn-ThríBu^OBu* 250 ml jégecetban késült oldatához kevés Pd(OH)2/BaS0 4 katalizátort iunk és az oldaton a széndioxidfejlődés megszűéséig hidrogéngázt vezetünk keresztül. A katali-60 65 zátort leszívatjuk, a szűrletet bepároljuk és a maradékot éterrel eldörzsöljük. Hozam 7,4 g, olvadáspont 247-250 C° (bomlik). A terméket etilacetáttal felforraljuk és hidegen leszívatjuk. Hozam 6,78 g (95%), olvadáspont 248-251 C° (bomlik). II. Z-Asp(OBu')-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Ile-Asn-ThríBuVOBu* 6,32 g (5,3 mmol) H-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Ile-Asn-ThríBuVOBu* • CH3COOH 150 ml dimetilformamidban készült szuszpenziójához 0,86 g (5,3 mmol) 3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-kinazolint és 2,66 g (5,3 mmól) Z-AspíOBu^-OTcp-t adunk. 5 perces keverés után a reakcióeiegyet bepároljuk és a maradékot 2n nátriumkarbonát oldattal eldörzsöljük, leszívatjuk és vízzel mossuk. A szűrőmaradékot metanollal felforraljuk. A nehezen oldható maradék súlya 5,3 g, olvadáspontja 246-248 C° (bomlik). A szűrletből 0,5 g válik ki, olvadáspontja 244-246 C° (bomlik). [a]n5 =-15,0 (c=l, dimetilacetamidban). Összhozam 5,8 g (76,4%). Analízis a C74H108N12O17 képlet (mólsúly 1437,7) alapján: 30 35 40 45 50 számított: C =61,8%, N = 11,69%, H = 7,57%, talált: C =61,1%, N =11,7%. H = 7,6%, Az előbbivel azonos eredményre jutunk, ha az említett kinazolin-származék helyett a reakciónál a) l-hidroxi-4-metil-2-piridont, b) l-hidroxi-6-metoxi-benzo-triazolt vagy c) l-hidroxi-5-metil-benzo-triazort használunk. 10. példa Z-Phe-Val-OMe szintézise 2 g Z-fenilalanin-poli-4-hidroxi-3-nitro-sztirolgyantát [előállítása J.Amer. Chem. Soc. 90, 2953 (1966) szerint, az anyag 3 mmól Z-fenilalanint tartalmaz] 5 ml dimetilformamidban szuszpendálunk és 162 mg (1 mmól) 3-nidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-kinazolint, 168 mg (1 mmól) H-Val-OMe • HCl-t és 0,13 ml N-etilmorfolint adunk hozzá. A reakcióeiegyet 15 percig keverjük, leszívatjuk, dimetilformamiddal utánamossuk, a szűrletet bepároljuk és a maradékot etilacetát és nátriumhidrogénkarbonát oldat között megosztjuk. Az etilacetátos fázist 2 n sósavval nátriumhidrogénkarbonát oldattal és vízzel mossuk, vízmentes nátriumszulfáton megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot petroléterrel eldörzsöljük, leszívatjuk és szárítjuk. A hozam 395 mg (95%), olvadáspont 115 C . 11. példa Z—Tyr-Proinzulins —(31—63)—triakonta-tripeptid 40 mg (lOjumól) triakonta-tripeptid-trifluor-acetátot [előállítása Z. Naturforsch. 24 b, 999 (1969)] i2
